硫酸酯化茯苓多糖对裸鼠胃腺癌的抑制研究

目的探讨硫酸酯化茯苓多糖(S-PCS3-II)对裸鼠胃腺癌的抑制作用。方法无菌抽取人低分化胃腺癌细胞MKN-45,接种于裸鼠右侧腹股沟皮下,形成皮下移植瘤。将裸鼠随机分成5组:正常饮水饮食组、生理盐水(阴性对照)组、低剂量治疗组、高剂量治疗组、5-Fu(阳性对照)化疗组,从一般状况、大体病理、抑瘤率等方面观察硫酸酯化茯苓多糖对裸鼠胃腺癌的抑制作用。结果裸鼠胃腺癌模型制作成功率100%,硫酸酯化茯苓多糖(S-PCS3-II)能明显的抑制胃腺癌的生长,与阴性对照组比较,有显著性差异(P<0.05),高剂量组(250 mg/kg/d)的抑制率达到47.9%。结论硫酸酯茯苓多糖在裸鼠体内能有效地抑制胃腺癌细胞的增长,该多糖衍生物可以作为潜在的抗胃癌药物。     

中药猪苓的生药学研究

报道了猪苓的植物来源、性状、显微组织特征、理化鉴别反应,多糖、总灰分、酸不溶性灰分及水溶性浸出物的含量测定,为猪苓的质量控制及药典标准规格的修订提供了参考依据。     

基于高通量测序的人工培殖冬虫夏草僵虫颜色变化转录组分析

目的:探索人工培殖冬虫夏草Cordyceps sinensis(BerK.)Sacc.外观品质形成的分子基础。方法:以重庆和康定人工培殖冬虫夏草僵虫为材料,利用Illumina Hiseq 2500高通量测序技术进行转录组测序分析,基于差异倍数(FC)和错误发现率(FDR)筛选差异表达基因,具体筛选条件为|log2FC|>1、FDR<0.05。结果:共获得21942个转录本,利用DEGSeq筛选获得1575个差异表达基因,其中上调表达基因626个、下调表达基因949个;基因本体(GO)数据库和京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析结果显示,这些差异表达基因主要集中于氨基酸代谢、折叠-分选-降解、糖代谢、转运和分解代谢、辅酶因子和微生物代谢等途径;筛选到66个颜色变化差异表达基因,包含46个氧化还原酶活性相关基因、12个过氧化物酶体相关基因、3个单加氧酶活性调节相关基因、3个黑化反应相关基因、2个活性氧代谢相关基因,其中tyr1、TYR基因可能是冬虫夏草僵虫颜色变化的关键功能基因。结论:利用高通量测序技术和生物信息分析获得了人工培殖冬虫夏草僵虫转录组信息特征,为阐明人工培殖冬虫夏草僵虫颜色变化的调控机制研究提供参考。     

雷丸中16种氨基酸的柱前衍生化RP-HPLC法含量测定

目的:测定雷丸中16种氨基酸的含量。方法:样品以6 mol.L-1盐酸于150℃水解1 h,以异硫氰酸苯酯(PITC)为衍生化试剂衍生后进行HPLC分析。采用Phenomenex Luna C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,柱温为43℃;流动相A为0.1mol.L-1醋酸钠缓冲液(以醋酸调pH 6.5)-乙腈(93∶7),流动相B为乙腈-水(4∶1),梯度洗脱,流速为1.0 mL.min-1;检测波长为254 nm。结果:16种氨基酸浓度在1.16～47.32μg.mL-1范围内呈良好的线性关系(r=0.9998～1.000);平均回收率在93.3%～107.2%之间;RSD均小于3.0%。结论:本方法灵敏、准确,具有良好的重复性和稳定性,可用于雷丸中氨基酸的检测。     

正交设计法优化培养基中美拉德反应条件以提高猪苓菌核产量的研究

 目的 用正交设计法优化培养基中美拉德反应的条件,以提高猪苓菌核产量。方法 以果糖和精氨酸作为美拉德反应的原料,经过调节pH后在一定温度下独立灭菌一定时间,之后与含蛋白胨和无机盐的培养基混合均匀并用于诱导猪苓菌核。以菌核干重为指标,对灭菌前pH值,果糖与精氨酸浓度比,灭菌时间（min）,灭菌温度（℃）4个因素进行了L₉（34）正交实验。结果 极差分析结合方差分析表明,灭菌前pH值对菌核产量具有显著影响。优化后反应条件为：灭菌前pH为10;浓度比为200∶1;灭菌时间为80 min;灭菌温度为121 ℃。菌核产率提高了75%,菌核干重提高到每皿（0.225±0.16） g。结论 相比优化前菌核产率为30%~50%,菌核干重为每皿0.1~0.15 g,新的反应条件显著提高了菌核产量。     

茯苓及其化学拆分组分学习记忆及镇静催眠的性味药理学研究

目的 评价茯苓及其拆分组分的活性,并结合中医传统理论对其进行性味归属。方法 采用东莨菪碱造成小鼠记忆障碍并应用Morris水迷宫实验,观察茯苓及其组分对学习记忆的影响,同时应用抖笼法及戊巴比妥钠协同催眠实验来观察茯苓及其组分的镇静催眠作用。结果 茯苓水煎液（生药8.56 g/kg）、醋酸乙酯组分、石油醚组分、粗多糖组分及精制多糖组分均能明显缩短小鼠到达平台的潜伏期,并且降低东莨菪碱所致记忆障碍小鼠大脑乙酰胆碱酯酶（AchE）活性,醇洗物与水洗物对潜伏期的影响不明显,各个组分对于小鼠的脑指数均有不同程度的增加;生药42.8 g/kg茯苓水煎液可显著延长阈上剂量戊巴比妥钠引起小鼠睡眠时间,而对小鼠睡眠潜伏期没有影响;茯苓粗多糖能显著缩短小鼠的睡眠潜伏期,并且与精制多糖组分均能显著延长小鼠睡眠时间,醋酸乙酯组分作用次之。结论 茯苓改善学习记忆和镇静催眠作用都与其味甘入脾能健脾宁心相关,其醋酸乙酯、石油醚及多糖拆分组分可能为其甘味的物质基础。     

茯苓酸在人源肠Caco-2细胞单层模型的吸收和转运

目的：研究中药茯苓中茯苓酸（pachymic acid，PA）在人肠的吸收和转运。 方法：人源肠Caco－2细胞单层作为药物的肠吸收转运模型，测定PA从绒毛面（AP）到基底面（BL）的渗透性；反相高效液相色谱法测定PA在AP和BL的浓度，紫外检测波长为210nm；计算转运参数和表观渗透系数（Papp），并与在Caco-2细胞单层模型呈良好吸收转运的阳性对照药普萘洛尔和不良吸收转运的阳性对照药阿替洛尔进行比较。 结果：PA由AP到BL方向的Papp值为（9．50±2．20）×10^-7cm／s，由BL到AP方向的Papp值为（11．30±5．90）×10^-7cm／s。在本项研究条件下，普萘洛尔和阿替洛尔的Papp值分别为1．45×10^-5cm／s和4．22×10^-7cm／s。 结论：PA在Caco-2细胞单层馍型的吸收转运呈浓度依赖性，与转运时间呈线性关系；由AP到BL和BL到AP两个方向的转运不良，其Papp值与阿替洛尔的接近；除被动扩散机制外，ATP部分地参与了PA的转运。     

硫酸酯化茯苓多糖对胃腺癌细胞MKN-45凋亡的影响

目的 探讨硫酸酯茯苓多糖(S-PCS3-Ⅱ)诱导胃腺癌细胞凋亡的作用。方法 体外培养低分化胃腺癌细胞株MKN-45,加入不同浓度的硫酸酯茯苓多糖作用于MKN-45细胞不同作用时间后,利用细胞形态学、流式细胞术(FCM)、DNA琼脂糖凝胶电泳、吖啶橙/溴化乙锭双染法、透射电镜等实验方法观察对细胞凋亡的影响。结果 硫酸酯茯苓多糖作用MKN45细胞后,细胞形态学观察见抑制细胞生长,浓度为0.5 g/L的硫酸酯茯苓多糖作用24 h、48 h、72 h后其凋亡率分别为(7.92±0.83)%、(20.68±1.75)%、(37.52±2.47)%,且DNA凝胶电泳出现梯状条带。荧光显微镜和电镜下可见典型的细胞凋亡形态变化。结论 硫酸酯茯苓多糖可诱导胃腺癌细胞凋亡来抑制胃腺癌细胞生长。     

氮、磷、钾肥对黄连白绢病菌核形成和萌发的影响

目的 研究氮、磷、钾肥对黄连白绢病菌核的形成和萌发的影响，为黄连栽培过程中防治病害提供新的方法。方法 配制不同浓度的氮、磷、钾肥施加到土壤中，再接种菌丝块、菌核，观察对菌核形成、萌发的影响。结果 尿素、碳酸氢氨对菌核萌发、形成均具有显著的抑制作用，而磷酸二氢钠、氯化钾、硝酸钾对菌核的形成、萌发具有不同程度的促进作用，磷酸二氢钾对菌核的萌发作用不明显，对菌核的形成具有抑制作用。结论 生产中可采取偏施氮肥，少施钾肥、磷肥的措施来控制黄连白绢病菌核的形成及萌发。     

蚕虫草不同部位营养与活性成分分析

目的:明确蚕虫草不同部位的营养与活性成分,以便开发利用。方法:对蚕虫草、子座、菌核和蚕粉进行分析研究。虫草素和腺苷测定采用高效液相色谱法,虫草多糖测定采用3,5二硝基水杨酸比色法,虫草酸测定采用高碘酸钠比色法,蛋白质测定采用考马氏亮蓝比色法,粗脂肪测定采用索氏提取法。结果:蚕虫草的多糖含量达86.49mg·g^-1;子座的腺苷含量达6.82mg·g^-1;菌核的虫草素和虫草酸含量分别达到13.28mg·g^-1和44.07mg·g^-1。结论:不同活性成分在蚕虫草及其不同部位的含量不同,其中蚕虫草活性成分总量最高,菌核虫草素和虫草酸含量最高;研究还表明蛹虫草菌对蚕体脂肪和蛋白质的分解利用能力很强。