UPLC-MS/MS测定斯皮诺素在Caco-2细胞的转运特征北大核心CSCD

目的:建立一种测定Caco-2细胞中斯皮诺素的超高效液相色谱串联质谱(UPLC-MS/MS)检测方法,研究斯皮诺素在Caco-2细胞中的转运方式。方法:采用BEH C_(18)色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm),流动相为水—甲醇溶液,梯度洗脱,流速0.30 mL·min^(-1);质谱测定采用电喷雾离子源,负离子模式,多反应监测(MRM)定量离子对m/z 607→427,以Caco-2细胞模型研究斯皮诺素的双向转运,考察斯皮诺素浓度及P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)抑制剂对斯皮诺素转运的影响。运用UPLC-MS/MS检测药物浓度,计算其表观渗透系数。结果:UPLC-MS/MS检测斯皮诺素具有良好的线性(r^2>0.999 0)、精密度的RSD≤15%,准确度在88%~115%之间,绝对回收率均在80%以上,斯皮诺素最低检测限为2 ng·mL^(-1)。斯皮诺素在Caco-2细胞中,其转运方向主要是从绒毛面(AP)→基底面(BL),且与浓度相关。斯皮诺素质量浓度在2~40μg·mL^(-1)时,其表观渗透系数P_(app(AP→BL))随浓度的增加而增加,外排率低于0.2,显示被动转运,但在80μg·mL^(-1)时,其外排率为2.84,大于2,显示有P-gp参与外排;加入P-gp抑制剂后,其外排率显著降低。结论:在低浓度时,斯皮诺素在Caco-2细胞中的转运以被动扩散为主,但在高浓度时,受到P-gp糖蛋白的外排作用,吸收降低。     

利用TGA-DTA热分析法快速鉴别中药乳香及质量分析研究

目的：利用TGA-DTA热分析法快速鉴别中药乳香,并进行质量分析。方法：收集市场上乳香药材共计25份,通过考察升温范围、升温速率、粉末粒度三个重要因素对TGA-DTA热分析实验的影响,利用TGADTA特征图谱快速鉴别药材真伪;分别采用一阶中点法和连线法进行热重分析与热焓计算,对乳香药材进行定量分析。结果：确定了乳香TGA-DTA实验的最佳条件：升温范围选择50-750℃;升温速率选择20℃·min-1;粉末过100目筛;在该条件下,通过特征峰位（T1=447±5℃、T2=549±5℃、T3=350±5℃）、热重分析（TV-max、ΔW2+ΔW3）、热焓分析（ΔH）可以很好的区分正品乳香、伪品乳香以及乳香的掺伪品。结论：TGA-DTA技术操作简单,是一种快速、准确、简单的乳香鉴别与质量分析新方法。     

连翘苷经血脑屏障体外透过机制研究

目的:研究连翘苷经血脑屏障的体外透过机制。方法:以0(阴性对照)、10、25、50、75、100μg/ml连翘苷溶液培养大肠癌MDR1基因转染的马丁达比犬肾上皮(MDCK-MDR1)细胞24 h,刃天青法检测细胞活力并计算细胞生存率。以10、25、50、75、100μg/ml连翘苷溶液培养MDCK-MDR1细胞10 min后,检测胞内连翘苷含量并绘制质量浓度-摄取速率曲线;0(阴性对照)、50、100μg/ml连翘苷溶液培养MDCK-MDR1细胞3 h后,倒置荧光显微镜下观察细胞紧密连接蛋白结构。结果:与阴性对照比较,10~100μg/ml连翘苷溶液培养细胞24 h后细胞存活率无明显改变。在10~100μg/ml质量浓度范围内,MDCK-MDR1细胞摄取速率与连翘苷的质量浓度不呈线性关系,有逐渐饱和趋势。50、100μg/ml连翘苷溶液培养细胞3 h后,细胞紧密联接蛋白完整。结论:在透过模拟血脑屏障时,连翘苷的吸收可能为被动转运结合主动转运,其质量浓度对细胞紧密联接蛋白有影响。     

中国药典中有关中药去皮问题的现状

《中国药典》中需去皮的中药甚多,但中药是否应去皮仍存在诸多争议。首先,关于去皮问题的现代研究尚缺乏系统性。大多研究仅着手于化学成分、药效学评价中的一或两部分内容,未能从本草考证、化学成分研究、药效学评价、安全性评价和采收加工炮制等方面统筹考虑,使很多关于去皮的争议不能得到合理解决。其次,关于去皮问题的关键评价指标尚未明确,当化学成分、药效或安全性三者研究结果相矛盾时,应首先考虑哪一方面?另外,关于去皮问题没有按临床应用分类考虑。不同的临床应用(如药用部位不同)应该对应不同的加工采收方法,去皮与否与临床疗效密切相关。对此,笔者对今后研究中药去皮问题的提出以下建议:1首先,应对该药材进行本草考证,整理医史文献,明确该药材去皮问题在历代医家著作中记载情况。2应重点考虑去皮与否与临床使用安全性的关系,建立完善的安全性评价体系。本文整理的文献中除大毒中药外,其他药材毒性研究较少,仅部分药材有微量元素含量的报道。3对化学成分及药理作用结合的研究是必要的,特别是活性成分含量及药效直接关系到临床疗效。4应尽可能考虑药材采收加工炮制在实际操作中是否方便快捷。5同一药材,如果有不同的临床应用应该对应不同的加工采收方法,所以同一药材可以按临床应用选择是否去皮。