25例肾病综合征患儿调节性T细胞水平变化及意义

目的：观察肾病综合征（NS）患儿外周血中调节性T细胞（Treg）、淋巴细胞各亚群的变化,探讨其在疾病发生和发展中的作用。方法选取20例健康儿童作为对照组,25例患儿作为肾病综合征组。采用流式细胞术对两组儿童进行外周血Treg、淋巴细胞各亚群检测。结果与正常对照组比较,NS组的外周血CD4^＋CD25^＋CD127^-／low Treg细胞、CD3^＋CD4^＋辅助性T细胞、CD19^＋B细胞表达均明显降低（P＜0．05）;而CD3^＋CD8^＋抑制性T 细胞表达明显升高（P＜0．05）;肾病综合征组患儿的 CD16^＋CD56^＋NK细胞表达降低,但与对照组相比无统计学差异（P＞0．05）。结论淋巴细胞免疫功能的紊乱,特别是Treg的表达及其功能的改变,参与了肾病综合征的发病,其检测可有助于肾病综合征的诊治。     

广州地区患儿医院感染轮状病毒腹泻病的分子流行病学研究

目的了解广州地区儿童发生医院轮状病毒感染的分子流行病学特点。方法采用前瞻性研究和分子流行病学方法,对2009年1-12月入院,符合医院感染急性腹泻诊断并经过大便轮状病毒抗原检测证实为轮状病毒感染的50例患儿,用RT-PCR方法进行G、P分型。结果 2009年全年共收治30 351例患儿,发生医院感染692例,感染率为2.28%,其中胃肠道感染138例,感染率为0.45%;发病年龄以<2岁为主,其中7～12月龄最高,占36.00%;发病季节集中在秋、冬季节(1、10、11月份);对50例RV抗原阳性病例进行G、P分型,其中45例显示阳性结果,阳性率为90.00%,G分型以G1型(60.00%)最多、其次为G3型(13.33%),P分型以P8型(60.00%)为主、其次为P4型(26.67%),组合分型以G1P8为主(40.00%)、其次为G1P4型(13.33%)。结论广州地区2009年医院感染轮状病毒腹泻病流行的主要基因型为G1型,组合型以G1P8型为主。     

血清学指标对噬血细胞综合征患儿死亡预测价值的临床研究

目的 探讨噬血细胞综合征(hemophagocytic syndrome,HPS)患儿诊断时的血清学指标与死亡的关系及对死亡的早期预测价值.方法 采用回顾性病例对照研究方法,对2005年7月至2012年7月广州市妇女儿童医疗中心收治的108例HPS患儿血清学、病理学改变及预后资料进行系统分析.按随访患儿的生存情况分为存活组和死亡组,应用COX模型对可能与HPS死亡相关的危险因素进行分析;应用决策树探讨各指标对HPS死亡的预测价值.结果 108例HPS患儿中,死亡33例,病死率30.6％,且90.3％在发病后8周内死亡.多因素分析显示白细胞＜5×109/L(HR =9.08,95％ CI3.07 ～26.87)、血红蛋白＜80 g/L(HR =6.15,95％ CI 1.68 ～ 22.49)、白蛋白＜28g/L(HR=4.63,95％CI 1.12 ～7.39)、铁蛋白＞1 100 μg/L(HR =3.05,95％ CI 1.28 ～ 16.75)、甘油三酯≥4 mmol/L(HR=2.88,95％CI 1.51 ～8.60)、凝血酶原时间≥16s(HR=3.60,95％CI 1.28 ～7.24)和发热持续2周以上(HR =5.39,95％CI 1.97～14.66)是造成HPS患儿死亡的独立危险因子.决策树分析显示白细胞＜5×109/L合并血红蛋白＜80 g/L的情况下患儿死亡概率达100％;即使在白细胞≥5×109/L的情况下,若合并发热持续2周以上且总胆固醇≥4 mmol/L,死亡概率亦达66.7％.结论 发病后最初8周是治疗HPS的关键期,HPS患儿死亡与多种因素相关,合并白细胞＜5×109/L且血红蛋白＜80 g/L时,病情极其凶险,及早诊断并采取有针对性的治疗对降低HPS患儿病死率至关重要.     

从氧自由基、一氧化氮探讨四逆汤抗急性失血性休克的肝脏机制

目的:从氧自由基、一氧化氮探讨四逆汤抗急性失血性休克的肝脏机制。方法:复制急性失血性休克大鼠模型, 分为假手术对照组;单纯休克模型组;休克+生理盐水复苏组;休克+四逆注射液复苏组。四逆注射液(浓度1000g生药/L), 剂量0.1mL/200g大鼠。用生理盐水或四逆注射液治疗3h后处死动物并取组织。测定各组肝脏超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)水平, 一氧化氮(NO)水平。采用免疫组化染色法, 观察诱导型一氧化氮合酶(iNOS)在肝细胞中的变化特点。RT-PCR观测肝细胞iNOS和内皮源性一氧化氮合酶(eNOS)基因表达的变化。结果:模型组在休克1h后SOD活性明显低于对照组(P＜0.01)、MDA水平明显高于对照组(P＜0.01)。四逆汤组复苏3h后肝组织SOD明显高于生理盐水组(P＜0.01)、MDA低于生理盐水组(P＜0.01)、NO水平明显高于生理盐水组(P＜0.01)。生理盐水组iNOS在肝细胞中染色阳性单位明显高于四逆汤组(P＜0.05)。生理盐水组促进iNOSmRNA的表达。四逆汤组eNOSmRNA的表达增强。结论:四逆汤通过清除氧自由基, 升高NO, 改善肝组织微循环, 减少诱导型iNOS表达的各种因素, 理论上减轻了NO与氧自由基生成的ONOO的细胞毒作用和血管的低反应性, 并对肝脏起到保护作用。     

四逆汤缓释片毒理试验研究

四逆汤是张仲景所创名方,由附子、干姜和甘草组成。方中附子为有毒之品,实验探讨了附子提取物和四逆汤缓释片的急性毒性以及四逆汤缓释片的亚急性毒性。在此基础上,测定了急性和亚急性染毒时心肌和脑组织Na K ATP酶的活性。1　实验材料1 1　动物　普通级昆明种健康小鼠,(2 0±2 )g ,雌雄各半;健康SD大鼠,(15 0±2 0 )g ,雌雄各半,由中山大学中山医学院实验动物中心提供。1 2　药物　四逆汤各单味药购于中山大学附属一院药剂科。附子总生物碱提取物和四逆汤缓释片的制备按本课题组确定的制备工艺进行。1 3　试剂　Na K ATP酶活…     

幼年特发性关节炎患儿外周血CD4+CD25+调节性T细胞的表达

目的探讨幼年特发性关节炎(少关节型)(JIA)患儿外周血CD4 CD25 调节性T细胞的表达及其意义。方法采用免疫荧光抗体标记法及流式细胞仪对23例JIA患儿和26例健康儿童外周血CD4 CD25 、CD4 淋巴细胞亚群的细胞比率进行检测。结果JIA(少关节型)患儿外周血CD4 CD25 细胞的百分率显著低于正常对照组[(6.44±1.27)%比(8.23±1.33)%,P<0.05],且CD4 细胞的百分率明显低于正常对照组[(33.64±7.63)%比(46.79±5.02)%,P<0.05]。结论外周血CD4 CD25 细胞和CD4 细胞参与了JIA(少关节型)的发病。     

流式细胞术检测过敏性紫癜患儿外周血调节性T细胞的研究

目的了解过敏性紫癜（HSP）患儿外周血调节性T细胞数量的改变及其在过敏性紫癜患儿免疫功能紊乱中的调控作用。方法应用四色流式细胞术,对35例过敏性紫癜患儿和35例正常儿童的CD4^＋CD25^hi调节性T细胞、CD3^＋T淋巴细胞、CD3^＋CD4^＋辅助T细胞、CD3^＋CD8^＋抑制T细胞、CD19^＋B淋巴细胞、CD3^-CD16^＋ 56^＋NK细胞进行测定。结果HSP患儿外周血CD4^＋CD25^hi调节性T细胞、CD3^＋CD4^＋辅助T细胞、CD3-CD16^＋56＋NK细胞的百分率下降均明显低于对照组;CD19^＋B淋细胞的百分率则显著增高;而两组间CD3^＋T淋巴细胞、CD3^＋CD8^＋抑制T细胞的变化差异无统计学意义。结论HSP患儿体内存在细胞及体液免疫功能紊乱,CD4^＋CD25^＋调节性T细胞具有维持自身免疫耐受和调节免疫应答的功能,其数量下降可能是导致过敏性紫癜发病的重要原因之一。     

鼻病毒感染诱发儿童哮喘急性发作时血清粘附分子水平及意义

【目的】 了解鼻病毒(rhinovirus,RhV)感染诱发儿童哮喘急性发作时血清可溶性细胞间粘附分子-1(solube intercellular adhesion moleculet,sICAM-1)水平变化及意义。 【方法】 用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法对哮喘急性发作儿童呼吸道RhV检测,筛选出39例RhV阳性患儿(研究组),正常儿童31例(对照组),采用 ELx800酶标仪酶联免疫吸附试验法检测两组儿童的血清sICAM-1水平。 【结果】 研究组sICAM-1水平结果为(229.57±59.19) μg/mL, 对照组sICAM-1水平结果为(198.92±49.74) μg/mL,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。 【结论】 鼻病毒感染诱发儿童哮喘急性发作时血清粘附分子表达水平升高,可能是导致哮喘儿童气道炎症和气道高反应的重要炎症因子之一。     

手足口病患儿外周血淋巴细胞亚群的研究

目的检测手足口病患儿外周血淋巴细胞亚群,探讨其免疫功能变化与疾病的关系。方法采用四色荧光标记流式细胞术,检测31例手足口病患儿外周抗凝全血的淋巴细胞亚群:CD3+细胞、CD3+CD4+细胞、CD3+CD8+细胞、CD19+细胞、CD16+56+细胞的相对计数,并同时检测30例健康儿童作为对照组。结果手足口病患儿外周血CD3+细胞、CD3+CD4+细胞(Th)、CD3+CD8+细胞(Ts)以及CD16+56+细胞的百分率下降均明显低于对照组(P0.05);CD19+细胞的百分率则显著增高(P0.05);而两组间Th/Ts细胞比值的变化不存在明显差异(P0.05)。结论手足口病患儿体内存在细胞及体液免疫功能紊乱,病毒感染可能是引起机体免疫功能异常的关键。     

四逆汤抗阿霉素性心衰心肌细胞线粒体凋亡机制探讨

目的探讨四逆汤抗阿霉素（ADR）性心衰大鼠心肌细胞凋亡的作用及线粒体机制。方法SD大鼠随机分为对照组,心衰组和四逆汤组,心衰组和四逆汤组尾静脉注射ADR复制心衰模型,四逆汤组给予四逆汤煎剂灌胃（3．75g生药／kg/d）,实验结束时留取各组大鼠心肌组织,检测线粒体丙二醛（MDA）含量,MnSOD活性及其肿胀程度;Western blotting检测胞浆中细胞色素C（Cyt-C）、凋亡诱导因子（AIF）表达;比色法测定Caspase-3、Caspase-9蛋白酶的活性;流式细胞术测定心肌细胞凋亡情况。结果四逆汤组可以提高线粒体MnSOD的活性,减少MDA的含量及肿胀程度;有效抑制Cyt—C及AIF蛋白释放及Caspase-9和Caspase-3蛋白酶活性,减少凋亡的发生。结论线粒．体在阿霉素性心衰发病中可能占有重要作用,四逆汤可能是通过减轻线粒体氧化损伤,减少心肌细胞凋亡来保护心肌组织。