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1.
目的:建立一种用于细胞培养的皮肤标本新的保存方法。
方法:实验于2004-05-01/2-31在第四军医大学西京医院烧伤外科实验室进行。①分别取流产胎儿头部及躯干部全层皮片(家属知情同意),按照标本保存方法不同分为常规组(4℃保存2h)、冻存1组(-196℃液氮保存1周组)、冻存2组(-196℃液氮保存1个月组)和冻存3组(-196℃液氮保存6个月组)。采用抗冻液4℃下预处理20min后直接快速置于-196℃液氮中的玻璃化冻存方法进行冻存。②分别进行胎儿角质形成细胞、成纤维细胞和毛乳头细胞的原代培养,进行细胞形态学观察,并采用锥虫蓝染色法、四唑盐比色法和克隆形成实验观察培养的第2代角质形成细胞、成纤维细胞和毛乳头细胞的活力。
结果:①与常规组同种细胞相比,冻存1组、冻存2组和冻存3组的胎儿角质形成细胞、成纤维细胞和毛乳头细胞的形态学特点基本相同。②与常规组相比,冻存1组、冻存2组和冻存3组角质形成细胞、成纤维细胞和毛乳头细胞活细胞率、细胞存活率及克隆形成率差异均无显著性意义(P〉0.05)。
结论:利用液氮玻璃化保存用于细胞培养的皮肤标本不会影响细胞活力,是保持组织活性的一种有价值的组织标本保存方法,对组织工程皮肤的建立,乃至构建组织细胞库有着重要意义。 相似文献
2.
目的:探讨静脉给予L-703,606后严重烫伤大鼠P物质免疫活性含量的变化规律。方法:实验于2003-03/2004-01在第四军医大学西京医院烧伤外科实验室完成。选择SD大鼠76只,按随机数分为正常对照组(4只),烫伤对照组(24只),L-703,606组(24只),β-七叶皂甙钠组(24只),运用放射免疫测定方法,动态检测经尾静脉给予神经激肽1受体非肽类拮抗剂L-703,606(250nmol/kg)后深II度烫伤大鼠(20%TBSA)烫伤后早期72h创周及空肠P物质免疫活性物质含量的变化。结果:76只大鼠进入结果分析。①与正常对照组相比,L-703,606组、β-七叶皂甙钠组大鼠创周及空肠P物质免疫活性物质含量同烫伤对照组具有类似规律。烫伤后早期(1h)P物质免疫活性物质含量明显升高,(P<0.01),但均低于烫伤对照组(P<0.01);而后逐渐下降。与烫伤对照组相比,L-703,606组P物质免疫活性物质含量的病理性改变明显较轻,且轻于β-七叶皂甙钠组。结论:神经激肽1受体非肽类拮抗剂L-703,606能抑制严重烫伤大鼠早期P物质免疫活性物质含量的变化,为减轻严重烧伤后早期包括血管通透性增加、血浆蛋白外渗等炎症反应及局部和全身水肿形成提供新的思路。 相似文献
3.
背量:人胚胎干细胞的培养及相关研究一直是近年来国内外科学家关注的热点,而胎鼠成纤维细胞作为滋养层细胞则是胚胎干细胞培养中不可或缺的条件。目的:探讨胎鼠成纤维细胞作为滋养层细胞在培养、传代及预处理等方面的条件。设计:分组实验研究。地点和对象:解放军第四军医大学西京医院烧伤科完成,对象为一级昆明小鼠,孕龄12d左右,由该校实验动物中心提供。干预:用胰蛋白酶消化法培养胎鼠成纤维细胞,观察细胞在增殖、传代、冻存及复苏等方面的条件;用不同浓度的丝裂霉素对细胞进行预处理,利用MTT法测定细胞的生长曲线,筛选最佳浓度及作用时间。主要观察指标:胎鼠成纤维细胞的培养和预处理。结果:胎鼠成纤维细胞的增殖速度较快,在第4代以后细胞开始变形并趋于衰老;以20mg/L丝裂霉素处理细胞2h,可明显抑制细胞的增殖而不引起细胞的死亡。结论:作为滋养层细胞,胎鼠成纤维细胞应选择第4代以前的细胞,丝裂霉素处理条件为20mg/L作用2h。 相似文献
4.
目的:了解大鼠深Ⅱ度烧伤后不同时间、不同厚度皮片移植对细胞增殖的抑制因子-抑癌基因p53基因表达影响。方法:实验于2002-07/2003-08在第四军医大学西京医院烧伤外科实验室及基础部生物化学实验室完成。每只大鼠背部两处1%深Ⅱ度烫伤,行自体刃厚、全厚皮片移植,移植时间分别为:伤后即刻、伤后1周、伤后2周,在皮片移植术后的1,2,3,4周时间点取材,每个时间点5个标本。提取标本组织总mRNA,行p53基因及内参照PCR扩增,电泳后比较各时间点总光密度值。结果:在伤后即刻、伤后1周及伤后2周皮肤移植p53基因表达量为0.82±0.12,0.72±0.09,0.65±0.07,刃厚、全厚皮片移植后p53基因表达量为0.63±0.06,0.85±0.11,在不同移植时间组及刃厚与全厚皮片组间比较差异均有非常显著性意义(P<0.01),p53基因在大鼠的创伤愈合中表现出了与尽早皮片移植及移植物厚度上的正相关性。结论:p53参与了大鼠烧伤后皮肤移植后的创伤愈合,尽快及尽可能厚的皮肤移植有助于p53表达的增高,可能与减少瘢痕形成有关。 相似文献
5.
烧伤病人动、静脉留置针输液的护理 总被引:5,自引:1,他引:5
动、静脉留置针输液是近几年兴起的一种新的输液方法。它选择血管广泛,不易引起刺破血管形成血肿,能多次使用同一血管,维持输液时间长,短时间内可输入大量液体,是烧伤休克期、烧伤手术及术后维持输液的理想方法。其输液方法是常规消毒皮肤后进针部位用1%普鲁卡因或利多卡因浸润麻醉,进针方法同一般静脉穿刺,见回血后将留置针外管沿血管方向推进,退出针芯,接通输液。作者就采用动、静脉留置针输液时血管的选择、穿刺方法、留置时间及护理作了阐述。认为采用此方法输液简便实用,且国产动、静脉留置针购货容易、价格低廉。 相似文献
6.
目的:通过重建端粒酶活性延长人表皮干细胞寿命,为组织工程皮肤修复提供理想种子细胞。方法:用差速黏附法分离获得人表皮干细胞(human epithemal stem cells,hESCs),以TRAPeze ELISA法分别检测新鲜的不同传代次数的hESCs端粒酶活性(RTA),同时把含外源性人端粒酶逆转录酶的质粒导入hESCs,比较转染细胞与非转染细胞体外培养时端粒酶活性及生存情况。结果:非转染细胞随传代次数的增多RTA逐渐减弱,到12-16PD时出现细胞衰老、死亡、增殖停止;转染细胞到26PD时细胞形态无明显改变,细胞继续生长,RTA仍未减弱。结论:人表皮干细胞在体外培养过程中,仍具有端粒酶活性,但不足以抑制该细胞的衰老。重建端粒酶活性可延长人表皮干细胞寿命并维持自我更新,为建立组织工程标准细胞系提供了新的实验手段。 相似文献
7.
立体培养条件下人皮肤成纤维细胞的生物学特性 总被引:5,自引:3,他引:5
目的 观察人皮肤成纤维细胞在立体培养条件下的生长、增殖及代谢情况。方法 以人纤维蛋白凝胶为载体,将人皮肤细胞中的成纤维细胞接种于其中,以单层培养为对照,观察细胞对纤维蛋白胶的作用及其在生长增殖、DNA合成及胶原合成等方面的生物学变化。结果 成纤维细胞在纤维蛋白胶中具有良好的细胞形态、正常的生长增殖、DNA合成及胶原合成等生物学功能并能引起纤维蛋白凝胶的明显收缩。结论 该培养系统可用于成纤维细胞的体外培养且能较好地模拟其在创面愈合中的生物学行为。 相似文献
8.
重视创伤愈合研究迎接新世纪挑战 总被引:6,自引:3,他引:3
人类即将进入21世纪,在新的世纪中,科学将会飞速发展,生命科学也不例外。随着高科技的不断发展,新型材料的不断出现,高新尖技术的不断渗透,医学领域中的许多课题均面临着前所未有的巨大挑战和机遇,创伤愈合就是其中之一。1 历史回顾创伤愈合的临床历史悠久,此历史也可认为是外科的历史。缝合创部的设想从公元前4000年时就产生了,有关创部治疗的纪录可追溯至公元前1700年。创伤治疗的临床演变是以频繁的战争为契机,并随时代而发生变迁。传统的创伤愈合基本概念大约是16世纪中叶后初步确立的,即尽可能地缩小组织损伤… 相似文献
9.
10.
烫伤大鼠垂体前叶P物质和降钙素基因相关肽神经的变化 总被引:2,自引:0,他引:2
目的 观察烫伤早期大鼠垂体前叶P物质 (SP)与降钙素基因相关肽 (CGRP)神经的形态分布变化。 方法 采用大鼠 30 %TBSAⅢ度烫伤模型 ,于伤后 1、2、6、10、12、2 4、72h 7个时相点 ,对垂体前叶SP和CGRP两种肽能神经行免疫组织化学染色观察 ;经图像分析测定 ,比较两种神经覆盖面积的变化。 结果 两种肽能神经的形态变化明显 ;伤后 1hSP、CGRP神经数目与对照相比分别增加 85 .7%和 6 0 .5 % ,神经纤维的膨体、分枝等明显增多 ;2h后减少 ,2 4h后趋于恢复。图像分析显示 :两种肽能神经的覆盖面积呈正相关变化 ,其基本变化趋势为伤后 1h升高 ,随后降低 ,伤后 12h降至最低点 ,然后回升。 结论 烫伤后早期大鼠垂体前叶的SP与CGRP神经形态分布发生明显变化 ,可能参与了全身应激反应的功能调节 相似文献