地塞米松对急性淋巴细胞白血病患儿核转录因子-κB表达的影响及意义

目的探讨儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)核转录因子-κB(NF-κB)p65蛋白的表达及意义,观察地塞米松(DEX)对其活性的影响,为临床寻求以NF-κB为靶点的治疗手段的依据。方法1.应用SP免疫组化法,检测20例ALL患儿和20例正常对照儿童NF-κB p65蛋白表达。2.用SP免疫组化法检测DEX对ALL细胞NF-κB p65蛋白活性影响。结果1.ALL患儿20例的NF-κB p65蛋白阳性表达率为85.50%(17/20),表达定位于ALL细胞胞核及胞浆中,明显高于正常对照组10.0%(2/20),两者比较有显著性差异(χ2=22.56 P<0.01)。2.临床治疗剂量的DEX 5.0 mg/L作用于ALL细胞24 h,能显著抑制NF-κB p65蛋白表达,其阳性表达率为(25.0±3.0)%,与未处理的ALL细胞比较,有显著性差异(t=55.00 P<0.01)。结论1.NF-κB p65蛋白表达于儿童ALL细胞中。2.抑制NF-κB的活性可能是DEX作用于儿童ALL细胞的机制之一,抑制NF-κB信号传导途径可能在儿童ALL治疗中有重大价值。     

Wnt通路中散乱蛋白在儿童急性淋巴细胞白血病中的表达及意义

目的 探讨Wnt信号通路中散乱蛋白（DVL）对儿童急性淋巴细胞白血病（ALL）发病及预后的意义。方法 选取33例新发ALL患儿为病例组,根据危险度将ALL患儿分为低危组（n=14）、中危组（n=5）和高危组（n=14）;29例免疫性血小板减少症（ITP）患儿为对照组。采集病例组患儿初发及诱导治疗第33天时,以及对照组骨髓血各2 mL,采用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测骨髓血细胞DVL1、DVL2、DVL3 mRNA表达。结果 病例组初发期DVL1、DVL2、DVL3 mRNA表达水平高于缓解期及对照组（P < 0.05）,与对照组比较,病例组缓解期DVL2 mRNA水平升高（P < 0.05）。DVL2 mRNA表达水平在病例组初发期及缓解期均高于DVL 1、DVL 3 mRNA （P < 0.05）。高、中危组DVL1、DVL2 mRNA表达水平高于低危组（P < 0.05）。DVL2 mRNA表达水平在低、中、高危组均高于DVL1、DVL3 mRNA （P < 0.05）。结论 Wnt通路中DVL,尤其是DVL2的表达变化可能对儿童ALL的发病及预后有一定意义。     

于敏教授治疗慢性肾衰竭经验撷菁

针对慢性肾衰竭病程长,病情复杂且严重,并发症多和死亡率高等特点,介绍于敏教授运用内服中药汤剂辨证论治与中医外治法相结合治疗本病的临证经验和用药体会。     

Wnt通路中卷曲蛋白4和分泌型卷曲相关蛋白1 在儿童急性淋巴细胞白血病中的表达

目的 研究Wnt通路中卷曲蛋白4(Fz4)和分泌型卷曲相关蛋白1(sFRP1)在急性淋巴细胞白血病(ALL)患儿的表达及作用。方法 随机选取50例初发且经诱导治疗第33天骨髓达完全缓解的ALL患儿,分别留取化学药物治疗(简称化疗)治疗前骨髓和治疗第33天完全缓解骨髓,作为初发组和缓解组,收集20例免疫性血小板减少症患儿骨髓作为对照组,依照危险度分层将初发组50例ALL患儿划分高危组(n=12)、中危组(n=11)和低危组(n=27)。Real-time PCR法检测骨髓单个核细胞中Fz4 mRNA和sFRP1 mRNA表达,Western blot法检测骨髓单个核细胞中Fz4和sFRP1蛋白表达。结果 初发组Fz4 mRNA和蛋白相对表达量明显高于缓解组和对照组(P<0.05)、sFRP1 mRNA和蛋白相对表达量明显低于缓解组和对照组(P<0.05)。初发组中Fz4与sFRP1的mRNA表达、蛋白表达均呈负相关(P<0.05)。高、中危组Fz4 mRNA和蛋白相对表达量均高于低危组(P<0.05),高、中危组sFRP1表达均低于低危组(P<0.05)。结论 Fz4表达升高和(或)sFRP1表达降低可能参与儿童ALL的发病,其表达异常程度可能与预后相关。     

后腹腔镜下肾输尿管全长切除加经尿道膀胱袖状切除治疗上尿路上皮癌

目的：探讨后腹腔镜下肾输尿管全长切除加经尿道膀胱袖状切除术治疗上尿路上皮癌的临床效果。方法：上尿路上皮癌患者68例,男23例,女45例,平均年龄63（43-78）岁。肾盂癌55例,输尿管上段肿瘤4例,输尿管下段肿瘤9例。其中输尿管下段肿瘤合并膀胱肿瘤1例。经尿道膀胱镜患侧输尿管逆行插入输尿管导管引流肾盂尿,用电切镜针状电极距输尿管口周围约0．5cm环形切透膀胱壁,分离出输尿管开口及膀胱壁内段。拔除输尿管导管,电凝输尿管开口,使开口封闭,减少肿瘤细胞种植机会。采用腰部3个穿刺套管针人路,行后腹腔镜下根治性肾切除,输尿管尽量向下游离,如果是肾盂癌或输尿管上段肿瘤,用腹腔镜分离钳可以将下段输尿管提拉出来,扩大套管切口,将肾输尿管全长完整取出,避免了下腹部开放切口;如果是下段输尿管肿瘤,则需下腹部行5-7cm切口,先取出。肾标本,再行输尿管下段切除术。结果：68例手术顺利。手术时间平均120（90-240）min,术中出血量平均60（40-500）ml,1例需输血。术后引流管留置时间平均4（3-7）d,导尿管留置时间平均8（7-15）d。拔除尿管后均行B超检查无膀胱漏尿。术后病理报告均为尿路上皮癌。65例患者获随访平均18（3-38）个月。58例患者无瘤生存,3例死于心脑血管及肺部疾病。4例术后患膀胱肿瘤而行电切治疗。结论：后腹腔镜下肾输尿管全长切除加经尿道膀胱袖状切除治疗上尿路上皮癌,手术安全易行,用电切镜环状切除输尿管开口及膀胱壁内段可完整切除输尿管,对输尿管开口进行电凝封闭可减少肿瘤细胞种植。对肾盂癌及上段输尿管肿瘤患者可避免行下腹部开放切口的输尿管下段切除术,有效减少创伤,疗效可靠,无肿瘤种植转移。     

不同浓度苦参碱对神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞存活率及凋亡率的影响

目的探讨不同浓度苦参碱对神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞存活率及凋亡率的影响。方法分别应用MTT法和FCM法检测苦参碱与顺铂对NB细胞株SH-SY5Y存活率的影响。结果 MTT法检测SH-SY5Y细胞的存活率（%）分别为：（90.75±6.94）、（88.61±10.22）、（55.31±1.83）、（77.37±2.24）、（61.21±7.92）、（44.71±9.51）。FCM法检测SH-SY5Y细胞的凋亡率（%）分别为：（6.89±1.03）、（7.63±1.38）、（16.36±2.57）、（8.42±1.76）、（14.79±2.37）、（18.46±2.44）。除经ATRA诱导的顺铂干预组外,各组存活率及凋亡率与对照组比较差异均有统计学意义（P〈0.05）;未经ATRA诱导的顺铂干预组存活率及凋亡率与经ATRA诱导的顺铂干预组比较差异有统计学意义（P〈0.05）;苦参碱0.5mg/mL组与经ATRA诱导的顺铂干预组比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。结论苦参碱可以抑制神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞系增殖、诱导凋亡,可以提高顺铂化疗的敏感性,在本实验范围内浓度越高这种抑制增殖、诱导凋亡作用越明显。     

核转录因子-κB抑制剂对儿童急性淋巴细胞白血病细胞生长调控和凋亡的影响及意义

目的探讨核转录因子-κB（NF-κB）抑制剂对儿童急性淋巴细胞白血病（ALL）细胞生长和凋亡的影响及意义。方法分组：对照组、对甲苯磺酰-L-苯丙氨酸甲基甲酮（TPCK）组、地塞米松（Dex）组、TPCK＋Dex组。MTT比色分析法测定细胞生长抑制率,流式细胞术测定细胞凋亡率。结果TPCK和Dex均可引起ALL细胞生长抑制和凋亡,其生长抑制率和凋亡率与对照组比较,差异均有统计学意义（P均〈0.01）。TPCK＋Dex组的生长抑制率和凋亡率显著高于两者单独使用时,差异有统计学意义（P〈0.05或P〈0.01）。结论NF-κB可能通过抑制细胞凋亡和促进细胞增殖参与儿童ALL的发病。抑制NF-κB信号传导途径可能在儿童ALL治疗中有重大价值。     

谷红注射液治疗缺血性脑卒中患者应激性肝损害

目的 探讨谷红注射液改善缺血性脑卒中应激性肝损害患者的临床症状及其保护作用与机制.方法 本研究是一项随机、双盲对照试验,选取2019年1月～2019年12月成都中医药大学附属医院和成都中医药大学附属四川省康复医院收治的80例脑缺血诱发肝损伤的患者随机分为对照组(乙酰谷酰胺氯化钠注射液治疗,n=40)和谷红治疗组(谷红注...     

苦参碱对人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞的作用及机制

目的 探讨苦参碱(matrine,Ma)对人神经母细胞瘤(neuroblastoma,NB) SH-SY5Y细胞的作用及机制。方法 取对数生长期的细胞,分为对照组(含细胞无Ma)及4个浓度组（Ma的作用浓度）分别为0.5 mg/ml、1.0 mg/ml、2.0 mg/ml和3.0mg/ml,每组5个复孔。应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞的增殖抑制率;流式细胞仪(FCM)检测凋亡率;RT-PCR方法检测TrkA mRNA的表达。最后采用SPSS 16.(0统计软件进行单因素方差分析,P＜0.05为差异有统计学意义。结果 MTT比色法检测对照组及各浓度组增殖抑制率分别为(7.25±1.55)％、(12.56±1.94)％、(17.22±0.90)％、(22.39±0.78)％和(25.35±1.38)％;流式细胞仪检测对照组及各浓度组凋亡率分别为(5.30±0.60)％、(10.04±1.18)％、(14.34±1.79)％、(21.36±0.96)％和(24.80±1.53)％;RT-PCR方法检测TrkA mRNA的表达,对照组及各浓度组的灰度值分别为：0.502±0.043、0.584±0.032、0.644±0.052、0.836±0.056和0.948±0.030。以上检测各组间比较差异均有统计学意义(P＜0.05)。结论 苦参碱在体外环境下作用神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞,可以有效抑制该细胞的增殖、诱导调亡并促进TrkA mRNA的表达,这为临床上神经母细胞瘤的治疗开拓了新的思路。     

Wnt通路中亮氨酸重复序列G蛋白偶联受体5/6在儿童急性淋巴细胞白血病中的表达及意义

目的 研究富含亮氨酸重复序列G蛋白偶联受体(LGR)5/6在儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)中的表达及意义。方法 选取39例经诱导化疗后第33天骨髓达完全缓解的ALL患儿,诱导化疗前作为初发组,经诱导化疗第33天骨髓达完全缓解时作为缓解组,根据危险度分层再分为低危(n=16)、中危(n=9)和高危组(n=14)。30例免疫性血小板减少症的患儿为对照组。留取初发组、缓解组及对照组骨髓血3 ml,采用实时荧光定量聚合酶链反应法检测骨髓细胞中LGR5和LGR6 mRNA的相对表达,采用Western blot法检测骨髓细胞中LGR5和LGR6蛋白的相对表达。结果 初发组LGR5 mRNA(0.850±0.279)及蛋白(0.083±0.027)的相对表达均低于缓解组(mRNA:1.418±0.324,蛋白:0.130±0.033)与对照组(mRNA:1.541±0.409,蛋白:0.138±0.041)(P_mRNA=0.000,P_蛋白=0.000),初发组LGR6 mRNA(2.444±1.160)及蛋白(0.298±0.088)的相对表达均高于缓解组(mRNA:0.886±0.390,蛋白:0.111±0.039)与对照组(mRNA:0.928±0.373,蛋白:0.094±0.037)(P_mRNA=0.000,P_蛋白=0.000)。在初发组中,低危患儿LGR5 mRNA(1.004±0.284)及蛋白(0.097±0.030)的相对表达均高于中危(mRNA:0.728±0.239,蛋白:0.071±0.022)和高危患儿(mRNA:0.752±0.222,蛋白:0.074±0.020)(P_mRNA=0.012,P_蛋白=0.016),低危患儿LGR6 mRNA(1.822±0.979)及蛋白(0.245±0.077)的相对表达均低于中危(mRNA:2.954±1.039,蛋白:0.338±0.081)和高危患儿(mRNA:2.827±1.165,蛋白:0.333±0.075)(P_mRNA=0.016,P_蛋白=0.004)。在缓解组中,低危患儿LGR5 mRNA(1.597±0.329)及蛋白(0.150±0.035)的相对表达均高于中危(mRNA:1.277±0.288,蛋白:0.117±0.029)和高危患儿(mRNA:1.305±0.253,蛋白:0.116±0.023)(P_mRNA=0.012,P_蛋白=0.006),低危患儿LGR6 mRNA(0.662±0.334)及蛋白(0.089±0.034)的相对表达均低于中危(mRNA:1.066±0.273,蛋白:0.130±0.033)和高危患儿(mRNA:1.027±0.405,蛋白:0.126±0.038)(P_mRNA=0.007,P_蛋白=0.007)。结论 LGR5和LGR6的表达与儿童ALL的发生和危险度有关,其具体作用机制有待进一步研究。