蜂胶抑制变形链球菌生长和粘附的体外研究

目的:研究蜂胶对变形链球菌生长和粘附的影响.方法:①抑菌实验;分别将水溶性蜂胶和醇溶性蜂胶提取物等比稀释,采用钢管琼脂扩散法对变形链球菌和远缘链球菌做抑菌实验,测定最小抑菌浓度.②粘附抑制实验:在含不同浓度水溶性和醇溶性蜂胶,洗必泰,乙醇的轻唾液体培养基中培养变形链球菌,8天后测定粘附于毛细管表面变形链球菌量,并进行比较.结果:对变形链球菌和远缘链球菌最小抑菌浓度分别是:水溶性蜂胶为0.031625%和0.25%;醇溶性蜂胶均为0.078%.蜂胶各组及洗必泰组均可显著抑制变形链球菌的粘附(P＜0.05),0.5%水溶性蜂胶组,醇溶性蜂胶组及洗必泰组抑制粘附作用更强,三组之间无显著性差异(P＞0.05).结论:水溶性蜂胶和醇溶性蜂胶对变形链球菌生长和粘附都有显著的抑制作用.     

蜂胶及自制蜂胶奥硝唑合剂对人牙龈成纤维细胞的毒性作用

目的:了解蜂胶及自制蜂胶奥硝唑合剂对人牙龈成纤维细胞的毒性作用,为蜂胶及合剂的临床推广应用提供理论依据.方法:人牙龈成纤维细胞在不同浓度的蜂胶、奥硝唑和自制蜂胶奥硝唑合剂中体外培养24 h,用MTT法测定细胞相对增殖率(RGR);选择细胞增殖率约为50%的药物浓度组,重新培养细胞24 h,更换成不含药物的培养液连续培养7 d,每天用MTT法测定吸光度值,了解细胞增殖回复情况.结果:0.5g/L蜂胶组的RGR达到93.9%,与蜂胶其他2组间的差别有统计学意义(P<0.05);奥硝唑溶液加入蜂胶后,对应浓度组比较,两合剂组的平均吸光度值均大于奥硝唑组,其中当奥硝唑浓度为0.4g/L和0.8g/L时,差别有统计学意义(P蜂胶对人牙龈成纤维细胞的毒性较小,不会增加奥硝唑的细胞毒性,并且毒性作用是可逆的;蜂胶及自制蜂胶奥硝唑合剂作为牙周病局部用药,具有进一步的研究价值.     

蜂胶的指纹图谱研究

目的建立蜂胶HPLC指纹图谱,对蜂胶进行质量控制。方法采用RP-HPLC法以甲醇-0.1%磷酸溶液为流动相进行梯度洗脱,柱温35℃,检测波长285 nm。结果通过对10批蜂胶的10个主要色谱峰进行色谱峰匹配,得到对照指纹图谱,对35批蜂胶与对照指纹图谱进行比较,相似度均>0.90,可区别于杨树胶。结论所建立的蜂胶指纹图谱分析方法准确、可靠,具有较好的重现性,为蜂胶质量控制提供了实验依据。     

蜂胶总黄酮滴丸的高分辨液质联用分析研究

目的阐明蜂胶总黄酮滴丸的主要化学物质基础。方法利用高分辨液质联用技术对蜂胶总黄酮滴丸进行检测,通过对照品、分子量和质谱裂解规律对未知成分进行指认。结果经过分析,确定蜂胶总黄酮滴丸的主要化学成分为:山奈酚、乔松素、3-O-乙酰基短松素、白杨素和高良姜素。结论利用高分辨液质联用技术可以高效准确的在未知提取物中确认主要的化学成分,可以作为蜂胶总黄酮滴丸质量控制的有力手段。     

蜂胶总黄酮对全脑缺血再灌注大鼠脑血管舒张功能的影响

目的探讨蜂胶总黄酮(Tota1 flavonoids of propoli,TFP)对全脑缺血再灌注大鼠离体脑基底动脉舒张功能的影响及机制。方法采用四血管阻断法制备大鼠全脑缺血再灌注模型;断头取脑后取基底动脉,采用微血管离体灌流实验,以1μmol·L-1 PE预收缩血管后,观察累积浓度的TFP(0.011~2.7 g·L-1)对大鼠离体脑基底动脉的舒张作用。结果在全脑缺血再灌注大鼠,TFP(0.011~2.7 g·L-1)对内皮完整的离体脑基底动脉具有浓度依赖性舒张作用,其最大舒张率为(89.4±3.1)%,与灯盏花素组比较无显著差异(P0.05);去除血管环内皮后,TFP的最大舒张率降至(33.5±4.5)%,与内皮完整组比较明显降低(P0.01);在内皮完整的基底动脉环,用L-NAME+Indo预孵育后,TFP的最大舒张率降为(48.4±3.9)%,与未孵育内皮完整组比较明显降低(P0.01),但仍显著高于去内皮组(P0.01)。结论 TFP对全脑缺血再灌注大鼠离体脑基底动脉具有部分内皮依赖性舒张作用,并且其内皮依赖性舒张作用有EDHF的参与。     

在流动状态下蜂胶对血小板与胶原粘附功能的影响

目的探讨蜂胶提取液对血小板与胶原粘附功能的影响。方法采用体外灌注法，复制血管内膜创伤模型，在剪切应力为1000／s时，血液流经胶原膜后，测量血小板粘附面积。加入24％的乙醇作阴性对照组，终浓度为0．1g/L的24％乙醇蜂胶提取液为实验组，同浓度的阿魏酸作阳性对照组。结果阴性对照组与实验组相比较，胶原膜表面血小板粘附面积从24．0％降至11．5％，经统计学处理有非常显著性差异（P〈0．01）；阳性对照组胶原膜表面血小板粘附面积与阴性对照组相比，差异亦有非常显著性统计学意义（P〈0．01）；但与实验组比较，血小板粘附面积无统计学差异（P〉0．05）。结论蜂胶乙醇提取液能明显降低血小板在胶原膜表面的粘附。     

蜂胶结合冰硼散治疗Ⅱ期压疮的疗效观察

目的探讨蜂胶结合冰硼散治疗Ⅱ期压疮的临床疗效。方法将65例Ⅱ期压疮患者随机分为观察组33例和对照组32例,观察组除常规压疮干预外,给予蜂胶结合冰硼散治疗,对照组予常规压疮护理。治疗7d后,观察创面的大小、深度、色泽、表面有无结痂、渗出、脓腐及肉芽组织生长情况。结果观察组的治愈率及有效率均明显优于对照组（P〈0.01）。结论蜂胶结合冰硼散治疗Ⅱ期压疮疗效肯定、方法简便、费用低廉,值得推广应用。     

蜂胶在免疫实验教学中应用的实验研究

目的为提高免疫实验教学质量,寻找一种安全、高效的免疫佐剂。方法选取牛血清白蛋白为抗原,制备弗氏佐剂-抗原乳化物和蜂胶-抗原混合物,分别免疫昆明种小鼠后,取小鼠血清,通过SDS-PAGE检测血清中IgG的产生情况,经间接ELISA法分析小鼠抗血清效价,观察两种不同佐剂对诱导小鼠获得性免疫应答作用的差异。结果蜂胶佐剂比弗氏佐剂免疫小鼠血清中IgG的产生时间更快、效价更高、更持久。结论蜂胶佐剂在免疫学教学实验中的应用切实可行,有利于提高免疫实验教学质量。     

蜂胶对高脂饲料诱导的动脉粥样硬化家兔的干预效应

目的：观察蜂胶对高脂诱导的动脉粥样硬化的干预作用.方法：实验于2003-05/11在泰山医学院动物室、诊断学实验室和形态学实验室完成.选择雄性新西兰家兔24只,随机分为4组,对照组、模型组、蜂胶组及卡托普利组各6只.①对照组：喂饲基础颗粒饲料.②模型组：喂饲高脂饲料（基础颗粒饲料＋100 g/L猪油＋10 g/L胆固醇）.③蜂胶组：在喂饲高脂饲料的基础上,灌胃蜂胶0.35 g/d.④卡托普利组：在喂饲高脂饲料的基础上,灌胃给予卡托普利15 mg/d.每只家兔约食饲料110～140 g/d,12周末处死,取血清及动脉标本待查.①测定血清总胆固醇,三酰甘油,高、低密度脂蛋白胆固醇水平采用酶法.②测定血清超氧化物歧化酶、丙二醛、一氧化氮水平测分别采用黄嘌呤氧化酶法、硫代巴比妥酸法、硝酸还原酶法.③组织学观察：麻醉处死动物后立即解剖分离主动脉,记录主动脉壁粥样斑块大小.截取主动脉降部切片后光镜下观察主动脉壁及内膜损伤程度.④免疫组化法检测：增殖细胞核抗原染色、原位细胞凋亡染色均使用链酶亲和素-过氧化物酶法.把增殖细胞核抗原切片及原位细胞凋亡切片放在光镜下各取10个视野,计数每个视野斑块中的阳性细胞数均值作为阳性细胞数.把苏木精-伊红切片放在光镜下取与前面切片相同部位的10个视野,计数每个视野斑块中所有细胞数的均值作为细胞总数.增殖指数=增殖细胞核抗原染色阳性细胞数/细胞总数&;#215;100%;凋亡指数=原位细胞凋亡染色阳性细胞数/细胞总数&;#215;100%.结果：所有家兔全部进入结果分析,无脱落.①各组家兔动脉粥样硬化的病理改变：模型组出现典型动脉粥样硬化病理变化,全部动脉内皮下层明显增生、增厚,为多量泡沫细胞聚集形成,伴有纤维组织、无定型物质及钙盐沉积.蜂胶组也有病理改变,但内皮下仅轻、中度增生,泡沫细胞聚集,未见纤维组织和无定型物质.②各组家兔血脂水平的比较：蜂胶组、卡托普利组家兔的总胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇水平均明显低于模型组（P＜0.01）,而蜂胶组显著低于卡托普利组（P＜0.01）.卡托普利组、蜂胶组家兔的三酰甘油水平显著低于模型组（P＜0.05～0.01）.③各组家兔血清超氧化物歧化酶、丙二醛及一氧化氮水平的影响：蜂胶组家兔超氧化物歧化酶水平明显高于模型组和卡托普利组（P＜0.01）.蜂胶组血清丙二醛含量显著低于模型组和卡托普利组（P＜0.05～0.01）.蜂胶组、卡托普利组血清NO2^-/NO3^-含量显著高于模型组（P＜0.05）.④各组家兔免疫组化法检测结果：蜂胶组、卡托普利组家兔的增殖指数、凋亡指数均显著低于模型组（P＜0.01）.结论：蜂胶能有效地预防实验性动脉粥样硬化的形成,其作用途径可能和其降低斑块细胞的增殖和凋亡以及降脂、抗氧化、保护内皮作用有关.     

蜂胶乔松素对脂多糖诱导人脐静脉内皮细胞的保护作用

目的:观察蜂胶乔松素对脂多糖诱导人脐静脉内皮细胞的影响,探讨其对人脐静脉内皮细胞可能的保护作用。方法:实验于2006-03/10在泰山医学院生命科学研究所(省重点实验室)完成。①实验材料:取出生1h内新生儿脐带,患者知情同意。②实验分组及方法:培养人脐静脉内皮细胞,建立脂多糖损伤模型(以10mg/L的脂多糖培养液培养细胞12h),实验分为空白对照组(加等量D-Hank’s液)、脂多糖组(10mg/L)、乔松素组(加10mg/L脂多糖预孵育12h后,按50,100,200mg/L分别加入乔松素),各组设8个复孔,共同孵育24h。③实验评估:光镜下观察细胞形态,MTT法观察乔松素对人脐静脉内皮细胞活性的影响,ELISA方法检测培养上清中血管假血友病因子的含量,TUNEL检测细胞凋亡率。结果:①细胞形态:空白对照组细胞紧密贴壁,呈铺路石状生长。脂多糖组可见多数细胞呈圆形;乔松素组见上述细胞较脂多糖组明显减少。②乔松素对人脐静脉内皮细胞活性、凋亡及血管假血友病因子含量的影响:与对照组比较,脂多糖组能明显诱导人脐静脉内皮细胞的凋亡(P<0.01),不同浓度乔松素组可改善内皮细胞形态,组织活性明显升高(P<0.05),同时抑制内皮细胞血管假血友病因子的释放(P<0.05),使脂多糖诱导的人脐静脉内皮细胞凋亡细胞数明显减少(P<0.05)。结论:乔松素能增强人脐静脉内皮细胞活性,抑制脂多糖诱导人脐静脉内皮细胞的凋亡,从而发挥可能的内皮细胞保护功能。