丙泊酚麻醉对老龄大鼠认知功能和海马神经元γ-氨基丁酸A受体表达的影响

目的观察丙泊酚麻醉对老龄大鼠认知功能及海马神经元γ-氨基丁酸A(GABA)受体表达的影响。方法50只SD老年大鼠随机分为丙泊酚组和对照组,每组25只。丙泊酚组大鼠腹腔注射1%丙泊酚中/长链脂肪乳注射液6 mL/kg,对照组腹腔注射等体积的生理盐水。麻醉后1 d进行Morris水迷宫实验,分别采用HE染色和尼氏体染色观察海马区神经细胞及尼氏体(Nissl体)形态学变化,Western Blot检测GABA蛋白量表达。结果麻醉后,2组大鼠肛温、心率、呼吸频率、血氧饱和度比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。随着实验时间的延长,2组大鼠逃逸潜伏期、总里程数逐渐减小,丙泊酚组大鼠各时间点逃逸潜伏期、总里程均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。丙泊酚组大鼠穿越平台区域次数、时间小于、短于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。对照组海马区Nissl体存在于细胞浆及树突,染色较深,神经细胞排列整齐,形态规则;丙泊酚组Nissl体消失,神经细胞数量减少,细胞核破裂、丢失。丙泊酚组大鼠海马GABA蛋白表达量低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论丙泊酚对大鼠认知功能有影响,并与海马区GABA的表达相关。     

祛黄Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ号片治疗黄疸型肝炎的临床研究

目的:研究祛黄Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ号片对黄疸型肝炎的临床治疗效果。方法:将186例黄疸型肝炎随机分为治疗组和对照组,治疗组按临床分型分别予祛黄Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ号片治疗,对照组予苦黄注射液进行治疗,并将治疗组与对照组的症状及肝功能(丙氨酸转氨酶及总胆红素)的恢复情况进行比较并行统计学处理。结果:治疗组的总有效率为90.2%,对照组总有效率为91.67%,两组比较无显著差异(P>0.05)。结论:祛黄Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ号片辨证的治疗黄疸型肝炎,疗效显著,价格便宜,服用方便,适于临床推广应用。     

老年患者肺癌根治术后谵妄的危险因素及列线图预测模型的建立

目的 探讨老年患者肺癌根治术后谵妄（POD）的危险因素,并在此基础上构建与验证预测POD发生风险的列线图模型。
方法 选择择期全麻下行肺癌根治术老年患者580例,男349例,女231例,年龄≥65岁,ASA Ⅰ—Ⅲ级。根据术后3 d内是否发生POD将患者分为两组：POD组与非POD组。通过Lasso回归筛选与POD发生相关的临床变量,并采用多因素Logistic回归分析确定独立危险因素,以此建立预测POD发生风险的列线图模型。分别通过C-index、校准曲线和受试者工作特征（ROC）曲线验证模型的区分度、一致性和准确性,并采用决策曲线分析（DCA）确定模型的临床实用性。
结果 有46例（7.93％）患者发生POD。多因素Logistic回归分析显示,年龄≥75岁、术前简易精神状态量表（MMSE）评分≤25分、术前预后营养指数（PNI）＜45、查尔森合并症指数（CCI）评分≥2分、鳞癌、术中低血压和手术时间≥3 h为POD的独立危险因素。以此构建的列线图模型经内部验证,该模型的C-index为0.864（95％CI 0.811～0.917）;校准曲线显示,该模型预测POD发生风险与实际POD发生风险平均绝对误差为0.038;ROC曲线显示,该模型预测POD发生风险的曲线下面积为0.866（95％CI 0.835～0.892）,敏感性86.96％,特异性73.78％;DCA分析显示该模型具有较好的临床实用性。
结论 年龄≥75岁、术前MMSE评分≤25分、PNI＜45、CCI评分≥2分、鳞癌、术中低血压和手术时间≥3 h是肺癌根治术老年患者POD的独立危险因素,依此构建的列线图模型对POD发生风险具有良好的预测效能。     

新的双重杂合性FV基因突变导致的重型遗传性FV缺陷症

目的对一个遗传性凝血因子V(FV)缺陷症家系进行FV基因突变的检测。方法用活化部分凝血活酶时间(Am)，凝血酶原时间(PT)及FV促凝活性(FV：C)和FV抗原(FV：Ag)测定进行表型诊断；用PCR法对先证者FV基因25个外显子及其侧翼序列进行扩增，PCR产物纯化后直接测序，检测其基因突变。突变位点经限制性内切酶分析证实：结果先证者APTT 249．2s．PT46．6s。TT17．9s，Fg3．42g/L，FV：C0．1％，FV：Ag 1．5％，FⅡ：C99％，FⅦ：C110％、FⅧ：C95％、FⅨ：C88％、FX：C120％、vWF121％；FV外显子区共发现4个与基因文库Z99572序列不同的位点，其中位于exon13区的杂合性2238～2239de1AG导致移码突变和终止密码子的提前m现(Asp689stop)，位于exon23区的杂合性G6410T错义突变导致Gly2079 Val.家系分析表明前者遗传于母亲，后者遗传于父亲。结论2238～2239delAG导致的移码突变和G6410T导致的错义突变．是导致先证者FV缺陷的原因。这是2个导致遗传性FV缺陷症的新的FV基冈突变位点。     

VEGFR-2/KDR三区的载体构建、表达及胃癌患者抗-KDR抗体的检测

目的扩增人血管内皮细胞生长因子受体-2／激酶插入受体（VEGFR-2／KDR）三区基因，构建表达载体，在大肠埃希菌中表达，获得纯化蛋白。检测胃癌术前患者外周血中抗-KDR抗体水平，为进一步研究KDR与抗-KDR抗体在胃癌中的作用奠定基础。方法从人血管内皮细胞株ECV304提取总RNA，逆转录后，聚合酶链反应（PCR）扩增KDR胞外段三区基因，连接到pMD18-T载体测序；酶切后将目的基因插入原核表达载体pET28α（＋）构建重组质粒，将重组质粒转化到大肠埃希菌DH5et内并提取质粒，经双酶切鉴定后，再转化入表达菌株BL21（DE3），异丙基-B-D硫化半乳糖苷（IPTG）诱导表达，用Ni^2＋-NTA树脂纯化、复性；用获得的蛋白包被酶联免疫吸附试验（ELISA）板，用ELISA检测32例胃癌患者和35名健康对照者外周血抗．KDR抗体水平。结果构建了表达载体pET28α（＋）-KDR3，并获得高效表达，表达的蛋白质相对分子质量为16000，重组蛋白以包涵体形式存在。胃癌患者外周血中抗-KDR抗体水平显著高于健康对照组（P〈0．01）。结论VEGFR-2／KDR三区基因成功克隆到表达质粒内并表达。为进一步研究KDR与抗-KDR抗体在胃癌中的作用奠定了基础，及可能为胃癌的血清学诊断提供新的方法。     

凝血因子Ⅺ基因内含子区受位剪切位点突变导致的遗传性凝血因子Ⅺ缺陷症

目的探讨一个遗传性凝血因子Ⅺ(FⅪ)缺陷症患者及其家系成员中FⅪ基因突变方法用自动凝血仪检测患者及其家系成员凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血酶原时间(APTT)，一期法检测血浆F Ⅺ、FⅤ、FⅦ、FⅧ、FⅨ、FⅫ活性；采用ELISA法检测血浆FⅪ：Ag。以外周血中抽提的基因组DNA为模板，PCR扩增FⅪ基因的所有外显子及其侧翼序列，用直接测序的方法查找突变以RT-PCR检测患者FⅪ mRNA的水平，分析突变对FⅪ mRNA剪切造成的影响。结果患者及部分家系成员APTT延长，先证者及其兄血浆FⅪ：C、FⅪ：Ag均低于正常人的10％，其父母血浆FⅪ：C、FⅪ：Ag均低于正常人的．50％。基因测序结果表明FⅪ基因内含子10 3’端4个碱基缺失(IVs J-4delgttg)，先证者及其兄为纯合突变，其父母及侄女、外甥均为杂合型。在患者外周血中未能检测到FFⅪ mRNA。结论该突变导致FⅪ mRNA不能正常剪切，引起FⅪ转录本质和量的改变，不能合成正常的F Ⅺ，是导致该遗传性F Ⅺ缺陷症家系成员发病的分子遗传学基础。     

Glu29→Gly纯合子突变导致的遗传性凝血酶原缺乏症

目的 对1个遗传性凝血酶原缺乏症家系进行凝血酶原(FⅡ)基因突变的检测。方法 用活化的部分凝血活酶时间（APTT)，凝血酶原时间(PT)及FⅡ促凝活性(FⅡ：C)、FⅡ抗原(FⅡ：Ag)测定进行表型诊断；用PCR法对先证的FⅡ基因14个外显子及其侧翼序列和5′端非翻译区(5′UTR)、3′端非翻译区(3′UTR)序列进行扩增，PCR产物纯化后直接测序，检测其基因突变。家系成员DNA在先证FⅡ基因突变区域扩增后测序。突变位点经限制性内切酶分析证实。103名健康献血作对照。结果 先证表型诊断为凝血酶原缺乏症(Ⅰ型)；FⅡ外显子区共发现3个与献报道的FⅡ基因序列不同的位点，其中位于第2外显子区的为纯合突变A601G。家系分析表明先证父亲、母亲和外祖母均为A601G杂合子。结论 纯合错义突变A601G引起的Glu29→Gly是导致该例遗传性凝血酶原缺乏的原因。     

血浆凝血因子ⅩⅢ抗原及活性的测定

目的　建立血浆F抗原及活性定量测定的方法。方法　对 4 6例正常人及两个遗传性F缺陷症家系部分成员采用双抗体夹心法检测F抗原 ,生物素化戊胺测定F活性 ,以F标准品建立标准曲线。结果　 3例患者FA :Ag均为 0 % ,FB :Ag分别为正常人的 78.4 6 %、6 6 .4 3%、5 7.2 9%。 4 6例正常人血浆F活性F∶C平均值为 86 .34%± 17.98% ,范围在5 6 .5 %～ 16 5 .17%之间 ,3例患者为 0 % ,家系中杂合子范围为 2 9.6 0 %～ 10 4 .86 %。结论　双抗体夹心法和生物素标记法均为简捷、灵敏而且特异的F测定方法。     

博宁及博宁联合化疗治疗骨转移引起疼痛的疗效观察

目的：观察博宁单独使用与博宁联合化疗对实体瘤骨转移引起疼痛的疗效。方法：对４４例实体瘤骨转移患者随机分为治疗组（博宁单独应用）与对照组（博宁联合化疗）静脉滴注博宁９０ｍｇ，２至４周重复，对照组于次日行常规方案化疗（２周期）。结果：治疗组１８例，显效８例，有效６例，无效４例，总有效率７７．８％（１４／１８），一周内取得疗效占５０％（９／１８），毒副反应２例占１１．１％（２／１８），对照组２６例，显效