小鼠IL-35基因的克隆及原核表达

目的 克隆小鼠mIL-35两亚基mEBI3,mIL-12p35 cDNA,并构建mIL-35基因的原核表达载体并进行诱导表达.方法 RT-PCR方法从RAW246.7细胞中扩增mEBI3基因及脂多糖体外刺激BALB/c小鼠的脾细胞中扩增mIL-12p35基因,通过重叠PCR方法扩增出mEBI3-Linker-mIL-12p35基因,并构建原核表达载体pET-30a-mIL-35,转化感受态E.coli BL21(DE3),并用IPTG进行诱导表达.SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳方法检测目的蛋白的表达.结果 成功克隆了mEBI3、mIL-12p35 cDNA,通过重叠PCR方法扩增出mEBI3-Linker-mIL-12p35片段,并构建出原核表达载体pET-30a-mIL-35;在IPTG诱导下在E.coli BL21(DE3)中高效表达相对分子质量(Mr)为50 000的重组mIL-35蛋白,目的蛋白主要以包涵体的形式存在于沉淀中.结论 利用构建的原核表达载体pET-30a-mIL-35成功表达出mIL-35蛋白,为进一步探讨mIL-35的生物学功能奠定了基础.     

葛根对小白鼠免疫功能的影响

从免疫学方面探讨中药葛根的强身健体作用。方法 :用 10 0 %葛根水浸出液定期给小鼠灌胃 ,然后检测小鼠抗体产生能力、淋巴细胞转化率、巨噬细胞吞噬的功能。结果 :用药组小白鼠以上免疫学指标均有显著增强作用 ,与对照组相比有非常显著性差异 (P <0 .0 1)。未见有副作用。结论 :口服葛根可明显增强机体免疫功能。     

关于本科生医学免疫学启发式教学的探讨

针对医学免疫学理论抽象、逻辑性强、学生感觉枯燥难懂的特点,介绍了启发式教学及其实施的三个阶段,同时指出该教学方式具有效激发学生的学习兴趣,培养独立思考和创新意识,提高教学质量的作用.     

核转录因子协同刺激物OCA-B作用研究进展

OCA-B,又称为BOB.1或OBF.1,为B淋巴细胞的特异性核转录因子协同刺激物,可通过与核转录因子POU家族中的Oct-1及Oct-2相互作用而激活免疫球蛋白基因,促进抗体的生成,此外OCA-B还与B细胞的活化及生发中心的形成有密切的关系。此外在T淋巴细胞中也可检测到OCA-B表达,说明OCA-B对T细胞亦可发挥调节基因转录的作用。本文主要对OCA-B的结构、分布及生物学作用的研究进展做一阐述。     

黄柏体外抑菌作用研究

目的探讨黄柏的体外抑菌作用。方法用K-B纸片扩散法检测黄柏对金黄色葡萄球菌、白色葡萄球菌、甲型链球菌、乙型链球菌、变形杆菌的抑菌作用。结果黄柏对上述细菌均有明显抑制作用。结论黄柏在体外有明显的抑菌作用。     

连翘体外抑菌作用的研究

目的：探讨连翘的体外抑菌作用。方法；用K－B纸片扩散法。100％连翘浸出液滤纸片对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、白色葡萄球菌、甲型链球菌、乙型链球菌抑菌作用进行了研究。结果：连翘对以上细菌均有明显抑菌作用。结论：连翘体外有明显的抑菌作用。     

枸杞对抗体形成细胞的作用研究

目的：观察枸杞对小鼠抗体形成细胞的作用。方法：用100%浓度枸杞浸出液定期给小鼠灌鼠,然后检测小鼠抗体产生能力,特异玫瑰花结形成细胞检测（SRFC）、血清IgG检测。结果：用药组以上三项免疫学指标均增高。结论：枸杞有明显促进抗体形成细胞的作用。     

白血病抑制因子基因在急性白血病患者中的表达及意义

目的研究急性白血病(acute leukemia,AL)患者外周血白血病抑制因子(leukemia inhibitory factor,LIF)mRNA的表达水平及其与AL病情、疗效和预后的关系。方法采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测37例不同类型以及同一类型不同阶段AL患者[初治患者16例(初治亚组)、完全缓解患者12例(完全缓解亚组)、复发患者9例(复发亚组)]LIF的mRNA的表达水平,并与20例健康者(对照组)比较。结果初治亚组LIF基因mRNA阳性表达率低于对照组和完全缓解亚组(P<0.05);复发亚组LIF基因mRNA阳性表达率低于完全缓解组(P<0.05);复发亚组与初治亚组比较及完全缓解亚组与对照组比较,LIF基因mRNA阳性表达率差异无统计学意义(P>0.05);LIF基因表达率在急性髓系白血病(AML)和急性淋巴细胞白血病(ALL)患者间无显著性差异(P>0.05)。结论 LIF基因表达水平与AL患者病情变化密切相关。检测AL患者LIF基因表达情况,为AL患者检测病情、疗效评价、指导临床用药和预后判断,提供了一定的理论依据。     

IL-21在肝癌细胞株H22细胞中的表达及其活性

摘 要　目的：构建小鼠IL-21（mIL-21）真核表达载体mIL-21-pcDNA3.1，转染肝癌H22细胞，探讨其生物学活性。方法：RT-PCR法扩增mIL-21基因，构建mIL-21真核表达载体mIL-21-pcDNA3.1，并经DNA测序证实。脂质体法介导mIL-21-pcDNA3.1转染H22细胞，RT-PCR和Western boltting鉴定其表达，MTT法检测mIL-21-pcDNA3.1对T细胞增殖和NK细胞杀伤活性的影响。结果：DNA序列分析证实构建的mIL-21-pcDNA3.1正确无误，RT-PCR和Western boltting证实转染的H22细胞中有mIL-21的表达。MTT法显示，转染mIL-21的H22细胞培养上清刺激T细胞增殖的刺激指数（stimulation index，SI）为3.412±0.312，联合ConA的刺激指数为4.673±0.450，均显著高于转染空质粒组的1.465±0.103和未转染组的1.447±0.245,(P<0.01）。转染mIL-21的H22细胞培养上清NK细胞杀伤率为(81.66±4.26)%，显著高于转染空质粒组的（34.74±5.52)%和未转染对照组的（33.61±1.42)%。结论：mIL-21-pcDNA3.1载体在H22细胞中的表达可显著增强T细胞增殖及NK细胞的杀伤功能，为其在抗肝癌治疗中的应用奠定了基础。     

苦参体外抑菌作用的研究

目的探讨苦参的体外抑菌作用。方法采用K-B纸片扩散法检测苦参对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、甲型链球菌、乙型链球菌以及变形杆菌的影响。结果与生理盐水组比较,苦参对上述细菌均有明显抑制作用。结论苦参在体外有明显的抑菌作用。