尿液红细胞定量分析方法学的探讨

目的 探讨并比较尿液红细胞自动化仪器定量方法与人工镜检定量计数的关系.方法 制备尿红细胞标准液,分别用不离心、离心两种人工镜检方法和UF-100全自动尿沉渣分析仪、朗迈UriSed全自动尿沉渣分析仪两种自动化尿液分析仪进行检测,分析四种尿红细胞定量方法间的差异.结果 离心镜检法检测尿红细胞结果与理论浓度之间偏差最大,不离心镜检法、UF-100分析仪法、朗迈UriSed分析仪法检测结果较接近理论浓度.不离心镜检法检测结果与理论浓度之间之间差异无统计学意义（P＞0.05）;UF-1 00分析仪、朗迈UriSed分析仪、离心镜检检测结果与理论浓度间的差异均有统计学意义（P0.05）;不离心镜检法检测结果与UF-100分析仪、朗迈UriSed分析仪检测结果间的差异无统计学意义（0.05）;离心镜检检测结果与UF-100分析仪、朗迈UriSed分析仪检测结果之间的差异有统计学意义（P＜0.05）.UF-100分析仪检测结果与朗迈UriSed分析仪检测结果之间的差异有统计学意义（P＜0.05）.四种方法的检测结果与理论值之间均有良好的线性关系（r值分别为0.991,0.999,0.999,0.998）.结论 尿液红细胞离心镜检计数法不适用于红细胞定量分析.UF-100分析法和朗迈UriSed分析法由于具有快速自动化检测的特性更适用于尿红细胞常规定量检测,但对尿红细胞的识别应另行探讨.不离心镜检计数法能较准确地反映尿液红细胞的实际浓度,但由于操作繁琐,效率低下且存在人工误差而不实用,可作为自动化尿分析仪的复检方法.     

滋癸汤加减治疗肝肾阴虚型多囊卵巢综合征疗效观察

目的 探讨滋癸汤加减对肝肾阴虚型多囊卵巢综合征的临床疗效。     

B淋巴细胞活化及凋亡和BlyS、IL-10、IL-6对狼疮性肾炎的影响

目的：探讨B淋巴细胞活化及凋亡、BlyS、IL-10、IL-6对狼疮性肾炎的（LN）影响。方法：以双抗体夹心酶联免疫吸附（ELISA）法测定LN患者外周血中BlyS水平,流式蛋白分析系统（CBA）测定外周血IL-6、IL-10水平,流式细胞仪测定外周血CD19＋CD69＋及CD19＋凋亡率（AV）水平。结果：（1）①活动期和静止期LN患者CD19＋CD69＋、AV水平较正常组显著升高（P〈0.01）;②活动期LN患者IL-10、IL-6、CD19＋CD69＋、AV水平较静止期显著升高（P〈0.01）;③活动期、静止期BlyS水平较正常组差异无统计学意义（P〉0.05）。（2）LN患者活动指数（SLEDAI）与ds-DNA、IL-10、AV之间呈正相关,与BlyS、CD19＋CD69＋水平无相关性;BlyS与ds-DNA、IL-10、CD19＋CD69＋、AV均无相关性;IL-10与ds-DNA、AV呈正相关,与CD19＋CD69＋无相关性。（3）逐步回归分析发现活动指数与C3、凋亡率、CD69、C4有相关性,C4对活动指数影响最大;凋亡率与IL-6、IL-10有相关性,IL-6对凋亡率的影响最大。结论：（1）活动期和静止期LN患者B淋巴细胞活化率及凋亡率均增多;（2）CD19＋CD69＋、CD19＋凋亡率、IL-6、IL-10可反映狼疮的活动性。     

狼疮性肾炎患者外周血调节性T细胞变化的意义

目的：探讨活动期和静止期狼疮性肾炎（LN）患者外周血中调节性T细胞CD4＋CD25＋CD127lo（Treg）变化的意义。方法：流式蛋白分析系统（CBA）测定外周血IL-6、IL-10水平,流式细胞仪测定外周血CD19＋CD69＋、CD19＋凋亡率、Tregs水平。结果：（1）①LN患者CD19＋CD69＋、CD19＋凋亡率水平较正常组升高（P〈0.01）;②活动期LN CD4＋、CD4＋CD25＋CD127lo水平较正常组降低（P〈0.01）;静止期CD4＋、CD4＋CD25＋CD127lo与正常组比较差异无统计学意义;③活动期LN患者IL-10、IL-6、CD19＋CD69＋、CD19＋凋亡率水平较静止期显著升高（P〈0.01）。（2）Treg与CD19＋CD69＋、CD19＋凋亡率无相关性,与IL-10、IL-6呈负相关（P〈0.05）,与ds-DNA、SLEDAI呈负相关（P〈0.01）。CD19＋凋亡率与IL-10呈负相关（P〈0.01）,与SLEDAI、CD19＋CD69＋呈正相关（P〈0.01）。结论：Treg可作为狼疮活动性的指标,并能够减少或完全抑制自身抗体的产生。     

尿毒症患者血液透析前后CD4＋CD25＋CD127lo变化的意义

【目的】探讨透析前后调节性T细胞（Treg）的变化的意义。方法采用三色荧光染色通过流式细胞仪（FCM）分析外周血中CD4＋CD25＋CD127lo细胞水平。结果①血液透析前、后、CKDⅢ-Ⅳ组Treg较正常组显著减少（P〈0.01）;血液透析前后差值,TregP〉0.05;尿素氮（BUN）、血磷（P）,P〈0.01。②根据患者Kt/V、尿素氮下降率〉65%等,将患者分为透析充分与透析不充分组。BuN透析后2组有显著性差异P〈0.01。结论尿毒症毒素可导致Treg不足,Treg参与了尿毒症的发生和发展,透析后并不能改善Treg的不足。     

调节性T淋巴细胞转化生长因子-β白细胞介素-17对狼疮肾炎的影响及相互关系

目的 检测活动期、静止期狼疮肾炎(LN)患者及健康人外周血白细胞介素(IL)-10、IL-6、转化生长因子(TGF)-β、IL-17、CD4~+CD25~+CD127~(lo)调节性T淋巴细胞水平,探讨TGF-β与调节性T淋巴细胞、IL-6、IL-17在LN的变化及相互关系.方法 采用三色荧光染色通过流式细胞仪(FCM)检测外周血中CD4~+CD25~+CD127~(lo)细胞水平,以双抗体夹心酶联免疫吸附(ELISA)法测定LN患者外周血中TGF-β、IL-17水平,用CBA流式蛋白分析系统检测外周血中IL-10、IL-6水平.结果 ①活动期LN患者外周血调节性T淋巴细胞低于静止期、健康组(P<0.01),静止期与健康组差异无统计学意义(P>0.05).②活动期LN患者IL-10、IL-6与静止期相比显著升高(P<0.01).③活动期LN、静止期LN、健康组TGF-β、IL-17无变化.④LN患者调节性T淋巴细胞与IL-10、IL-6、SLEDAI之间呈负相关(P<0.05);与C3、C4之间无显著相关性.⑤LN患者外周血IL-10、IL-6与SLEDAI呈正相关(P<0.01),与C3、C4均呈负相关(P<0.01).LN患者外周血SLEDAI与C3、C4均呈负相关(P<0.01).⑥LN患者调节性T淋巴细胞与TGF-β、IL-17之间无相关性.⑦TGF-β与IL-17呈正相关(P<0.01).结论 ①LN患者外周血中调节性T淋巴细胞及IL-10、IL-6、TGF-β的水平变化可作为狼疮活动性的指标.②LN患者外周血中调节性T淋巴细胞与IL-10、IL-6呈负相关.③激素有助于提高调节性T淋巴细胞,降低IL-17.④T淋巴细胞将随机体状态、局部微环境的改变以及维护机体免疫平衡的需要出现不同的极化.     

IgA肾病患者外周血单个核细胞凋亡率及调控凋亡基因相关指标的检测

目的：探讨IgA肾病（IgAN）活动期与稳定期外周血单个核细胞（PBMC）凋亡率、CD3^＋、CD3^＋CD4^＋、CD3^＋CD8^＋、CD3^＋CD4^＋Fas、CD3^＋CD8^＋Fas、sFas、sFasL等表达的意义。方法：采用ELISA检测sFas、aFasL、IL-1β和流式细胞仪检测PBMC凋亡率等指标。结果：IgA肾病活动期患者PBMC凋亡率、sFas、sFasL明显高于正常人，稳定期sFas、sFasL较正常人有统计学差异（P〈0．01）；CD3^＋CD4^＋Fas、CD3^＋CD8^＋Fas升高（活动期，P〈0．05；稳定期，P〈0．01）；PBMC凋亡率与sFas、sFasL无相关性：sFasL与sFas、CD3^＋CD4^＋Fas、CD3^＋CD8^＋Fas有相关性。结论：IgAN活动期PBMC凋亡率明显高于正常人，导致sFas、sFasL增多，在IgAN中增加的sFas、sFasL可能抑制肾小球系膜细胞凋亡，而且可能是IgAN进展中的一个因素。     

益肾降浊冲剂对慢性肾功能不全患者B淋巴细胞及调节性T细胞的影响

目的 探讨益肾降浊冲剂对慢性肾功能不全（chronic renal insufficiency, CRI）患者B淋巴细胞、调节性T细胞(Treg)的影响。     

补肾活血方对骨质疏松症大鼠Smurf1信号转导蛋白的影响

目的通过观察摘除卵巢所致骨质疏松症模型中肾脏组织的Smurf1蛋白表达量的变化,研究补肾活血方治疗骨质疏松症的作用机制。方法采用切除雌性大鼠双侧卵巢的方法制备骨质疏松症的模型,应用补肾活血方干预模型大鼠,以戊酸雌二醇作为阳性对照组,以正常大鼠及假手术组作为标准的对照组,观察各组大鼠肾脏组织中的Smurf1 mRNA和蛋白表达变化。结果空白模型组中Smurf1 mRNA及蛋白的表达较空白组和假手术组显著降低(P0.01);治疗12周后,各用药组Smurf1 mRNA及蛋白表达均较空白模型组显著上调(P0.01)。结论补肾活血方可能通过调控雌性大鼠中Smurf1 mRNA及蛋白的表达,对骨质疏松症起到防治的作用。     

加减滋癸汤对肝肾阴虚型多囊卵巢综合征高雄激素血症的影响

目的观察加减滋癸汤对肝肾阴虚型多囊卵巢综合征高雄激素血症的疗效。方法采用随机对照的方法将66例辨证为肝肾阴虚型多囊卵巢综合征患者分为中药治疗组和西药对照组（各33例）。中药组口服加减滋癸汤;西药组口服达英-35（Diane-35）。观察治疗前、治疗停药后患者第1、6个月血清性激素、多毛、痤疮的变化。结果①治疗前后两组促卵泡激素（FSH）无明显变化,治疗停药1个月经周期后两组患者促黄体激素（LH）、睾酮（T）、LH/FSH比值均较治疗前降低,有统计学意义（P〈0.01）,停药6个月经周期后,中药组与治疗前比较仍下降明显（P〈0.01）,西药组恢复到治疗前水平（P〉0.05）。②治疗停药1个月经周期后两组痤疮比治疗前均明显改善,有统计学意义（P〈0.05）,停药6个月经周期后,中药组较治疗前仍明显改善（P〈0.05）,西药组恢复到治疗前状态（P〉0.05）。③两组治疗前后多毛均无明显变化（P〉0.05）。结论加减滋癸汤可有效改善肝肾阴虚型多囊卵巢综合征高雄激素血症情况。