含功能性油的水飞蓟宾超饱和自纳米乳的制备与体外评价

目的制备含功能性油的水飞蓟宾超饱和自纳米乳(SLB-S-SNEDDS),并对其进行表征及体外评价研究,以提高难溶性药物水飞蓟宾的生物利用度。方法铁氢化钾还原力与1,1-二苯基-2-苦肼基(DPPH)自由基清除实验筛选功能性油脂;伪三元相图考察乳化剂乳化能力;测定粒径、多分散指数(PDI)、Zeta电位等考察混合油相比例与载药量;相容性与溶出度实验筛选促过饱和物质并考察其质量浓度;从外观、粒径分布、自乳化效率、形态学等方面表征SLB-S-SNEDDS,并进行溶出度、抗氧化能力、细胞毒性等体外评价。结果所得SLB-S-SNEDDS处方为(1)小麦胚芽油/Capryol 90-Cremophor ELP-Transcutol HP与(2)沙棘籽油/Capryol 90-Cremophor ELP-Transcutol HP,1 g基质(包含0.043 g小麦胚芽油或沙棘籽油、0.387 g Capryol 90、0.380 g Cremophor ELP、0.190 g Transcutol HP),水飞蓟宾的添加量为各组分平衡溶解度之和的20%,Soluplus的添加量为上述总质量的0.1%。小麦胚芽油、沙棘籽油体系分别为淡黄色、亮黄色透明状均一液体,2种体系自乳化分散后均呈近球形白色扁平乳滴,粒径约为50 nm,乳化时间均为65 s。与药物原料及SLB-SNEDDS相比,SLB-S-SNEDDS中水飞蓟宾的累积溶出率8h内均维持在85%～110%,表明该体系能够显著提高药物的溶出度。SLB-S-SNEDDS与铁氰化钾反应后的吸光度(A值0.452～0.782,0.488～0.765)以及DPPH自由基清除率(39.09%～96.02%,30.54%～89.20%)均高于相应质量浓度下水飞蓟宾原料的A值与清除率(0.411～0.760,22.89%～63.21%),表明2种处方体系均能提高水飞蓟宾的抗氧化能力。细胞毒性实验结果显示,在5、10μmol/L药物浓度下,水飞蓟宾原料组、水飞蓟宾S-SNEDDS组及其相应的空白S-SNEDDS组细胞生存率均90%,说明SLB-S-SNEDDS及其所用辅料对人克隆结肠腺癌细胞(Caco-2)毒性较小、安全性较好。结论制备的含功能性油SLB-S-SNEDDS在提高水飞蓟宾累积溶出率的同时,增强了其抗氧化能力,为将超饱和自纳米乳(S-SNEDDS)用于改善难溶性药物水溶性及其生物活性提供有益参考。     

利用电子顺磁波谱技术研究红参对羟自由基的清除作用

目的 探索电子顺磁波谱（electron paramagnetic resonance，EPR）技术检测红参清除自由基活性的适合产生体系，并研究红参对羟自由基（?OH）的清除作用及其物质基础。方法 采用电子顺磁共振波谱仪检测不同浓度的红参提取液对?OH的体外清除作用，并用液质联用技术（LC-MS）分析红参中的主要皂苷成分，然后研究这些人参皂苷成分对?OH的清除作用。结果 确定了羟自由基的生成体系为：Fe²⁺ 0.1 mmol?L^-1、H₂O₂ 500 mmol?L^-1、DMPO 225 mmol?L^-1；不同浓度的红参提取液对?OH具有明显的清除作用，且其清除?OH的效力与浓度成正相关；LC-MS分析显示该红参提取液中主要含有Rh1、Rf、Rb3、F1、F2、Rg3、Rg5等成分，其中人参皂苷Rg5的清除自由基活性最强。结论 本研究建立了用EPR技术研究红参清除自由基活性的适合产生体系，红参具有明显的清除?OH的能力，且人参皂苷Rg5是其清除自由基的活性成分之一，确定了红参抗自由基的主要物质基础，为红参及人参皂苷Rg5的开发、应用提供了科学依据和理论基础。     

白及多糖超声提取工艺及其抗氧化活性研究

目的：优化白及多糖的超声提取工艺，比较不同产地白及多糖含量差异，考察白及多糖稳定性和抗氧化活性。方法：以多糖得率为考察指标，料液比、超声温度、超声时间为考察因素设计L9（34）正交试验优化白及多糖超声波提取工艺；以苯酚-硫酸法测定白及多糖含量，考察陕西汉中、云南普洱、湖南洪江及四川绵阳白及多糖含量产地差异；以化学方法考察白及多糖稳定性，并比较白及多糖对1,1-二苯基-2-苦肼基自由基（DPPH·）和羟基自由基（·OH）的清除率以评价其体外抗氧化活性。结果：最佳超声提取工艺条件为：料液比1:25（g/mL）、超声温度80 ℃、超声时间10 min；四川绵阳白及多糖含量最高，达到60.81%，湖南洪江次之，云南普洱最低；白及多糖在柠檬酸及中性溶液中的稳定性较好，在苯甲酸钠、过酸性或过碱性溶液中的稳定性较差；白及多糖能有效地清除DPPH和羟基自由基，具有潜在的体外抗氧化活性。结论：白及多糖超声波提取工艺的优化及其抗氧化活性研究，可为白及多糖提取及综合利用提供借鉴。     

胃炎方对脾胃湿热型慢性萎缩性胃炎的疗效及对患者IFN-β、自由基的影响

目的:观察胃炎方对脾胃湿热型慢性萎缩性胃炎患者的疗效及干扰素-β(IFN-β)、自由基的变化。方法:选取我院(2013年1月～2018年11月)收治的脾胃湿热型慢性萎缩性胃炎患者114例,根据治疗方法不同分为2组。对照组给予常规西药对症治疗,观察组在对照组基础上给予胃炎方治疗,分析2组患者治疗后的临床疗效。结果:2组治疗前中医症状积分组间比较,差异不具有统计学意义(P0.05)。观察组治疗后胃痞胀痛(1.01±0.22)分、口苦口臭(0.91±0.27)分、恶心或呕吐(0.82±0.21)分、胃脘灼热(0.93±0.22)分、大便黏滞或稀溏(0.63±0.23)分低于对照组(P0.05)。2组治疗前IFN-β、白细胞介素-23(IL-23)、胃泌素-17(G-17)、自由基水平组间比较,差异不具有统计学意义(P0.05)。观察组治疗后G-17、超氧化物歧化酶(SOD)水平高于对照组,IFN-β、IL-23、丙二醛(MDA)水平低于对照组(P0.05)。观察组总有效率为91.23%,对照组为73.68%,观察组患者总有效率高于对照组(P0.05)。结论:胃炎方治疗脾胃湿热型慢性萎缩性胃炎可改善氧化应激状态,减轻炎症状态,促进G-17的分泌,提高疗效。     

可视化血红素加氧酶-1小鼠模型用于药物肝毒性评价

目的 建立实时动态监测药物肝毒性小鼠模型,用于药物肝毒性临床前评价.方法 通过水动力高压转染法将表达萤火虫荧光素酶的血红素加氧酶-1(HO-1)报告基因质粒转染到小鼠肝细胞中,建立HO-1-Luc小鼠模型.使用HO-1-Luc小鼠模型动态监测对乙酰氨基酚(APAP)导致的肝损伤以及抗氧化剂谷胱甘肽对药物性肝损伤的治疗效果.结果 使用HO-1-Luc小鼠模型通过活体荧光成像的手段能监测到APAP引起的肝毒性,与通过活性氧相关标志物、转氨酶以及组织病理学等经典肝毒性检测手段得到的结果吻合.同时该小鼠模型能够监测到谷胱甘肽对APAP诱导的肝毒性保护作用.结论 建立的HO-1-Luc小鼠模型在药物临床前肝毒性评价中具有潜在应用价值.     

基于响应面法优选美洲大蠊口腔原位温敏凝胶的制备研究

目的制备美洲大蠊Periplaneta americana口腔原位温敏凝胶。方法采用自由基聚合法首次以N-异丙基丙烯酰胺(NNIPAM)和甲基丙烯酸羟丙酯(HPMA)合成聚(N-异丙基丙烯酰胺-甲基丙烯酸羟丙酯)[P(NNIPAM-HPMA)]作为温敏材料;通过冷溶法制备美洲大蠊口腔原位温敏凝胶,采用Box-Behnken设计响应面法,以溶蚀时间、胶凝时间为评价指标,在固定美洲大蠊提取物用量基础上,对羟丙基甲基纤维素(HPMC)、聚乙烯吡咯烷酮(PVP K30)、P(NNIPAM-HPMA)的用量进行优选。结果通过原位聚合法合成了P(NNIPAM-HPMA)温敏材料;并用响应面法优选了可用于口腔的美洲大蠊原位温敏凝胶的处方,优选的处方为美洲大蠊提取物10%、HPMC 3.0%、PVP K30 9.5%、P(NNIPAM-HPMA) 10.0%,其溶蚀时间为2 h,胶凝时间8～9 s。结论优选得到美洲大蠊口腔原位温敏凝胶,为美洲大蠊提取物的口腔原位局部的临床应用奠定了科学依据。     

基于神经网络模型评价淫羊藿女贞子配伍对衰老大鼠自由基损伤的作用

目的：研究大鼠血清氧化调节因子的增龄性改变及平补阴阳中药淫羊藿女贞子的影响作用。方法：8个月龄雄性SD大鼠，随机分为7组，饲养至相应月龄，包括9个月龄组、12个月龄组、15个月龄组、17个月龄组，淫羊藿组、女贞子组、淫羊藿女贞子组（配伍组），以3、6个月龄雄性大鼠为青年对照组。各用药组饲养至15个月龄后开始灌胃给予相应药物2个月。取血清检测以下指标：总抗氧化能力（TT-AOC）、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）、还原型谷胱甘肽（GSH）、一氧化氮（NO）、总一氧化氮合成酶（tNOS）、诱导型一氧化氮合成酶（iNOS）、结构型一氧化氮合酶(cNOS)及8-羟基脱氧鸟苷（8-OHDG）。结果：与青年大鼠比较，17个月龄大鼠血清SOD、GSH、GSH-PX及T-AOC水平显著降低（均P<0.01），NO、tNOS、iNOS、MDA及8-OHDG含量显著升高（P<0.05或0.01），cNOS差异无统计学意义。与17个月龄大鼠比较，配伍组SOD、GSH、GSH-PX及T-AOC水平显著升高（均P<0.01），NO、tNOS、iNOS、cNOS、MDA及8-OHDG含量均显著降低（P<0.05或0.01）。基于多层感知（Multi-Layer Perceptron，MLP）神经网络模型，结果显示淫羊藿女贞子合用可使17个月龄自然衰老大鼠的上述指标的改变逆转至(10.45±0.87)个月，作用优于淫羊藿、女贞子单用。结论：淫羊藿女贞子配伍延缓衰老的作用与其改善衰老大鼠血清自由基损伤有关。     

保元抗癌口服溶液清除超氧自由基与DPPH作用

目的考察保元抗癌口服溶液对超氧自由基（O－2）和1,1 二苯基 2 苦肼自由基（DPPH）的清除作用。方法采用电子自旋共振（ESR）技术,以DPPH和 O－2为检测项目,测定保元抗癌口服溶液对自由基的清除效果。结果保元抗癌口服溶液稀释50倍时清除O－2和DPPH自由基分别为81.32%和98.47%。结论保元抗癌口服溶液对O－2和DPPH自由基均有较好清除作用,并呈一定的量效关系。     

β—胡萝卜素与口腔肿瘤

流行病学调查发现β-胡萝卜素能降低一些人类肿瘤的发生率。本文从动物实验、细胞组织培养及初步的临床试验研究,证实β-胡萝卜素对口腔癌具有潜在的化学预防作用。同时对β-胡萝卜素作为维生素A前体及抗氧化剂,其抗癌机制在自由基理论、细胞生物学和免疫学领域的研究近况作了详细的综述。