免疫细胞在急性髓系白血病骨髓微环境中的浸润模式及其预后价值

目的:探究免疫细胞在急性髓系白血病骨髓微环境中的浸润模式，以及分析其与临床特征和预后间的关系。方法:从GEO数据库中下载422例急性髓系白血病患者的基因表达谱数据和相关临床数据，采用CIBERSORT算法计算急性髓系白血病患者骨髓微环境中22种免疫细胞的构成比例，然后分别分析浸润性免疫细胞与年龄、FAB分型等临床特征间的相关性，同时采用Kaplan-Meier生存曲线分析浸润性免疫细胞和总体生存时间之间的关系。结果:急性髓系白血病骨髓微环境中单核细胞，CD8+T细胞和嗜酸性粒细胞浸润丰富，其中调节性T细胞在老年急性髓系白血病患者的浸润程度较高（P=0.021）,而M2巨噬细胞的分布水平较低（P=0.014）。另外在不同病理类型的患者间有11种免疫细胞的浸润水平有显著差异（P＜0.01）。生存分析结果显示未活化的肥大细胞和M2巨噬细胞低表达以及活化的树突状细胞和调节性T细胞高表达可以预测AML患者的不良预后。结论:免疫细胞浸润模式与急性髓系白血病的年龄和病理类型间存在显著相关性，同时可以预测急性髓系白血病患者的预后。     

槟榔碱对口腔角质形成细胞端粒酶逆转录酶表达的影响

目的：观察槟榔碱对人口腔角质形成细胞（KC）端粒酶逆转录酶（hTERT）mRNA及蛋白表达的影响，进一步探讨hTERT在口腔黏膜下纤维性变（OSF）癌变过程中的作用机制。方法：体外培养正常口腔黏膜的上皮细胞，将实验细胞分为0．03、0．06、0．09g／L槟榔碱组、空白对照组。采用Western印迹法和RT-PCR方法观察槟榔碱对KC hTERT mRNA及蛋白表达的影响。结果：槟榔碱能呈剂量依赖性增加KC hTERT mRNA及蛋白表达，0．03、0．06、0．09g／L槟榔碱组hTERT mRNA及蛋白表达均高于空白对照组（P〈0．05）。结论：槟榔碱对KChTERT mRNA与蛋白表达有明显诱导作用，且在一定范围内呈剂量依赖关系，槟榔碱诱导KChTERT过度表达可能在OSF癌变过程中起重要作用。     

槟榔碱诱导口腔角质形成细胞凋亡研究

目的:了解槟榔碱(arecoline)对体外培养的人口腔黏膜角质形成细胞(keratinocyte,KC)凋亡的影响。方法:不同浓度的槟榔碱以及在不同时间处理体外培养的KC,在荧光显微镜下观察KC凋亡形态学改变并计算凋亡百分率,用比色法检测Caspase-3活性的改变。结果:1)槟榔碱能以一定时间和浓度依赖方式诱导培养的KC发生凋亡,其细胞凋亡率较正常对照组明显增高(P<0.05)。2)槟榔碱作用KC,其Caspase-3活性较正常对照组明显增高(P<0.05)。结论:槟榔碱可诱导KC凋亡,Caspase-3可能参与了这一细胞凋亡过程的调控。KC凋亡异常可能是口腔黏膜下纤维性变的重要发病机理之一。     

头孢类抗菌药物联合阿米卡星治疗白血病感染患者的疗效

目的探讨头孢类抗菌药物联合阿米卡星在治疗白血病患者化疗后粒细胞缺乏合并感染中的疗效,以提高临床诊治水平。方法选取2013年3月-2014年3月于医院接受治疗的白血病化疗后粒细胞缺乏合并感染患者92例,随机分为观察组与对照组,各46例,其中对照组给予头孢他啶联合阿米卡星治疗,观察组给予头孢吡肟联合阿米卡星治疗,对比分析两组的临床疗效。结果头孢他啶联合阿米卡星治疗后临床有效率80.43%,头孢吡肟联合阿米卡星治疗后临床有效率82.61%,两组比较差异无统计学意义;患者发生上呼吸道及肺部感染较为常见,两组感染部位比较差异无统计学意义;患者年龄(≥60岁或<60岁)、白血病治疗后缓解指标(完全缓解/部分缓解或无效)、粒细胞缺乏持续时间(≥10d或<10d)与疾病预后存在相关性(P<0.05)。结论头孢他啶联合阿米卡星与头孢吡肟联合阿米卡星治疗白血病化疗后粒细胞缺乏合并感染的临床有效率相当,且安全可靠,值得临床推广应用。     

安神敷脐方结合神阙穴按摩治疗心肾不交之失眠90例疗效观察

目的观察安神敷脐方结合神阙穴按摩与佐匹克隆及安慰剂治疗失眠症(心肾不交型)的疗效对比。方法将90例失眠患者按随机数字表将入组病例分为3组,治疗组、对照组、安慰剂组各30例。治疗组使用安神敷脐方治疗,对照组使用佐匹克隆治疗,安慰剂组使用维生素B1治疗。疗程均为8周。于治疗前和疗程结束时采用匹兹堡睡眠质量指数量表评定临床疗效。结果经过8周治疗,治疗组与对照组患者的睡眠质量均得以改善,安慰剂组部分患者睡眠质量得到改善,治疗组及对照组均无过敏反应。结论安神敷脐方结合神阙穴按摩助眠疗效与佐匹克隆相近,安神敷脐方外敷无需服药,可长期使用,不产生药物依赖性、成瘾性,减停无戒断反应。     

呼吸导引操在稳定期慢性阻塞性肺疾病康复中的价值

慢性阻塞性肺疾病(COPD)是一种死亡率呈上升趋势的慢性疾病。尽管抗炎、联合和靶向治疗取得了重要进展,但COPD药物治疗仍是治标不治本。肺康复是COPD管理过程的核心,运动训练则是肺康复的基石。传统导引术具有防病和治病的双重功效。现有研究表明,呼吸导引操可使稳定期COPD患者临床获益。本文将对COPD治疗现状、呼吸导引操在COPD患者康复中的价值作一综述。     

神经酰胺参与II型CD20抗体诱导的细胞程序性死亡

目的：探讨II型CD20抗体诱导靶细胞程序性死亡的机制,为制备具有较强肿瘤杀伤能力的新型CD20抗体提供理论依据。方法：将淋巴瘤细胞Raji分别与 I型CD20抗体利妥昔单抗(Rituximab)和II型CD20抗体托西莫单抗(Tositumomab)孵育后,采用磷脂酰丝氨酸V(annexin V)和碘化丙啶(propidium iodide,PI)双染,流式细胞仪比较两种抗体处理后程序性死亡细胞所占比例;在CD20抗体处理前,用工作浓度的caspase抑制剂Z-VAD-FMK (carbobenzoxy-valyl-alanyl-aspartyl-[O-methyl]-fluoromethylketone)或伏马毒素(fumonisin B1,FB1)预处理Raji细胞,并采用流式细胞仪比较预处理组与未预处理组淋巴瘤细胞程序性死亡所占的比例。收集CD20抗体处理过的Raji细胞,应用高效液相色谱法检测不同的CD20抗体处理组间淋巴瘤细胞内神经酰胺(ceramide)的水平,并用相同方法检测FB1对Tositumomab引起淋巴瘤细胞内ceramide水平变化的抑制作用。用不同浓度的C2-ceramide与淋巴瘤细胞进行孵育,16h后用annexin V & PI双染检测其诱导靶细胞程序性死亡的能力。结果：10 µg/mL的I型抗体Rituximab几乎不能诱导Raji细胞的程序性死亡,而相同浓度的II型CD20抗体Tositumomab能够诱导(28.6±4.2)%的Raji细胞产生程序性死亡,两者差异有统计学意义(t=26.48,P<0.01),这种程序性死亡不能被caspase抑制剂Z-VAD-FMK所抑制(F=3.01,P>0.05)。Tositumomab处理后能够引起Raji细胞内ceramide水平的升高(t=28.48,P<0.01),且5~40 µmol/L的C2-ceramide能够通过剂量依赖性的关系诱导Raji细胞的程序性死亡(F=2.71,P>0.05)。Ceramide合成的FB1可以显著抑制Tositumomab引起的Raji细胞内ceramide水平的升高(F=20.18,P<0.01),进而显著抑制Tositumomab介导的程序性死亡(F=17.02,P<0.01)。结论：II型CD20抗体Tositumomab而非I型CD20抗体Rituximab可以通过介导靶细胞内ceramide水平的升高,诱导靶细胞的程序性死亡,这种程序性死亡与经典的caspase通路无关。     

S腺苷甲硫氨酸对肝癌细胞急性缺血/缺氧过程中的生物学作用

目的：研究S腺苷甲硫氨酸（SAMe）在急性缺血/缺氧过程中对肝癌细胞HepG2的生物学作用,并通过检测自噬的变化探讨其可能机制。方法：real time-PCR检测自噬特异性基因（Beclin 1）表达的变化;吖啶橙染色后,采用荧光显微镜定性观察自噬;CCK-8法检测HepG2细胞的成活率;用AnnexinⅤ/PI流式细胞仪检测细胞凋亡的变化。结果：SAMe可诱导HepG2细胞的自噬,在单纯缺血和缺血/缺氧处理因素下,HepG2自噬在荧光强度和Beclin 1基因水平分别比空白对照组增强约3.2倍和3.5倍。细胞成活率分别比空白对照组增加了约20%和30%。SAMe对HepG2细胞具有显著的抑制作用,这种抑制作用在缺血/缺氧环境中更加明显,SAMe单独处理组和SAMe预处理结合缺血/缺氧组,其细胞成活率与空白对照组相比分别下降了约30%和70%。随着细胞成活率下降,细胞凋亡比例相应增加,与空白对照组相比,细胞经SAMe处理后凋亡比例增加约18%;细胞经SAMe预处理后再予以缺血/缺氧,凋亡比例增加约30%。结论：在SAMe抑制HepG2细胞生长过程中,自噬起着重要作用。     

自体造血干细胞移植治疗难治性系统性红斑狼疮的疗效分析

目的 探讨自体外周血造血干细胞移植（APBSCT）治疗难治性系统性红斑狼疮（SLE）的初步疗效和安全性.方法 对5例难治性SLE进行自体外周血造血干细胞移植,预处理方案为环磷酰胺（CTX）40 mg/（kg·d）静脉点滴连用2 d（-4,-3）,抗胸腺细胞球蛋白（ATG）2.5 mg/（kg·d）静脉点滴连用5 d（-6,-5,-4,-3,-2）.同时碱化和水化尿液,保护心、肝、肾功能.结果 5例患者均获得造血重建,中性粒细胞绝对计数〉0.5×10^9/L,血小板〉20×10^9/L的中位数时间分别是9 d,10 d.所有患者在移植后40 d左右颜面部红斑等症状消失,大部分患者自身抗体转阴或抗体滴度减低,5例均出现移植后感染,3例患者出现程度不同的心血管并发症,无移植相关性死亡,随访至移植后1年,2例患者移植后2月激素完全撤退,3例泼尼松用量〈10 mg/d.结论 APBSCT是难治性SLE的有效方法之一,造血重建恢复迅速,且相对安全,但由于例数较少及观察时间有限,远期疗效有待观察.     

LTC4及其合成酶与咳嗽变异性哮喘气道重建的相关性研究

目的研究白三烯C4（LTC4）及其合成酶表达与咳嗽变异性哮喘（CVA）气道重建的相关性,探讨CVA的发病机制,为CVA的早期诊断提供理论依据。方法将40例入选患者分为支气管哮喘组、CVA组各20例,另择20例健康人作为对照组。采用ELISA技术检测静脉血中LTC4的含量;应用RT-PCR检测LTC4合成酶在多形核细胞和淋巴细胞中的表达。选择对照组6例、支气管哮喘组6例、CVA组12例分别进行纤维支气管镜检查,取右中叶支气管组织,进行常规石蜡切片,HE染色,光镜下观察并测量基底膜厚度。结果支气管哮喘组LTC4含量及基底膜厚度显著高于CVA组和对照组,CVA组高于对照组（P〈0.01或〈0.05）。各组基底膜厚度与静脉血LTC4含量之间存在相关性（P〈0.05）。LTC4合成酶在CVA组和支气管哮喘组患者中的表达明显高于对照组（P〈0.05）。LTC4合成酶在多形核细胞中表达相对较强,在淋巴细胞中表达相对较弱。结论 CVA存在气道重建,静脉血中LTC4及其合成酶的表达可以作为CVA的快速诊断的指标之一。