响应面法优选鸡血藤总黄酮的提取工艺

目的采用响应面法优选鸡血藤总黄酮的提取工艺。方法通过中心组合方法,研究乙醇体积分数、料液比、提取时间及提取次数对鸡血藤总黄酮得率的影响。结果鸡血藤总黄酮的最佳提取工艺为:体积分数为50%的乙醇,料液比为1∶45,回流提取2次,每次2.5 h。结论在最佳提取工艺条件下,鸡血藤总黄酮得率为0.58%,该工艺条件可为鸡血藤总黄酮的工业生产提供依据。     

不同来源鸡血藤化学特征与抗肿瘤作用差异研究

目的:评价不同来源鸡血藤生物活性、化学特征差异性,探讨正品鸡血藤优势,为鸡血藤的质量评价体系完善提供实验基础。方法:利用UPLC建立不同来源鸡血藤乙酸乙酯部位指纹图谱;利用香草醛-盐酸法、分光光度法及MTS法分别测定鸡血藤粗提物原花青素含量、DPPH·自由基清除率及人乳腺癌细胞(MDA-MB-231)IC_(50)。结果:指纹图谱相似度、DPPH·自由基清除率及原花青素含量结果在不同来源鸡血藤之间具有显著差异;UPLC指纹图谱相似度可区分广西鸡血藤、越南鸡血藤、云南鸡血藤与四川鸡血藤,DPPH·清除率及原花青素含量可区分广西鸡血藤、越南鸡血藤、云南鸡血藤与四川鸡血藤;相关性分析结果表明,DPPH·自由基清除率与原花青素含量呈明显正显著相关,自由基清除能力与抑制肿瘤细胞活力呈正显著相关(P<0.05或P<0.01)。结论:正品来源鸡血藤无论是在提取率、原花青素含量还是抑制乳腺肿瘤细胞活力都存在明显优势,原花青素含量可能是区分不同基源鸡血藤抗肿瘤作用的重要指标。     

综合权重相关分析优选鸡血藤抗肝肿瘤组分的提取工艺

目的优选鸡血藤抗肝肿瘤有效组分的提取工艺,为其生产利用提供可靠依据。方法采用正交设计试验方法,选取提取时间、料液比、提取次数、乙醇体积分数为考察因素,以药效为指标,优选提取工艺,再测定总黄酮含有量、芒柄花素含有量和出膏率。然后,通过对这三项指标赋予不同权重所得的多组综合评分与药效指标(细胞抑制率)进行相关度分析,确定能反映药效的指标及其权重范围。结果鸡血藤有效组分的最佳提取工艺为50%乙醇加热回流提取2次,料液比1∶30,提取时间1.5 h。总黄酮和芒柄花素含有量的最佳权重系数范围分别为0.6~1和0~0.4。结论该工艺条件下,细胞抑制率、总黄酮提取率及芒柄花素含有量均比较高,表明该方法合理、提取工艺稳定可行。     

基于生物活性和分子对接的滇鸡血藤水煎液质量控制研究

目的：初步探究滇鸡血藤水煎液活血功效的生物评价方法并挖掘参与凝血酶抑制的核心成分。方法：采用体外凝血酶活性抑制试验,评价滇鸡血藤水煎液体外凝血酶抑制活性。然后利用超高效液相色谱-质谱(UPLC-MS)挖掘滇鸡血藤水煎液中的化学成分,并通过分子对接技术对这些化学成分的生物活性进行评估,筛选核心抗凝成分。结果：凝血酶抑制试验表明滇鸡血藤的标准煎剂(0.2 g·m L^-1)具有高达78.40%的凝血酶抑制率,并从滇鸡血藤水煎液中推测鉴定了14个化合物,将其与凝血酶进行分子对接评价：戈米辛C(-7.9 kcal·mol^-1)、戈米辛G(-7.6 kcal·mol^-1)、内南五味子素C(-8.1kcal·mol^-1)、内南五味子素D(-9.4 kcal·mol^-1)、阿里山五味子灵C(-9.4 kcal·mol^-1)、五味子素C(-7.9 kcal·mol^-1)、五味子素A(-7.3 kcal·mol^-1)、异型南五味子素...     

鸡血藤精准煮散饮片与原饮片质量的对比性研究

目的：本研究采用化学指纹图谱法及DNA条形码分子鉴定技术对鸡血藤饮片煮散质量体系进行探索研究。方法：应用ITS2序列作为DNA条形码对鸡血藤进行鉴定,对比鸡血藤原饮片及精准煮散饮片的出膏率;收集3 个批次鸡血藤饮片,采用HPLC法进行3批次饮片混合粉碎前后质量均一性、指纹图谱与相似度评价。结果：ITS2序列对鸡血藤药材可实现准确鉴定。鸡血藤煮散饮片出膏率及指标成分表儿茶素含量均略高于原饮片;原饮片批间表儿茶素溶出量有明显差异性RSD 为11.0%,混合后制成煮散饮片后差异性明显降低RSD为1.0%。指纹图谱中14个共有峰相对峰面积均有所提高,RSD值明显减少。结论：鸡血藤精准煮散饮片提高原饮片的浸出率,成分溶出率及质量均一性,表明鸡血藤煮散饮片有较好的的临床应用优势。     

子午流注针法配合鸡血藤外洗治疗急性面神经炎

目的探讨子午流注针法配合鸡血藤外洗治疗急性面神经炎的临床疗效与依从性。方法将80例患者按随机数字表法分为观察组和对照组,每组40例。2组均予西医常规治疗,在此基础上,观察组予子午流注针法配合鸡血藤外洗,对照组予常规针刺。2组均以7 d为1个疗程,治疗4个疗程。观察治疗前后简易面神经功能评价量表(SFGS)静态对称性评分和随意运动对称性评分,并评价临床疗效和依从性。结果观察组的总有效率及依从率分别为95.00%、99.06%,高于对照组的82.50%、96.56%(P<0.05,P<0.01);治疗后2组SFGS静态对称性评分较治疗前下降,SFGS随意运动对称性评分较治疗前上升,观察组的改善优于对照组(P<0.05)。结论子午流注针法配合鸡血藤外洗通过减轻神经炎性反应、改善微循环、抗病毒、调节免疫等途径治疗急性面神经炎。     

广西产鸡血藤遗传多样性的RAPD与ISSR标记方法的比较研究

目的:比较随机扩增多态性DNA分子标记技术(RAPD)和简单重复序列间区扩增技术(ISSR)两种标记方法,研究广西不同居群鸡血藤遗传多样性的优劣。方法:分别采用RAPD和ISSR标记方法,利用POPGENE 32软件、Ntsys软件、SPSS 17.0软件,对广西不同采集地的9份鸡血藤的遗传多样性进行研究。结果:筛选出的3条RAPD引物及4条ISSR引物扩增后,共得到198和315个位点,多态性位点37和80个,多态性位点比率为18.7%和25.4%,有效等位基因数为1.416 8、1.584 0,基因多样性指数为0.269 4、0.351 3,Shannon多样性指数为0.431 6、0.529 9。ISSR标记均高于RAPD标记,RAPD和ISSR的平均遗传相似系数为0.757 64、0.683 80,表明ISSR检测遗传多样性更灵敏。二者的聚类结果相近,相关系数r为0.847,说明其在0.001水平呈极显著正相关。结论:ISSR标记方法比RAPD标记反映出更多的遗传多样性信息,更适合于广西产不同居群鸡血藤的遗传多样性研究。     

HPLC-ICP-MS测定泽泻、金银花、鸡血藤中可溶性价态砷及残留限度

目的 建立高效液相色谱-电感耦合等离子质谱(HPLC-ICP-MS)测定方法,分析金银花、泽泻、鸡血藤中4种不同价态砷,评估泽泻、金银花、鸡血藤中4种价态砷的残留情况,为制定相关残留限度提供依据。方法 采用0.05 mol·L^-1 EDTA溶液超声提取样品中可溶性砷,采用HPLC-ICP-MS分析样品中可溶性砷的形态。结果 As(Ⅲ)、DMA、MMA、As(Ⅴ)在5~200 μg·L^-1内线性良好,平均回收率(n=9)为105.1％~108.4％,方法检测限为0.01 mg·kg^-1。泽泻检出少量As(Ⅲ)、As(Ⅴ),金银花检出少量As(Ⅲ)、DMA、As(Ⅴ),鸡血藤则均未检出As(Ⅲ)、DMA、MMA、As(Ⅴ)。结论 该方法操作简便、结果准确、重复性好,能满足4种不同价态砷的残留限度分析。     

栽培鸡血藤藤茎次生代谢产物的动态积累变化研究

【目的】研究栽培鸡血藤藤茎中次生代谢产物在不同生长期的动态积累变化趋势,为其采收期的合理制定提供科学依据。【方法】参照《中国药典》（2010年版一部）附录XA测定醇溶性浸出物的含量;采用紫外分光光度法测定总黄酮的含量,采用高效液相色谱法同时测定原儿茶酸、儿茶素及表儿茶素的含量。【结果】鸡血藤藤茎中醇溶性浸出物、总黄酮及指标性成分原儿茶酸、儿茶素和表儿茶素的含量均随着生长年限的增加呈递增的趋势;而1年中不同月份样品的醇溶性浸出物、总黄酮、表儿茶素的含量变化均呈抛物线状,7～9月含量达到峰值;儿茶素的含量则一直呈上升状态;7～9月采收的4～6年生鸡血藤样品中醇溶性浸出物已达到现行版《中国药典》的要求。【结论】初步建议栽培鸡血藤藤茎以7年生以上采收为宜,其最佳采收年限与采收月份有待进一步研究确定。     

鸡血藤总黄酮对坐骨神经损伤大鼠机械痛敏影响的实验研究

目的：研究鸡血藤总黄酮对坐骨神经损伤（chronic constriction injury of the sciatic,CCI）大鼠机械痛敏和脊髓谷氨酸含量的影响。方法40只大鼠随机均分为4组：对照组（腹腔注射生理盐水,不手术）、假手术组（分离坐骨神经但不结扎+腹腔注射生理盐水）、模型组（坐骨神经结扎+腹腔注射生理盐水）、鸡血藤总黄酮处理组（坐骨神经结扎+腹腔注射鸡血藤总黄酮20 g/kg）,连续给药4周。运用机械缩足反射阈值检测术后3、7、10、14、21、28 d大鼠机械痛敏。运用高效液相法测定大鼠术后14、28 d脊髓背角中谷氨酸的含量。结果与模型组比较,处理组术后第10、14、21、28天的机械缩足反射阈值明显升高（P＜0.05,或P＜0.01）;在第14天及第28天观测到鸡血藤总黄酮可显著降低大鼠脊髓背角谷氨酸的含量（P＜0.01）。结论鸡血藤总黄酮可减轻神经病理性痛大鼠的机械痛敏,其机制可能与降低脊髓背角谷氨酸的含量有关。