肿瘤坏死因子β诱导淋巴细胞化学发光及其增殖的研究

目的：探讨活性氧参与ｒｈＴＮＦβ诱导淋巴细胞活化作用的机理。方法：采用化学发光（ＣＬ）和顺磁共振法（ＥＳＲ）研究ｒｈＴＮＦＢ诱导人外周血淋巴细胞产生活性氧（ＯＲ）的动态变化及其增殖作用。结果：①用１０－２０００Ｕ／ｍｌ的ｒｈＴＮＦβ处理１×１０６ｍｌ－１淋巴细胞均可诱发Ｌｙ－ＣＬ,其中以１００Ｕ／ｍｌ　ｒｈＴＮＦβ处理１８～２０ｍｉｎ的ＣＬ峰值（ＲＬＩ）为最高,所诱发的ＯＲ主要为ＯＨ·;②以１５～６２Ｕ／ｍｌ的ｒｈＴＮＦβ处理淋巴细胞７２ｈ,可明显地产生活化效应,这与ＴＮＦＢ诱发淋巴细胞早期产生Ｌｙ－ＣＬ的强度相一致。结论：适当剂量的ｒｈＴＮＦβ可诱导人外周血淋巴细胞产生ＯＲ并促进其增殖。     

IFNγ-LTα与LTα诱导L929细胞凋亡信号转导的初步研究

目的：研究融合蛋白IFNγ-LTα诱导L929细胞凋亡的信号转导机制，并与LTα相比较。方法：用结晶紫染色法观察细胞毒效应；用检测试剂盒检测caspase 8和3活性的变化；观察3种信号转导分子的抑制剂对IFNγ-LTα和LTα诱导的细胞毒效应的影响。结果：IFNγ-LTα能诱导L929细胞凋亡及胞内caspase 8和3的活变化，但两种caspase产生的时间和幅度有所不同。PKC的抑制剂可促进IFNγ-LTα和LTα对L929细胞的杀伤；而PLA2及Ca^2 通道的抑制剂对杀伤则有明显的阻断作用，但对LTα的阻断强于对IFNγ-LTα的阻断。结论：IFNγ-LTα融合蛋白的抗肿瘤活性强于LTα，其信号转导特征有别于LTα。信号分子caspase与PKC、PLA2、Ca^2 之间可能存在关联。     

银夹术加强法行输卵管结扎223例

银夹术加强法行输卵管结扎２２３例马志章浙江省上虞市计划生育技术指导站３１２３００我站自１９９３年６月～１９９５年１２月对２２３例妇女采用银夹术加强法进行输卵管结扎。本组妇女年龄为２０～４０岁，平均３２岁。生育２胎２０９例，１胎１４例。２２３例中分娩后...     

人His6-IFNγ/TNFβ(His6γ-TNFNβ)融合蛋白(包涵体)的分离、纯化与复性研究

应用pET28(含T_7lac启动子和His6-tag)质粒,将人γTNFβ融合基因与之组建成pETγLT表达质粒,并转化于E.coliBL21(DE3).本文对pETγLT/ BL21(DE3)工程菌的His6-γTNFβ重组产物进行了诱导表达,分离纯化的研究.结果表明,该工程菌用LB培养基在37℃扩增至OD_(590)为0.5左右,加IPTG(终浓度为1mmol/L)诱导5小时,此时His6-γTNFβ的表达量可占菌体总蛋白的45%.重组产物绝大多数以IBs形式存在于菌体中.工程菌经反复超声破碎、高速离心,得IBs粗制品后,再经含2mol/L脲的缓冲液洗涤可得到相对纯净的IBs.然后用7mol/L脲变性溶解IBs,离心取上清,进行Ni~(2 )-Sepharose 6B柱一步法亲和层析,可得到电泳纯度为95%的His6-γTNFβ,经稀释复性和用凝血酶切去His6-tag的产物,其细胞毒活性为(1.2～2.0)×10~7U/mgp,抗病毒活性为(6.0～6.6)×10~6U/map.     

重组人肿瘤坏死因子-β(rhTNF-β)的细胞毒效应

应用本室纯化的重组人肿瘤坏死因子-β(rhTNF-β)对悬浮的人白血病细胞HL-60和K562小鼠骨髓瘤细胞NS-1以及贴壁的小鼠纤维母细胞L929和人肝癌细胞SMMC7721进行了微量细胞毒试验,其中悬浮细胞采用~3H-TdR掺入法;贴壁细胞采用结晶紫染色法分别检测.实验表明,此rhTNF-β对HL-60有很强的杀伤作用;NS-1为相对敏感细胞株;而对SMMC7721及K562的杀伤率很低,具有一定抗性.与此同时,作者还应用FDA-PI荧光染色,用荧光显微镜,扫描电镜及透射电镜观察,DNA电泳以及流式细胞仪对细胞周期和凋亡百分率的检测等实验,进一步研究了rhTNF-β对L929和     

重组人肿瘤坏死因子β(HuTNFβ)的纯化及抗肿瘤效应的初步研究

本文利用能表达HuTNFβ的工程菌株(P20KLT)按常规培养及扩增．即采用LB培养液(内含Amp100．μg／ml Tet 5μg／ml)；1：40扩增．当A550达0．1时，加入IAA(20μg／ml)，当A550为1．0时，中止培养，离心(5000rpm，4℃)收集菌体。在菌体中按1：5加入缓冲液，冰浴中超声破碎，13，000rpm高速离心20分钟，     

细胞信号转导JAK-STAT途径的研究进展

细胞信号转导JAK-STAT途径是当前分子生物学研究领域的主题之一。对其深入研究,将为揭示细胞因子对免疫功能的调节、血细胞生成以及神经和胚胎发育中所发挥的既特异又具多效性的生物学功能,提供了分子生物学机理。本文以IFNγ为例,阐述了JAK-STAT途径的信号转导机制,并对T细胞和神经细胞在相关细胞因子作用下,通过不同的JAK-STAT途径出现的生理效应及由抗原(抗sIg Fab)所引发的BCR偶联发现的迟发型JAK-STAT途径作了介绍。     

对下腹、盆腔有手术史者施行腹式绝育术51例的体会

经腹施行双侧输卵管结扎术(以下简称结扎术)是目前永久性绝育的最有效方法，已为广大节育对象所采用、所进择。本站自1993年6月到1996年6月先后为51名下腹、盆腔既往有手术史的节育对象施行了结扎术(占同期共结扎1988例的2．57%)。本组51例对象的特点是下腹部皮肤均有切口疤痕，下腹，盆腔内脏器组织同多半有粘连存在，均有须接受再次手术的心理状态。现将本组受术者的手术方法、结果、体会如下：     

细胞因子信号转导的负性调节因子SOCS-1的研究进展

SOCS是新近发现的一类与细胞因子 JAK- STAT信号转导途径有关的负性调节因子。目前 SOCS家族的成员已达 16个之多 ,该因子能抑制 IL - 6、IFNγ、IL - 2、GH等细胞因子的多种信号转导途径 ,不仅对 JAK- STAT信号途径有负性调控作用 ,而且还参与其它信号途径的调节 ,其功能涉及的对机体正常组织的分化和器官的发育 ,因此已为学术界所关注。 SOCS- 1为该家族中含 SH 2结构域的 SOCS成员之一 ,本文着重对其分子的结构、负性调节机制及其生物学功能作一综述