健康人外周血树突状细胞的体外诱导及其功能分析

 目的　分析以健康人AB血清与rhCD40L体外诱导健康人外周血树突状细胞（DC）的功能。方法　对健康人外周血单个核细胞进行体外培养,在以健康人AB血清为基础的培养体系中加入粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）、 重组人白细胞介素（rhIL）-4、rhCD40L等细胞因子,诱导单个核细胞分化形成DC,采用倒置显微镜及瑞特-吉姆萨染色观察,流式细胞术行DC表型鉴定,四甲基偶氮唑蓝比色（MTT）法进行混合淋巴细胞反应（MLR）,检测其抗原刺激能力,酶联免疫吸附（ELISA） 法检测DC 培养上清IL-12的分泌。结果　培养7 d后的细胞具有典型的DC 形态,并上调表达DC 特征性表面分子CD83及共刺激分子CD40、CD80、CD86,第0、1 、3、5、7天,5个时间点间CD83、CD40、CD80、CD86、CD14表达差异有统计学意义（F值分别为50.253、243.769、248.181、191.267、226.339,均P＜0.05）。培养后的DC 可较强地刺激同种自体淋巴细胞增殖,GM-CSF加rhIL-4、rhCD40L组较GM-CSF加rhIL-4 组刺激反应能力强。培养的DC 自培养第5天始即有IL-12 分泌,未加CD40L组IL-12 p40分泌量为（42.92±1.54）pg／ml,加CD40L组为（136.18±5.27） pg／ml;培养第7天,IL-12 p40分泌明显增多,两组分别为（60.09±2.27） pg／ml及（322.30±30.60） pg／ml,差异有统计学意义（t＝-44.941、-22.611,均P＜0.05）。结论　健康人外周血单个核细胞可在以健康人AB血清与rhCD40L为主的培养体系中诱导成DC。     

微RNA对于hut-78细胞转移侵袭的作用机制研究

外周T细胞淋巴瘤是一种异质性较高的恶性肿瘤,主要表现为侵袭性强,预后差,目前尚未有标准的治疗策略[1,2].而在外周T细胞淋巴瘤的研究中尚未阐明其确切的发病机制.微RNA(miRNA)作为近年来发现的一类新型非蛋白编码小分子RNA,参与T细胞和B细胞等免疫细胞的成熟活化过程,甚至在淋巴瘤的形成中也有重要的作用[3,4]...     

多发性骨髓瘤患者校正血钙的临床分析

目的 分析我院多发性骨髓瘤患者校正前后血钙的差异,及校正后血钙与疾病的相关性。方法 回顾性分析我院2011年1月~2017年5月确诊的58例初发多发性骨髓瘤患者实验室检查、影像学检查等临床资料,对其血清白蛋白、血钙水平、血红蛋白、血肌酐、β2-微球蛋白、血清LDH、溶骨性病变等多项指标进行分析。结果 经血清白蛋白公式校正后D-S分期Ⅲ期的患者高钙血症发生率比较正前升高,Ⅰ期、Ⅱ期校正前后血钙差异无统计学意义（P＞0.05）;高钙组血清LDH、溶骨性病变均高于非高钙组,差异有统计学意义（P＜0.05）,而两组血红蛋白、肌酐、β2-微球蛋白相比,差异无统计学意义（P＞0.05）;肾功能不全组血钙升高明显,校正后血钙更能准确提示患者病情严重程度。结论 多发性骨髓瘤校正后的血钙更能真实反映与之相符的疾病状态下真实的血钙水平,更能有效预测病情严重程度。     

硫氧还蛋白在急性髓系白血病中的表达及其抑制剂体外对急性髓系白血病细胞促凋亡作用的初步研究

 目的　探讨急性髓系白血病（AML）细胞中硫氧还蛋白（Trx）的表达及与AML患者临床特点及预后的相关性,观察Trx抑制剂二酰胺体外诱导白血病细胞凋亡的作用,为临床治疗AML提供一定的理论依据。方法　选择20例AML患者和健康人,抽取骨髓,分离单个核细胞。用Western blot法分析单个核细胞中Trx的表达,应用四甲基偶氮唑蓝比色（MTT）法检测不同浓度二酰胺对单个核细胞增殖的影响,应用形态学、琼脂糖凝胶电泳观察二酰胺对细胞凋亡的诱导作用。结果　AML患者Trx的表达率为75 %（15／20）,在健康人中不表达。Trx与患者的白细胞计数显著相关（χ2＝9.375,P＜0.05）。MTT法检测显示二酰胺对细胞具有细胞毒作用,且呈时间和剂量依赖性,24、48 和72 h的IC50值分别为98.26、47.53、8.34 mg／ml。形态学观察二酰胺作用于AML细胞后可见凋亡小体,琼脂糖凝胶电泳观察可见典型的DNA“梯”条带出现。结论　AML细胞Trx含量明显高于健康人,二酰胺干预后AML细胞生长受抑甚至发生凋亡,其可能成为AML治疗的新药。     

以重组人类CD40配体为主的细胞因子体外诱导急性髓系白血病完全缓解患者及健康人外周血单个核细胞来源的树突状细胞形态及表型分析

 【摘要】　目的　以健康人AB血清与以重组人类CD40配体（rhCD40L）为主的细胞因子体外诱导急性髓系白血病完全缓解（AML-CR）患者及健康人外周血的单个核细胞,并分析其形态及表型差异。方法　以健康人AB血清为基础的培养体系中加入GM-CSF、rhIL-4、rhCD40L等细胞因子,诱导单个核细胞分化形成树突状细胞（DC）。瑞特-吉姆萨染色观察形态;流式细胞术鉴定表型;MTT法检测DC对淋巴细胞抗原刺激能力;ELISA法检测DC培养上清IL-12的分泌。结果　培养7 d后的细胞具有典型的MoDC形态,并上调表达MoDC特征性表面分子CD83及共刺激分子CD40、CD80、CD86,AML-CR组与健康人组相比差异无统计学意义（均P＞0.05）,但加rhCD40L组较未加rhCD40L组间差异有统计学意义（均P＜0.05）。培养后的MoDC可较强地刺激同种自体淋巴细胞增殖,AML-CR组与健康人组间刺激淋巴细胞增殖作用的差异无统计学意义（P＞0.05）,但加rhCD40L组较未加rhCD40L组间差异均有统计学意义（均P＜0.05）。培养的MoDC自培养第5天始即有IL-12的分泌,AML-CR组与健康人组相比IL-12分泌水平差异无统计学意义（P＞0.05）,加rhCD40L组与未加rhCD40L组间差异有统计学意义（P＜0.05）。结论　以rhCD40L为主的细胞因子体外可诱导AML-CR患者及健康人外周血DC生成,两者在形态及表型上无明显差异,DC可刺激白血病特异毒性T细胞增殖,尤以由rhCD40L诱导的DC作用明显。     

硫氧还蛋白还原酶及其抑制剂在肿瘤治疗中的研究进展

硫氧还蛋白还原酶(TrxR)是巯基调节系统中重要的组成部分,其C末端的硒代半胱氨酸残基是催化位点,可与各类底物和抑制剂相结合.许多肿瘤细胞均高表达TrxR,其在肿瘤耐药方面也起着重要作用.大量天然和人工合成的TrxR抑制剂均有抗癌作用,可以诱导应激反应,导致细胞周期停滞,甚至引起凋亡,可单独、联合或辅助用于肿瘤治疗.     

2008—2010年血液科临床分离细菌分布及耐药性监测

目的了解山西医科大学第二医院血液科2008—2010年临床分离病原菌的分布特点及其对常用抗菌药物的耐药情况。方法细菌分离按常规方法进行,抗菌药物敏感试验按CLSI 2008年、2009年、2010年版进行并判断结果。结果 943株临床分离菌中,革兰阳性球菌429株,占45.5%,革兰阴性杆菌514株,占54.5%。革兰阳性菌中,凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)为血液科分离菌株的第1位。葡萄球菌属细菌中耐甲氧西林金葡菌(MRSA)和耐甲氧西林CNS(MRCNS)检出率分别为17.6%和64.5%,万古霉素对革兰阳性球菌的抗菌活性最强,未发现万古霉素中介金葡菌(VISA)和耐万古霉素金葡菌(VRSA)菌株。屎肠球菌对测试药物的耐药率普遍高于粪肠球菌,未发现对万古霉素、替考拉宁耐药株。革兰阴性菌中,肺炎克雷伯菌为血液科分离菌株的第1位(占12.8%),大肠埃希菌位居第2。亚胺培南对革兰阴性杆菌的抗菌活性最强。鲍曼不动杆菌对亚胺培南和美罗培南耐药率分别为13.2%和11.6%。铜绿假单胞菌对头孢他啶、阿米卡星、环丙沙星耐药率较低,对其他测试抗生素的耐药率均在20%以上,并呈现多重耐药。结论血液病患者易并发医院感染,应引起临床和实验室的高度重视,合理选用抗菌药物是治疗和预防细菌耐药的关键。     

K562细胞硫氧还蛋白还原酶活力测定及其抑制剂体外抗白血病的初步研究

 目的　探讨慢性粒细胞白血病（CML）细胞株K562中硫氧还蛋白还原酶（TrxR）的活力及其新型抑制剂乙烷硒啉（BBSKE）体外抗白血病作用。方法　应用胰岛素还原法检测K562细胞株及健康人骨髓单个核细胞中TrxR的活力。运用CCK-8法测定BBSKE对K562细胞的增殖抑制率。应用激光共聚焦显微镜、琼脂糖凝胶电泳以及Annexin Ⅴ-FITC／PI双标记流式细胞术观察BBSKE的抗白血病作用。结果　K562细胞中TrxR的活性明显高于健康人骨髓单个核细胞,10 μmol／L BBSKE与K562细胞作用24 h,激光共聚焦显微镜可见典型的细胞凋亡表现,琼脂糖凝胶电泳后可见典型的DNA“梯”条带出现,流式细胞术检测凋亡率为（10.28±2.74）%;10 μmol／L BBSKE对CML患者原代细胞有诱导凋亡的作用,凋亡率为（5.70±0.48）%。结论　慢性粒细胞白血病细胞株K562中TrxR活力高于健康人骨髓单个核细胞,BBSKE有抑制TrxR活力、抑制K562细胞增殖和诱导凋亡的作用,是治疗CML潜在的有效药物。