构建细小核糖核酸病毒活疫苗的策略

利用感染性cDNA克隆,已构建了若干1型脊髓灰质炎病毒Mahoney有毒株与sabin1减毒株之间的重组病毒。这些重组病毒的猴体神经毒力试验表明,病毒颗粒的表面结构与神经毒力表型有些相关,神经毒力强的决定簇位于5′端非编码序列。这些结果产生了两种构建活的小核糖核酸病毒减毒株的可能的策略。一种是利用Sabin 1株作为携带外来抗原的载体:另一种是在5′端非编码序列引入突变来构建减毒的细小核糖核酸病毒。Sabin 1株的抗原性成功地改变为脊髓灰质炎病毒其他血清型的抗原性,而疫苗质量不降低。还证明,在Sabin 1株和Mahoney株基因组的5’端非编码序列引入缺失突变可构建具有弱神经毒力表型的病毒。     

水痘-带状疱疹病毒株减毒的基因特征及疫苗的免疫效果

水痘-带状疱疹病毒（VZV）的全基因序列分析表明,其DNA全长为124 884 bp,基因组由71个开放读码框（ORF）组成,结构式为UL-IR-US-TR,编码69种蛋白.强毒株与减毒的疫苗株的同源性虽达99.8%,但主要差异存在于R1～R5的5个可变区中,根据其长度不同可区分不同的病毒株,ORF62是VZV的最易变区,并与病毒的减毒有关.Oka疫苗经广泛应用,证实其不良反应轻微而免疫原性良好,抗体阳转率〉90%,疫苗效力（VE）为71%～100%,免疫持久性可达20年.     

microRNA介导的基因工程病毒减毒株研究进展

为了安全有效地进行基因治疗,需要把转染的基因限制在特定组织中表达。应用miRNA调节病毒基因表达是一个新方法。在miRNA介导的转基因表达系统中,可以将与miRNA互补的靶序列串联插入病毒基因3’非编码区域,导致在miRNA高表达细胞中抑制病毒的表达。我们总结了miRNA介导的病毒减毒株的应用。     

甲型肝炎疫苗H2减毒株的流行病学效果考核

目的 考核病毒性甲型肝炎（简称甲肝）减毒活疫苗（H2减毒株）的流行病学效果。方法 以正定县的3个乡和石家庄郊区全部10个乡为研究现场,以其适龄儿童约3.7万人为观察对象,进行随机、对照试验。观察对象按其出生的单、双月份随机分为疫苗组和空白对照组,疫苗组接种1ml 10^6.5/ml半数细胞培养感染量（TCID50）的甲肝疫苗,空白对照组不做任何处理。接种后严格随访观察对象中甲肝病例的发生情况。结果 在3.5年的随访中,易感的对照组出现甲型肝炎20例,发病率为136.4/10万;疫苗组出现1例,发病率8.1/10万。2组发病率差异有显性。疫苗的保护率为94.1%,95%可信限：67.1%～100%。结论 每毫升10^6.5TCID50的甲肝减毒活疫苗保护效果良好,可以满足人群免疫的需要。     

1株狂犬病毒减毒株的毒力和分子特性研究

目的 对实验室研发的1株狂犬病减毒株CTN181-3的致病性和基因型特性进行研究。方法 用小鼠脑内、口腔接种法和金黄地鼠口腔接种法测定病毒毒力。将病毒通过乳鼠脑内、豚鼠颌下腺和细胞连续传多代,测定传代后病毒的遗传稳定性。对CTN181-3进行全基因组测序,并与其亲本株进行对比分析。结果 CTN181-3对实验动物毒力高度减弱,对3周龄小鼠无论脑内或口腔接种均无致病性,对2周龄小鼠也表现出脑内低毒力;口腔接种8周龄金黄地鼠亦无发病死亡。遗传稳定性方面,经1~3 d龄乳鼠脑内连续传5代或豚鼠颌下腺传4代,传代增殖后的病毒滴度虽高达7.10 lg PFU/mL或7.63 lg PFU/mL,对小鼠脑内接种仍保留无致病力的弱毒特性;在BSR细胞和Vero细胞上分别传10代,表型特性稳定。全基因组测序结果分析显示CTN181-3株与国内近年来分离株的同源性高于其他疫苗株与国内分离株的同源性。CTN181-3株与其原始的亲本株CTN-1比较,发生8个氨基酸位点的突变,其中G276 L→V和L1496 M→W氨基酸的突变在CTN181株未发生,为CTN181-3株所特有。因此,这2个位点的氨基酸突变应该是CTN181-3株比CTN181株毒力更弱、遗传稳定性更高的分子基础。结论 CTN181-3株的神经毒力高度减弱,毒力稳定,是一种很有应用前景的动物用狂犬病候选疫苗株。     

甲型肝炎减毒活疫苗H2减毒株P2区基因序列测定与特征分析

目的 测定甲型肝炎(甲肝)减毒活疫苗H2减毒株P2区基因序列,了解其减毒和细胞适应的分子机制.方法 通过逆转录-聚合酶链反应,特异扩增甲肝减毒活疫苗H2株成品疫苗及其亲本毒种P2区VP1/2A、2B、2C基因序列,经测序、比对,分析检测毒力基因VP1/2A、2C的变异情况.结果 甲肝减毒活疫苗H2成品疫苗及其亲本毒种毒力基因VP1/2A、2C区毒力相关基因簇均为减毒型特征.结论 甲肝减毒活疫苗H2减毒株毒力基因VP1/2A、2C均为减毒型特征,且遗传稳定性良好.     

水痘-带状疱疹病毒株减毒的基因特征及疫苗的免疫效果

水痘-带状疱疹病毒(VZV)的全基因序列分析表明,其DNA全长为124 884 bp,基因组由71个开放读码框(ORF)组成,结构式为UL-IR-US-TR,编码69种蛋白.强毒株与减毒的疫苗株的同源性虽达99.8%,但主要差异存在于R1～R5的5个可变区中,根据其长度不同可区分不同的病毒株,ORF62是VZV的最易变区,并与病毒的减毒有关.Oka疫苗经广泛应用,证实其不良反应轻微而免疫原性良好,抗体阳转率>90%,疫苗效力(VE)为71%～100%,免疫持久性可达20年.