慢性肾功能衰竭升降失衡证红细胞膜Na~+、K~+-ATP酶的研究

对30例慢性肾衰升降失衡证患者按升降不及、升降反常分两组,用保元汤加大黄治疗,总有效率63.3%。同时测定红细胞膜 Na~ 、K~ -ATP 酶活性(μM/mg 蛋白·小时)和哇巴因抑制率(%)与30名健康人比较,两组酶活性分别降低71%、76%;抑制率分别降低31%、33%。其中16例治疗后酶活性均值分别由治疗前85.1、75.3,提高到219.9、185.9;抑制率均值分别由治疗前62.7、57.2,提高到77.2、70.2。临床症状好转,肌酐、尿素氮下降。表明细胞膜运转障碍与升降失衡证存在联系,中药对酶活性有调节作用。     

牡蛎功能短肽的制备及ACE抑制活性

以新鲜无壳牡蛎为原料,采用酶水解的方法制备牡蛎短肽,经SephadexG 15分离,并用HPLC测定其相对分子质量分布,通过HPLC法定量马尿酸测定各组分的ACE(血管紧张素转化酶)抑制活性。结果表明,牡蛎水解液中相对分子质量较大和较小部分的ACE抑制活性偏低,只有相对分子质量在一定范围内的短肽,对ACE具有较好的抑制作用,质量浓度为0.4mg/mL的牡蛎功能短肽的ACE抑制率为51.4%.     

硒和叶绿酸抗MNNG、BaP诱发BALB／3T3细胞非程序DNA合成的研究

BALB／3T3细胞用^14C-TdR掺入并同步化，然后与^3H-TdR和受试物培养，用液闪法测定非程序DNA合成水平．结果10^-6、10^-5和10^-4mol／L Na2SeO3对3μg／ml MNNG诱发UDS的抑制率分别为45％、56％和82％，对0．5μg／ml BaP的抑制率为57％、76%和79％；0．1、0.15和0．2mg／ml叶绿酸(Ch1))对3μg／ml MNNG诱发UDS的抑制率分别为45％、66％和87％，     

具有靶向免疫抑制作用新型重组融合蛋白B7-2-PE40KDEL真核表达载体的构建及其生物效应

目的:构建B7-2-PE40KDEL的真核表达载体,探讨通过体内表达重组融合蛋白,特异性杀伤高表达CD28 T细胞,阻断B7∶CD28/CTLA4共刺激信号途径诱导免疫耐受的可能性.方法:以原核表达载体pRSETA-B7-2-PE40KDEL质粒为模板,采用PCR及酶切连接的方法构建真核表达载体pcDNA3.1/Zeo( )-B7-2-PE40KDEL.利用RT-PCR、Western 印迹及ELISA法从mRNA、蛋白质水平检测了B7-2-PE40KDEL在RPE-CHO真核细胞中的表达情况.采用MTT法对其特异性杀伤高表达CD28 T细胞的生物活性进行测定.结果:成功构建了pcDNA3.1/Zeo( )-B7-2-PE40KDEL真核表达载体,转染入RPE-CHO细胞后可转录翻译为重组融合毒素蛋白,相对分子质量约为71×103,平均106个转染细胞24 h表达0.23 μg/L.活性测定显示真核载体所表达的B7-2-PE40KDEL可特异性地抑制高表达CD28的人T淋巴细胞系,而对CD28阴性的人白血病细胞系的抑制率较低.结论:真核载体表达的B7-2-PE40KDEL具有良好的靶向性免疫抑制活性,为进一步开展其体内特异性防治移植排斥反应及自身免疫性疾病奠定了基础.     

抗癌新药3′,5′-环胞苷二棕榈酸酯脂质体的研究

将3′,5′-环胞苷二棕榈酸酯包封于脂质体中.药效学研究表明,药物的脂质体剂型对腹水型肝癌细胞的抑制率比游离药物以及阿糖胞苷脂质体的抑制率高1倍以上.化学动力学实验显示,在pH为6.9时,脂质体中药物的分解反应速度比游离药物慢得多,其有效期比游离药物长3倍以上.用荧光法研究药物分子在脂双层上的状态,探讨了药物包封于脂质体中抗癌活性及化学稳定性提高的原因.     

miR-21靶向E2F1对三阴性乳腺癌细胞恶性生物学活性及裸鼠肿瘤抑制率的影响

目的 探究miR-21靶向E2F1对三阴性乳腺癌细胞恶性生物学活性及裸鼠肿瘤抑制率的影响。方法将MDA-MB-231细胞分为5组,即MDA-MB-231组、miR-21 inhibitor组、miR-NC inhibitor组、siRNA-E2F1组和siRNA-NC组。检测细胞中miR-21表达（RT-PCR法）;分别检测细胞增殖（MTT法）、侵袭（Transwell法）、迁移（划痕实验）和凋亡能力（流式细胞仪）;检测细胞中E2F1蛋白表达;检测miR-21与E2F1的靶向关系（双荧光素酶实验报告）。结果MDA-MB-231细胞中miR-21表达明显高于MCF10A细胞（P<0.05）;miR-21 inhibitor组细胞细胞中miR-21表达明显低于MDA-MB-231组（P<0.05）。与MDA-MB-231组相比,miR-21 inhibitor组细胞吸光度值、侵袭能力、迁移能力和细胞中E2F1蛋白表达均明显降低,细胞凋亡能力明显升高（P<0.05）;MDA-MB-231组细胞吸光度值、侵袭、迁移、凋亡能力和细胞中E2F1蛋白表达与miR-NC inhibitor组相比差异无统计学意义（P>0.05）。预测软件显示E2F1的3′UTR端与miR-21有碱基互补结合点位。通过向MDA-MB-231细胞中转染野生型E2F1（E2F1-WT）时,miR-21组荧光素酶活性明显低于miR-NC组（P<0.05）;miR-21组和miR-NC组突变体荧光素酶活性相比差异无统计学意义（P>0.05）。与siRNA-NC组相比,siRNA-E2F1组细胞增殖、侵袭、迁移和细胞中E2F1蛋白表达均明显降低,细胞凋亡能力明显增加（P<0.05）。与miR-NC inhibitor组裸鼠移植肿瘤第8天时相比,miR-21 inhibitor组裸鼠肿瘤体积明显降低,肿瘤抑制率为45.3%（P<0.05）。结论低表达miR-21可抑制三阴性乳腺癌细胞增殖、侵袭,促进凋亡,且抑制裸鼠移植瘤体积,其作用机制可能与抑制E2F1表达有关。     

几种反应性氧代谢物逆转剂免疫佐剂作用的比较

目的 分析比较硫普罗宁(TIP)、还原型谷胱甘肽(GSH)、二氢氯组胺(DHT)3种反应性氧代谢物(ROM)逆转剂抗白血病细胞免疫治疗中的增效作用.方法 在K562细胞、NK细胞的混合培养系中分别加入单核细胞和白细胞介素-2,然后分别加入TIP、GSH、DHT,观察ROM水平及K562细胞抑制率(KIR)的变化.结果 加入E/MO=10/2、10/5、10/10三种浓度的MO,ROM水平分别为(389.79±43.83)U/L,(456.74±42.77)U/L,(601.42±21.92)U/L,KIR分别为82.36%,81.36%,48.09%:加入TIP、GSH或DHT后,当E/MO=10/2时,ROM水平从(389.79±43.83)U/L,分别减至(-1.20±60.70)U/L、(-3.58±9.49)U/L和(50.21 4-22.4)U/L(P＜0.05),随着TIP、GSH或DHT浓度的增加ROM水平逐渐减少,KIR从82.53%分别升至96.09%、96.39%和94.64%(P＜0.05).结论 TIP、GSH逆转ROM的效应强于DHT,提高NK细胞对K562的抑制率,其效应强度与DHT相似,但毒副作用轻微,两者均可能成为更理想的抗白血病的免疫佐剂.     

硒多糖对染砷大鼠血清、睾丸和肝脏补体抑制活性的影响

目的 观察硒多糖对染砷大鼠血清、睾丸、肝脏匀浆上清补体抑制率的影响。方法 采用Ｗistar雄性大鼠分为对照组（蒸馏水）、染砷组（４．６mg/kg Ａs2Ｏ３）、砷＋硒多糖组（４．６mg/kg Ａs２Ｏ３＋４０mg/kg硒多糖）３组,染毒５周,采用补体溶血抑制实验,测定大鼠血清、睾丸、肝脏匀浆上清（１：１０）补体抑制活性。病理切片观察肝脏病理改变。结果 染砷组大鼠血清、睾丸匀浆上清补体抑制率显著低于对照组（Ｐ〈０．０５）     

肿瘤体外药敏试验及其与临床用药之间的关系

目的：研究肿瘤体外药敏试验(MTT法)与临床用药之间的关系。方法：将210例5种肿瘤标本(85例卵巢癌、30例宫颈癌、26例胃癌、41例结直肠癌、28例乳腺癌)的体外药敏试验(MTT法)结果进行分析：比较同一药品对同一种肿瘤标本不同病例的抑制率差异，计算每一种肿瘤标本相对于每一种药物的抑制率的平均值，筛选出平均抑制率较大的药物，与临床上常用于该肿瘤的药物进行比较。结果：肿瘤体外药敏存在明显个体差异，其抑制率差异可达0～60％以上，而其平均抑制率结果与临床用药经验比较符合，体外试验较敏感同时临床较常用的药物主要有卵巢癌：用紫杉醇(Taxol)、顺铂(DDP)等；宫颈癌：用DDP、表柔比星(e-ADM)、丝裂霉素(MMC)等；胃癌：用DDP、氟尿嘧啶(5-FU)、博来霉素(BLM)、MMC等；结直肠癌：用DDP、MMC、BLM、5-FU等；乳腺癌：用e—ADM、多柔比星(ADM)、长春瑞滨(NVB)等。结论：肿瘤体外药敏试验结果可以为临床个体化治疗提供参考。