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1.
目的:设计同时靶向B淋巴细胞表面CD20 和CD19 两个抗原蛋白的双特异嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor,CAR)并制备BiCAR-T 细胞,检测其对B淋巴细胞肿瘤细胞的杀伤作用以及对免疫缺陷B-NSG 小鼠白血病模型的治疗效果。方法:构建基于鼠源CD19 和人源化CD20 scFv 的双靶点CAR分子,将CAR基因装载于慢病毒载体中,在293T细胞中包装慢病毒,感染健康人T 细胞制备BiCAR-T 细胞。构建表达CD19 和CD20 的K562-CD19-GFP、K562-CD20-GFP 以及表达Luciferase 的Nalm6-Luc-GFP 细胞作为靶细胞,将BiCAR-T 细胞与靶细胞共同孵育,检测其对靶细胞杀伤能力及释放IFN-γ 水平。使用Nalm6-Luc-GFP 细胞构建白血病小鼠模型,尾静脉注射BiCAR-T细胞,通过小动物成像方法观察BiCAR-T细胞对荷瘤小鼠的治疗作用。结果:健康人来源的BiCAR-T 细胞经7 d 培养后扩增良好,扩增倍数为20~50 倍,阳性率为10%~92%,显示成功制备BiCAR-T细胞。在效靶比为10∶1 时,BiCAR-T细胞对Nalm-6、K562-CD19-GFP 和K562-CD20-GFP 的杀伤率显著高于对照组细胞[ (76.7±7.4)% vs(8.7±2.4)%、(93.3±5.2)% vs(46.7±6.2)、(51.0±0.8)vs(30.7±0.5)%,均P<0.01];与对照组相比,与Nalm-6细胞共孵育后BiCAR-T 细胞分泌IFN- γ 量显著增加[(872.7±7.7)vs(101.0±5.3)pg/ml ,P<0.01]。动物实验表明,BiCAR-T细胞对B-NSG小鼠白血病模型治疗效果明显,注射BiCAR-T细胞后白血病细胞逐渐减少,第50 天时基本消失,小鼠全部存活至第70 天被安乐死;PBS和对照T细胞组小鼠分别在(19±3)和(20±1)d 全部死亡。结论:成功设计了表达CD19 和CD20 的双靶点CAR分子后成功制备了BiCAR-T 细胞,该细胞能够有效杀伤表达CD19 和/或CD20 的B淋巴细胞肿瘤细胞,与靶细胞共同孵育后能够分泌大量IFN-γ,对B-NSG免疫缺陷小鼠白血病模型具有明显的治疗效果。 相似文献
2.
目的 采用碳离子注入对硅橡胶进行表面改性,得到碳-硅橡胶,评价碳-硅橡胶的机械性能和生物安全性.方法 按照国家标准,采用邵氏硬度计(A型)和电子万能实验机,测量其邵氏硬度、抗拉强度、断裂伸长率以及断裂强度等机械性能参数;采用红细胞溶血实验、全身毒性实验、皮下植入实验、过敏与刺激实验、热源实验对其生物安全性进行评价.结果 邵氏硬度计和电子万能实验机测量结果表明碳离子注入法未改变硅橡胶机械性能;红细胞溶血实验显示材料溶血率小于国家标准,说明材料植入体内后不会引起溶血反应;全身毒性实验的结果表明材料不具有毒性;皮下植入实验结果表明有良好的体内安全性和相容性;刺激实验:刺激率为0;致敏实验:致敏率为0;热源反应中家兔平均体温升高为0.1℃,其不具有致热源作用,初步符合生物医用材料的要求.结论 碳离子注入硅橡胶表面未改变硅橡胶的机械性能,并具有良好的生物安全性. 相似文献
3.
苏州科技城医院坐落于苏州高新区太湖之滨,由苏州高新区政府投资新建,是一所集医疗、科研、康复、预防于一体的三级综合性公立医院。医院占地面积140亩,总建筑面积180000m~2,总投资额16亿,设计床位1200张。医院于2013年9月29日奠基,2014年12月28日主体封顶,2016年4月正式投入使用,比预定日期提前了将近1年! 相似文献
4.
目的 初步探讨碳离子硅橡胶经过不同消毒试剂与方法处理后其表面亲疏水性、表面自由能以及邵氏硬度的变化情况.方法 碳离子硅橡胶经过70%酒精、2%碱性戊二醛、0.5%碘伏、5.25%次氯酸钠、3%过氧化氢以及134℃高温、高压等消毒试剂或方法处理后,采用静态接触角测定仪检测其表面水、甘油接触角以及邵氏硬度变化情况,采用Owen-Wendt公式计算表面自由能γs、极性分量γsp以及非极性分量γsd变化.结果 碳离子硅橡胶经过5.25%次氯酸钠以及3%过氧化氢处理后,其表面接触角以及表面自由能发生明显变化,前者使得其表面呈现出完全的亲水性;70%酒精、2%碱性戊二醛、0.5%碘伏以及134℃高温、高压等方法对材料表面接触角以及表面自由能等影响较小.不同处理组材料表面邵氏硬度差异均无统计学意义.结论 70%酒精以及134℃高温、高压等消毒方法对碳离子硅橡胶表面性能影响最小,结合操作便利性等因素,70%酒精可认为是该材料最适宜的消毒处理方式.而次氯酸钠消毒液极不利于该材料表面形貌维持,不宜采用. 相似文献
5.
目的 探讨以超声筛选最佳特征向量,结合广义回归神经网络(GRNN)识别强度聚焦超声(HIFU)致生物组织变性的方法。方法 采用HIFU以不同剂量对300个新鲜离体猪肉组织样本进行辐照,获得变性及未变性样本各150个。于辐照前后采集超声声像图,经减影处理获得超声减影图像;以灰度-梯度共生矩阵法及灰度差分统计法提取18个特征参数,经P值显著性检测法及欧氏距离法筛选获得最佳特向量。以300个样本中的198组为训练样本,102组为测试样本。识别训练样本后,以P值显著性检测法剔除的特征向量和欧氏距离最小的2个特征向量为最佳特征向量的对照组,将其分别输入GRNN,以识别组织变性;计算特征向量结合GRNN对测试样本的正确识别率和总识别率。结果 最佳特征向量为梯度分布不均匀性和灰度分布不均匀性,其结合GRNN的总识别率分别为90.20%、91.18%,以2个最佳特征组合并结合GRNN后总识别率为98.04%。P值显著性检测法剔除的特征向量为平均值、对比度,其结合GRNN的总识别率分别为48.04%、75.49%,2以2个最佳特征组合并结合GRNN的总识别率为79.41%。欧氏距离最小的特征向量为能量、小梯度优势,结合GRNN的总识别率分别为88.24%、89.22%,以2个最佳特征组合并结合GRNN的总识别率为89.22%。最佳特征向量组合结合GRNN可明显提高对变性组织的识别率。结论 基于超声减影图像,以灰度分布不均匀性、梯度分布不均匀性与GRNN结合,均可提高对HIFU辐照所致组织变性的识别率;以2个最佳特征组合结合GRNN识别效果更佳。 相似文献
6.
目的探讨实验室检查对热射病(HS)患者的诊断价值。方法采用频数统计方法,对某院2015年7月10-30日急诊收治的21例(HS)的实验室检查结果进行分析。结果 21例HS患者存在电解质、心肌酶谱、凝血功能的异常;其中9例危急重患者降钙素原、B型脑钠肽明显异常,6例死亡。结论热射病患者病死率较高,及时完善实验室相关检查可提高患者生存率及预后。 相似文献
8.
目的 总结老年脊柱结核患者的临床特点,探讨老年脊柱结核患者手术方式的选择策略。方法 2005年10月至2010年10月采用6种手术方式治疗老年脊柱结核患者151例,69例患者纳入研究,男36例,女33例;年龄60~83岁,平均68.3岁。62例(171例次)合并有其他疾病。记录患者的临床表现、发病部位及影像学表现。统计误诊、误治的发生情况。在治疗前、术后1周及末次随访时采用疼痛视觉模拟评分(visual analog scale, VAS)进行对比分析,对伴有脊髓神经损害患者采用Frankel分级评价术后脊髓神经功能改善情况。结核临床治愈判定采用脊柱结核治愈标准。结果 所有患者均有不同程度的局部疼痛,VAS评分平均为(8.2±1.4)分,严重疼痛者(VAS评分7分以上)42例(60.9%)。72.5%的患者无明显结核中毒症状,68.1%的患者有脊髓神经损害表现,43.5%的患者无椎旁脓肿或腰大肌脓肿。腰椎结核发病率最高(78.3%,54/69),双椎体结核最常见(59.4%,41/69)。均有轻、中度的后凸畸形,Cobb角平均为20.4°±4.3°。误诊率为30.4%(21/69),误治率为13.0%(9/69)。获得平均27个月随访,结核临床治愈67例,2例窦道形成,迁延未愈。融合节段(4.1±0.6)个,骨融合时间(5.9±1.7)个月。术后后凸畸形矫正9.5°±3.6°,末次随访时矫正角度丢失7.2°±2.3°。5例伴有脊髓神经损害者术后Frankel分级至少提高了1级。术后肺部感染5例(其中死亡1例),心功能不全5例,脑梗死2例,内固定松动2例,窦道形成5例,药物性肝损害5例,药物性皮疹6例,术后神经功能损害加重1例。结论 老年脊柱结核患者起病隐匿,多合并其他疾病,易导致误诊、误治。手术方式的选择应遵循个体化及微创的原则,术中固定节段应适当延长。 相似文献
9.
10.
【目的】探讨miR-143在膀胱癌组织中的作用及机制,为膀胱癌的临床诊治提供参考。【方法】选用体外培养的T24细胞株作为研究对象,按照处理方式分为si-COX-2转染组、miRNA-143转染组、阴性对照组、空白对照组。Transwell趋化实验和3 H-thymidine 法检测 T24细胞增殖和迁移能力,免疫印迹法检测COX-2蛋白表达变化。【结果】miR-143和si-COX-2转染T24细胞48~72 h后,细胞增殖能力较正常T24细胞相比下降36%~49%( P <0.01),迁移能力下降81%。免疫印迹结果表明,si-COX-2或miR-143转染的T24细胞内源性COX-2表达水平显著减少至正常T24细胞表达水平的0.39和0.31倍( P<0.01)。【结论】miR-143可能通过COX-2通路发挥对膀胱癌 T24细胞的增殖和侵袭的抑制作用并抑制COX-2的表达。提示miR-143可作为膀胱癌的治疗候选药物。 相似文献