单剂量匹罗卡品诱导小鼠癫痫及其海马神经损伤的研究

目的 探索不同剂量匹罗卡品单次腹腔注射对诱发小鼠癫痫及对海马损伤的影响，为癫痫建模提供参考。方法将100只健康的C57BL/6小鼠随机分为正常对照组、3个不同剂量匹罗卡品(250 mg/kg、290 mg/kg、350 mg/kg)腹腔注射组。比较3组的建模成功率、死亡率，通过免疫组化染色观察神经元和胶质细胞的数量变化，分析海马区组织的病变情况。结果 匹罗卡品250 mg/kg组小鼠的Racine评分4级以上发作率为12%，无死亡; 290 mg/kg组小鼠的4级以上发作率为70%，死亡率为32%; 350 mg/kg组小鼠的4级以上发作率为86%，死亡率为56%。免疫组化染色结果显示:与正常对照组相比，3个不同剂量匹罗卡品组小鼠诱发癫痫后，神经元数量均显著减少，小胶质细胞和星形胶质细胞数量均显著增加;但250 mg/kg组小鼠的活化小胶质细胞数量无显著变化，而其他两组显著增多。结论 匹罗卡品290 mg/kg单次注射诱发小鼠癫痫模型的成功率较高、死亡率较低，且海马区损伤明显，可以作为癫痫小鼠建模的参考方法。     

醒脑静与纳络酮合用治疗肺性脑病120例临床研究

目的　探讨醒脑静与纳络酮合用治疗肺性脑病的疗效及安全性。方法　 12 0例肺性脑病患者 ,随机分为对照组 , 和治疗组。对照组 34例 ,常规治疗给予氧疗、抗感染、解痉平喘、排痰、应用呼吸兴奋剂。对照组 4 0例 ,常规治疗基础加用纳络酮。治疗组 4 6例 ,在对照组治疗的基础上加用醒脑静与纳络酮观察。治疗前后分别记录病人的神志和血气分析结果。结果　对照组 显效 6例 ,有效 18例 ,无效 10例 ,总有效率 70 .5 9%。对照组 显效 8例 ,有效 2 2例 ,无效 10例 ,总有效率 75 %。治疗组显效 12例 ,有效 32例 ,无效 2例 ,总有效率 95 .6 5 %。治疗组与对照组对比差异有显著意义 (P <0 .0 5 )。结论　醒脑静与纳络酮联合应用 ,能缩短病人的清醒时间 ,降低 Pa(CO2 ) ,提高 Pa(O2 )和 p H值 ,无明显副作用     

间充质干细胞外泌体对海马神经元氧化应激的调控作用

目的 探讨间充质干细胞外泌体(Mesenchymal stem cell derived-exosomes,MSC-Exo)对海马神经元氧化应激的作用。方法 首先体外培养原代小鼠海马神经元,用H₂O₂刺激建立氧化应激模型,细胞计数试剂盒(Cell counting kit-8,CCK8)筛选最佳H₂O₂水平并检测不同水平MSC-Exo对细胞活力的作用,试剂盒检测超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)的活性,酶联免疫吸附测定法(Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测DNA氧化损伤分子8-羟基脱氧鸟苷(8-hydroxy-2 deoxyguanosine,8-OHdG)的表达水平,然后免疫荧光和免疫印迹检测应激和损伤分子一氧化氮合成酶(Inducible nitric oxide synthase,iNOS)、高迁移率族蛋白B1(High mobility group box 1,HMGB1)的表达水平。结果 CCK8细胞活力实验显示,10 μg/mL及以上水平的MSC-Exo对海马神经元氧化损伤具有明显的保护作用; 与对照组比较,H₂O₂组SOD的活性显著下降,而在MSC-Exo+H₂O₂组有所提高,趋于正常; 与对照组比较,H₂O₂作用后iNOS,HMGB1,8-OHdG等分子的表达水平显著上调(P<0.01),MSC-Exo作用于模型后与H₂O₂组比较,这些分子的表达水平显著下调(P<0.01)。结论 MSC-Exo作用于H₂O₂诱导的海马神经元氧化应激模型后能够增加SOD的活性,抑制海马神经元iNOS,HMGB1,8-OHdG等分子的表达,表明MSC-Exo对海马神经元氧化应激有一定的调控作用。     

渐进式膈肌锻炼对肺癌围手术期患者肺康复效果的影响

目的 探索渐进式膈肌锻炼在肺癌围手术期患者肺功能康复过程中的应用效果。方法 将64例行单孔胸腔镜肺叶切除术的肺癌患者按随机数字表法分为观察组和对照组,32名/组。对照组遵循胸外科常规流程化护理,观察组在对照组基础上进行渐进式膈肌锻炼。术前收集患者一般资料(患者填写部分),术前、术后第1天和术后第7天测量肺功能,对比术后并发症、胸腔闭式引流管留置时间及住院时间。结果 观察组术后第7天第1秒用力呼气容积(Forced Expiratory Volume in one second, FEV1)(F=14.610,P<0.001)、用力肺活量(Forced Vital Capacity, FVC)(F=10.411,P<0.05)、每分钟最大通气量(Maximal Voluntary Ventilation, MVV)(F=8.506,P<0.05)改善明显优于对照组;观察组胸腔闭式引流管留置时间[6.00(5.00,7.00)d]较对照组[6.50(5.00,9.00)d]短,差异具有统计学意义(P<0.05);观察组住院时间[12.00(11.00,14.75)d...     

HBV ccc DNA的检测方法及研究进展

共价闭合环状 DNA（covalently closed circular DNA,ccc DNA）作为乙型肝炎病毒（hepatitis B virus, HBV）的转录模板,是一种独特的复制中间体,长期聚集于宿主细胞核内,在HBV生命周期及持续感染中起着关键作用。由于目前常用的抗病毒药物均不能清除ccc DNA,其监测对于评价抗病毒治疗疗效、判断停药时间、预测治疗后再发等方面具有着重要作用。随着分子生物学技术的发展,HBV ccc DNA的检测方法得到不断的建立和完善,其临床应用价值也逐渐得到探究。本文就近年来研究报道的ccc DNA检测方法及临床意义等作一综述。     

15例卵巢癌B超诊断结果分析

目的:探讨B型超声对卵巢癌的诊断价值。方法:对经手术、病理证实的15例卵巢癌进行回顾性分析其超声图像特征。结果:混合性图像8例,占53.33%,实质性5例,占33.33%,囊性2例,占13.33%。结论:B型超声可初步做出超声分类诊断,筛选卵巢肿瘤的良、恶性。     

自建NK细胞表面受体KIR2DS1基因mRNA表达的方法及验证

摘要:目的：建立检测NK细胞表面免疫球蛋白样受体基因 KIR2DS1 mRNA表达水平的荧光定量PCR方法并评价其性能。 方法：以行异基因造血干细胞移植的供患者共57对为研究对象，针对 KIR2DS1 基因设计特异性引物及探针，构建TaqMan-MGB荧光定量PCR反应体系，并评价该实验方法的性能，包括：总符合率、重复性、灵敏度及仪器适用范围、技术人员再现性。 结果：以KIR-SSO基因定性分型法为金标准，通过检测其中35例样品，荧光定量PCR方法对 KIR2DS1 基因阳性及阴性检测率均为100%。在重复性试验中，选取Ct值分别为高、中、低值3个样品的批内、批间CV分别为0.09%～0.46%、0.71%～1.13%。该方法的灵敏度达10² copies/μL，且对拷贝数为10² copies/μL的3个样品进行5次重复试验的CV分别为5.37%、2.71%、5.51%。仪器比对结果显示，参比仪器ABI-7500与实验仪器LC-480之间的拟合直线回归方程为Y=0.973 6X+0.118 3（R²=0.961 9，R²＞0.95）。2名技术人员对10个 KIR2DS1 基因阳性样品的再现性比对试验结果显示其偏倚（%）均＜±5%。 结论：建立了TaqMan-MGB荧光定量PCR检测 KIR2DS1 mRNA表达水平的检测方法，其性能良好。     

陕西省农村义务教育阶段留守儿童早餐现状及影响因素分析

目的 了解陕西农村义务教育阶段留守儿童早餐现状,并分析相关影响因素,为修订营养改善相关国家政策、促进农村儿童身体健康提供参考。方法 采用分层整群随机抽样的方法,选取2019年陕西省7个重点监测县/区,按照学校食堂供餐、企业(单位)供餐和家庭(个人)托餐3种供餐模式,在每种供餐模式学校中各随机选择2所小学、2所初中,调查对象为小学3年级至初中3年级学生,每个年级各选取1~2个班,保证每班人数约40名,男女基本均衡,实施现场问卷调查饮食行为。结果 55.8%的调查学生每天吃早餐,从不吃早餐的学生比例为6.42%。多因素分析显示住校、女生、小学4~6年级、陕北、父母双方都在外打工的留守儿童每天吃早餐的比例较高(P＜0.05)。每天从不吃早餐的留守儿童比例(4.97%)低于非留守儿童(8.58%)(χ²=26.16,P＜0.001)。早餐食物种类以主食(66.5%)、新鲜蔬菜(35.2%)、蛋类(34.9%)、奶类(29.1%)以及豆类(23.1%)占前5位;留守儿童早餐吃水果、豆类、肉类、和蛋类的比例分别为9.9%、21.6%、15.0%和33.7%,均低于非留守儿童(13.0%、25.3%、18.1%和36.9%)(P＜0.05)。结论 陕西农村义务教育阶段留守儿童的总体早餐频次以及食物结构合理性均低于非留守儿童,且住宿类型、性别、学段、地区以及父母外出打工类型均可影响留守儿童早餐行为。     

丙酮酸钠在深低温停循环顺行选择性脑灌注中的脑保护作用

目的探索在深低温停循环(DHCA)期间,顺行选择性脑灌注(ASCP)含丙酮酸钠(Pyr)的血液能否有效缓解氧化应激从而发挥脑保护作用。方法随机选取45只新西兰兔,18只作为供血兔,27只用于建立模型并随机分为:假手术(Sham)组(n=9)、ASCP组(n=9)和Pyr组(n=9)。Sham组麻醉后开胸,建立体外循环但不转机;Pyr组在DHCA中ASCP含Pyr溶液(154 mmol/L)与血液的混合液;ASCP组则为氯化钠溶液(154 mmol/L)与血液混合液。在麻醉后(T1)、降温至28℃(T2)、开放升主动脉后10 min(T3)、停机后10 min(T4)及停机后120 min(T5)五个时点采集血流动力学指标、检测动脉血气和采集颈静脉球部血液。停机后安乐死动物并进行脑组织取材。检测样本中丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性及S100B蛋白含量。结果 ASCP组MDA含量高于Sham组和Pyr组(P0.05)。ASCP组SOD活性低于Sham组和Pyr组(P0.05),与Pyr组在T3、T4和T5三个时点血浆S100B蛋白较组内T1时点高(P0.05),ASCP组T3、T4和T5时点血浆S100B蛋白浓度显著高于同时点的Sham组和Pyr组(P0.05)。结论 DHCA期间ASCP含外源性Pyr的血液可通过缓解氧化应激发挥较为完善的脑保护作用。