从肾论治面部痤疮验案

袁红霞教授强调运用中医的“和”法治疗疾病，对传统经典方剂的运用颇有经验。笔者有聿师从袁教授，选其巧用左归丸从肾论治面部痤疮的验案如下。     

三种补肾方对老年大鼠下丘神经递质的影响

目的：观察三种补肾方对24个月龄老年大鼠下丘氨基酸类神经递质的影响.方法：采用反相高效液相色谱(HPLC)荧光法、受体放射分析法、RT PCR法测定大鼠下丘的氨基酸递质含量、受体特异性结合量及受体亚单位的mRNA表达.结果：24个月龄大鼠下丘存在兴奋/抑制失衡,表现为下丘γ 氨基丁酸(GABA)能抑制作用减弱,可能与耳鸣发病率随年龄增长而增加有关.补肾息鸣经验方使24个月龄大鼠下丘氨基酸类神经递质介导的抑制作用上调和兴奋作用下调；左归丸及右归丸使24个月龄大鼠下丘兴奋性与抑制性氨基酸类神经递质(Asp、Tau、GABA)含量均有明显上升.结论：对肾虚耳鸣的治疗应在补肾的基础上结合开窍活血等药物.     

左归丸对SD大鼠骨髓间充质干细胞增殖的影响

目的:观察不同浓度左归丸水提液对体外培养的SD大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)增殖的影响。方法:应用全骨髓贴壁法体外分离培养大鼠BMSCs,并传代扩增,采用倒置显微镜进行细胞形态学观察,免疫组化检测细胞表面抗原鉴定其表面标志。将BMSCs分为对照组及不同浓度左归丸干预组,采用MTT比色法观察不同浓度左归丸水提液干预后BMSCs增殖的情况。结果:采用全骨髓贴壁法获取的BMSCs形态以长梭形为主,呈集落样生长。体外培养的BMSCs免疫组织化学鉴定显示CD44,CD29呈阳性表达,CD34呈阴性表达。MTT检测结果显示,与空白对照组相比,相当于生药质量浓度2.5～4 g·L-1的左归丸水提液干预24 h后,干预组吸光度均明显增高(P<0.01),而与其他浓度相比1 g·L-1时左归丸水提液促进BMSCs增殖的作用最强。结论:所培养的大鼠骨髓基质细胞在细胞表型表达和细胞形态上具备BMSC特征。左归丸水提液在一定浓度范围内可以提高BMSCs的体外增殖能力。     

低出生体重小鼠模型制备及左、右归丸对其骨髓细胞数量及功能的影响

目的:研究左、右归丸对先天之精不足之低出生体重小鼠骨髓细胞数量及功能的影响,探究左、右归丸补肾作用的生物学实质。方法:通过孕鼠饥饿法得到低出生体重小鼠,仔鼠自5～10周,分别灌胃左、右归丸后,检测骨髓有核细胞数、骨髓各系造血祖细胞集落产率、骨髓基质细胞粘附能力并与正常和灌胃生理盐水及未灌胃组比较。结果:模型组新生仔鼠体重极显著低于正常组新生仔鼠;各模型组的骨髓有核细胞数均低于正常小鼠;右归丸组的骨髓有核细胞数量显著高于生理盐水组;模型小鼠各组的CFU-GM、CFU-E、BFU-E祖细胞集落产率和生理盐水组、空白组的CFU-Meg集落产率均极显著低于正常小鼠;右归丸组CFU-GM集落产率、左归丸CFU-E、CFU-Meg集落产率分别高于生理盐水组;基质细胞体外培养的7、14、21天,空白组和生理盐水组的基质细胞黏附能力均显著低于正常组,在第7天,左、右归丸组基质细胞黏附能力均显著低于正常组、显著高于模型空白和模型盐水组;在14天和21天时,左右归丸组与正常组相比无差异;且在14天时,右归丸高于生理盐水组;在21天时,左、右归丸组均高于生理盐水组。结论:孕鼠饥饿法得到的低出生体重小鼠骨髓细胞数量和部分功能显著低于正常小鼠,左、右归丸能不同程度、不同角度地促进低出生体重小鼠骨髓细胞数量提高和功能恢复。这可能是左、右归丸对先天之精不足小鼠发挥"补肾"作用的途径之一。     

左归丸对小鼠自身免疫性卵巢损伤的保护作用

目的探讨补肾复方左归丸对卵巢早衰（premature ovarian failure,POF）的影响。方法以SD雌性大鼠卵巢组织制备卵巢抗原,皮下多点注射免疫BALB／C雌性小鼠,建立卵巢早衰模型。于造模过程中不同时间点用左归丸处理小鼠,以泼尼松为阳性对照,放射免疫法检测外周血卵泡刺激素（FSH）、雌二醇水平（E2）,酶联免疫法检测外周血抗卵巢抗体（AoAb）,原位杂交法检测卵巢组织生长分化因子-9（GDF-9）mRNA的表达。结果POF小鼠卵巢间质可见淋巴细胞浸润,外周血FSH升高,E2下降,AoAb阳性,卵母细胞GDF-9 mRNA阳性细胞数减少,生长卵泡及成熟卵泡数减少。左归丸能减缓POF小鼠外周血FSH升高,提高体内E2水平,抑制AoAb产生,提高卵母细胞GDF-9 mRNA阳性细胞数,使生长卵泡及成熟卵泡数增加,早期用药比后期用药作用显著。结论左归丸能改善卵巢免疫性炎症的损伤,对免疫性卵巢早衰具有治疗作用。     

左归丸对骨髓抑制小鼠造血调控的影响

目的 观察左归丸对骨髓抑制小鼠外周血、造血干细胞增殖能力、骨髓细胞周期和凋亡的影响,并探讨其可能的造血调控机制.方法 将48只大鼠随机分为6组,即正常对照组、模型组、阳性对照组和左归丸低、中、高剂量组,各8只,除正常对照组外,其余各组采用60Coγ射线和环磷酰胺联合制作骨髓抑制大鼠模型,于造模结束后第2 d开始给药,模型组、正常对照组予0.9%氯化钠注射液,左归丸低、中、高剂量组予相应浓度左归丸,阳性对照组予重组人粒细胞集落刺激因子注射液.各组均给药7 d.用全自动血细胞分析仪、白细胞计数法、造血祖细胞培养和流式细胞术分别检测左归丸对骨髓抑制小鼠外周血、骨髓有核细胞数、体外培养各系造血祖细胞的集落数以及骨髓细胞周期和调亡的影响.结果 左归丸中、高剂量均能明显升高外周血红细胞、血红蛋白、骨髓有核细胞(P＜0.05,P＜0.01),左归丸中剂量对血小板和左归丸高剂量对白细胞有明显升高作用(P＜0.05).左归丸中剂量组和阳性对照组能提高体外培养各系造血祖细胞的集落数(P＜0.05,P＜0.01),左归丸高剂量组粒单系细胞集落生成单位、红系细胞集落生成单位和爆增型红细胞集落生成单位数提高显著(P＜0.05,P＜0.01).左归丸各剂量组均能促进骨髓G0/G1 期细胞向S期细胞以及S期细胞向G2/M期细胞的转化,从而导致G2/M期细胞比例和增殖指数(PI)明显升高(P＜0.05,P＜0.01).左归丸各剂量组的骨髓细胞凋亡比例与模型组比较均显著下降(P＜0.01),与阳性对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 左归丸可能通过促进G0期造血干细胞进入细胞周期,进行增殖;加速骨髓细胞修复受损的DNA,通过G1/S和S期监测点;抑制造血细胞的凋亡等机制,从而促进损伤骨髓造血功能恢复.     

左归丸抗乳腺癌转移及其作用机制

目的:观察左归丸的抗乳腺癌转移作用,探讨其作用机制。方法:采用股骨内注射法建立人乳腺癌细胞MDAMB-231骨转移裸鼠模型,受试裸鼠随机分为空白组(蒸馏水),左归丸低、高剂量(21,42 g·kg-1)组。连续给药8周后,采用巢式聚合酶链式反应(PCR)检测裸鼠骨髓组织中人细胞角蛋白(ck19)基因的表达,确定肿瘤转移情况;采用Oris法,检测左归丸含药血清对乳腺癌细胞MDA-MB-231体外迁移能力的影响;采用重组基底膜侵袭法,观察左归丸含药血清的体外抗侵袭作用;采用Alexa Fluor488标记的鬼笔环肽(Phalloidin)进行荧光染色,观察左归丸含药血清对乳腺癌细胞纤维型肌动蛋白(F-actin)聚合的影响;采用蛋白质印迹法(Western blot)检测左归丸含药血清对MDA-MB-231细胞甲状旁腺激素相关蛋白(PTHr P)和4型趋化因子受体(CXCR4)表达的影响。结果:与空白组比较,左归丸高、低剂量均可显著抑制小鼠骨髓组织中人ck19基因表达(P0.01)。Oris迁移表明,左归丸含药血清可显著抑制转化生长因子-β(TGF-β)诱导的MDA-MB-231细胞迁移;重组基底膜侵袭实验显示,左归丸含药血清也可显著抑制乳腺癌细胞对重组基底膜的侵袭能力。给药组侵袭细胞数较空白组显著降低(P0.01)。Phalloidin荧光染色结果显示,左归丸含药血清可显著抑制F-actin聚合,抑制F-actin聚合体的形成。Western blot结果表明,左归丸含药血清可显著抑制乳腺癌细胞PTHr P,CXCR4蛋白表达。结论:左归丸具有明显的抗乳腺癌骨转移作用,其机制与抑制肿瘤细胞PTHr P,CXCR4表达,从而直接抑制其体外运动活性相关。     

从脏腑辨证谈左归丸的临床运用

左归丸出自《景岳全书》,具有滋阴补肾,填精益髓的功用,临床上可辨证应用于治疗女性更年期综合征、内分泌科疾病、生殖机能异常性疾病、多种骨科劳损性疾病、常见老年性疾病和慢性血液科疾病等多种西医疾病;根据中医脏腑辨证理论,上述西医疾病或和肾藏精功能失调有关,或和肾主生殖作用异常有关,或和肾主骨生髓作用异常有关,且中医辨证总不离肾阴虚损精气亏虚;用药上,可以左归丸辨证配伍益阴柔肝、安神定志之药治疗女性更年期综合征,合用活血通络、行气安神之品治疗常见心脏病,对女性不孕症及月经失调等病的治疗又可以左归丸合用二至丸来调补肝肾,而对于骨科疾病常用左归丸再加补肾强腰壮骨之品,对于痴呆及帕金森等老年病又常需伍入祛瘀通络药。     

左归丸联合西曲瑞克调节卵巢储备功能作用研究

探讨补肾养阴方药左归丸联合促性腺激素释放激素拮抗剂西曲瑞克调节SIRT1/P53/P21对卵巢储备功能下降(decreasing ovarian reserve, DOR)小鼠卵巢局部氧化应激反应的影响。所有动物实验均在暨南大学实验动物管理委员会的指导和标准下进行。以环磷酰胺(cyclophosphamide, CTX)诱导的DOR小鼠为实验对象,分别灌胃给予左归丸、西曲瑞克及两药联合治疗。治疗结束后,观察小鼠动情周期变化、血清性激素水平、氧化应激相关指标、生长生化因子水平及SIRT1/P53/P21的表达情况。结果显示,与模型组比较,左归丸和联合用药组可明显延长动情期、缩短动情间期,联合用药组更可明显缩短周期长度;与模型组比较,各治疗组性激素相关指标检测均出现卵泡刺激素(follicle-stimulating hormone, FSH)下降、雌二醇(estradiol, E₂)增高,氧化应激指标一氧化氮合酶(nitric oxide synthase, NOS)、一氧化氮(nitric oxide, NO)及活性氧(reactive oxygen specie...     

二至丸合左归丸治疗青春期崩漏53例疗效观察

青春期崩漏相当于现代医学的功能失调性子宫出血,是妇科常见病,笔者从2003年6月-2006年1月采用二至丸合左归丸治疗本病,并与对照组比较,现报道如下.