丹芪散对气虚血瘀型冠心病患者血管内皮功能的影响及网络药理学机制预测

【目的】 观察丹芪散对气虚血瘀型冠心病患者的临床疗效及对血管内皮功能与血管僵硬度的影响。【方法】 将60例气虚血瘀型冠心病患者随机分为对照组和治疗组,每组各30例。对照组给予冠心病二级预防治疗,治疗组在对照组基础上配合丹芪散颗粒剂口服,治疗时间12周。观察2组患者治疗前后临床症状积分、血脂、踝肱指数（ABI）、肱踝脉搏波（PWV）、血清一氧化氮（NO）、内皮素1（ET-1）及不良反应的变化;再基于网络药理学的方法,对丹芪散改善气虚血瘀型冠心病患者血管内皮功能的作用进行理论论证。【结果】（1）治疗后,2组患者临床症状积分较治疗前均明显降低（P＜0.01）,且治疗组降低作用优于对照组（P＜0.01）。（2）治疗后,2组患者低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、胆固醇（TC）值较治疗前均明显降低（P＜ 0.01）,但2组间比较,差异无统计学意义（P > 0.05）。（3）经过3个月的干预后,治疗组ABI值较治疗前升高（P < 0.05）,而对照组ABI值虽有所升高,但与治疗前比较,差异无统计学意义（P > 0.05）。2组治疗后PWV值均下降（P < 0.05或P < 0.01）,且治疗组降低作用优于对照组（P < 0.01）。（4）治疗后,2组ET-1水平均较治疗前显著降低（P＜0.01）,且治疗组的降低作用优于对照组（P＜0.01）;治疗后,2组NO水平均较治疗前显著升高（P＜0.01）,且治疗组的升高作用优于对照组（P＜0.01）。（5） 2组不良反应发生率比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。（6）丹芪散可能通过影响流体剪切应力和动脉粥样硬化、细胞凋亡、p53信号通路、缺氧诱导因子1（HIF-1）信号通路、c型凝集素受体信号通路、ErbB信号通路、白细胞介素17（IL-17）信号通路和松弛素信号通路等多条通路改善冠心病患者的血管内皮功能。【结论】 丹芪散可以改善气虚血瘀型冠心病患者的临床症状,改善血管内皮功能及血管僵硬度,这可能是其起效的作用机制。     

保元活络方改善心肌缺血再灌注损伤的作用机制预测及验证

目的 探讨保元活络方改善心肌缺血再灌注损伤（myocardial ischemia-reperfusion injury，MIRI）的可能作用和机制。方法 从TCMSP数据库获取保元活络方（丹参、三七、山楂、黄芪和西洋参）的成分和作用靶点，从GeenCard、OMIM数据库获取MIRI靶点，交集获得保元活络方改善MIRI的可能靶点；使用Cytoscape软件构建保元活络方作用MIRI的"成分-靶点"网络，拓扑分析得出关键化合物；使用STRING数据库构建蛋白质-蛋白质相互作用（protein protein interaction，PPI）网络，并导入Cytoscape软件进行优化，聚类分析得出关键靶标；使用ClueGo插件对核心靶标进行GO功能分析和KEGG通路富集分析。缺氧复氧（hypoxia and reoxygenation，H/R）处理大鼠心肌细胞（H9C2）建立MIRI模型，初步验证保元活络方含药血清调控NF-κB通路从线粒体途径抑制H/R诱导的心肌细胞凋亡的作用机制。结果 共筛选得到槲皮素、山柰酚、异鼠李素等11个关键化合物，作用靶标51个；PPI网络聚类分析得到2个子网络，涉及CASP3、NOS3、IL-6、ICAM1等16个靶标；GO分析得到体外凋亡信号通路、对活性氧的反应、血管内皮细胞迁移等239个生物学功能；KEGG富集得到TNF信号通路、NF-κB信号通路、VEGF信号通路、PPAR信号通路等63条通路。细胞试验显示，H/R处理后，各组H9C2心肌细胞的细胞活力降低，细胞凋亡增加，caspase-3、caspase-9活性增强，NF-κB p65、caspase-3和caspase-9蛋白表达水平增加，IκBα、Bcl-2蛋白表达水平降低；而保元活络方含药血清干预可逆转H/R诱导的上述损伤。结论 保元活络方可以通过多成分-靶点-通路的途径，发挥抗炎、抗氧化应激、抗细胞凋亡和改善冠脉血管内皮功能等作用从而改善MIRI，其中调控NF-κB通路，从线粒体途径抑制H/R诱导的心肌细胞凋亡可能是其关键机制。     

探讨新型冠状病毒肺炎不同阶段的处方用药规律

目的:基于"因时制宜",探讨新型冠状病毒肺炎不同阶段的中医药防治规律,尤其是其中的处方用药规律。方法:检索并整理2020年2月17日前(含)国家及各省市政府以及各专家制定和发表的新型冠状病毒肺炎指南及建议,按照预防期、临床观察期、临床前期、临床中期、临床后期和恢复期分期录入,对处方中药及其功效、成方和中成药进行频数分析,再对处方中药进行因子分析和聚类分析以获取合理药物组合。结果:共纳入来自24个官方和24个专家的172条中药处方建议,50个成方建议和31个中成药建议,涉及147个中药,44个方剂和16个中成药;中药处方方面,无论是药物类别选择还是具体药物选择,不同阶段的用药规律均不相同;成方和成药方面,观察期可予藿香正气胶囊、疏风解毒胶囊、连花清瘟胶囊、金花清感胶囊,中期可予宣白承气汤加减,后期可辨证予安宫牛黄丸、苏合香丸或紫雪丹;另外,清肺排毒汤在各时期均可使用。结论:新型冠状病毒肺炎各阶段用药规律各有特色,临床需随疾病进展,及时变更处方。     

基于“动则生阳”理论探讨有氧运动对阳虚证慢性心力衰竭模型大鼠的作用和机制

【目的】 基于“动则生阳”中医理论，探究有氧运动（AE）对阳虚证慢性心力衰竭（CHF）模型大鼠的作用和机制。【方法】 采用腹主动脉缩窄术（AAC）建立CHF大鼠模型，AAC结合冷刺激（CS）法建立阳虚证CHF大鼠模型。将健康SD大鼠50只分为假手术组、安静组（Calm组）和运动组（AE组），其中Calm组包括心力衰竭安静组（AAC+Calm组）和阳虚心力衰竭安静组（AAC+CS+Calm 组），AE组包括心力衰竭运动组（AAC+AE 组）和阳虚心力衰竭运动组（AAC+CS+AE 组），分别对应处理。运动/安静干预8周后，使用中医阳虚证候积分表评估阳虚程度，应用超声、称质量和苏木素-伊红（HE）染色等方法评估心室重构和心功能水平，蛋白免疫印迹法检测心肌组织自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3B（LC3B）、p62、Beclin-1表达。【结果】 与假手术组比较，Calm组大鼠阳虚证候积分，左心室舒张末期厚度（LVEDd）、左心室收缩末期厚度（LVESd）、心脏质量/体质量比值（HW/BW）、左心室质量/体质量比值（LVW/BW），Beclin-1表达水平和LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ比值升高，左心室射血分数（EF）值和p62表达水平降低（均P＜0.01），HE染色结果显示心室重构，可见心肌细胞呈不同程度的排列紊乱，心肌肥大，细胞核肿胀；而与 AAC+Calm组比较，AAC+CS+Calm组大鼠的上述变化程度更明显（均P＜0.01）。与Calm组比较，AE组能明显拮抗上述变化（均P＜0.01）。【结论】 CHF大鼠的阳虚程度与其心室重构程度、心功能恶化程度密切相关，有氧运动能有效纠正CHF大鼠的阳虚状态，并拮抗CHF导致的心室重构和心功能恶化，其机制可能与调节心肌细胞自噬相关。     

基于网络药理学探究黄连生物碱干预原发性高血压的作用机制

目的:基于网络药理学探讨黄连生物碱对原发性高血压的作用机制。方法:采用TCMSP、PubChem、BATMAN数据库等,以口服生物利用度和类药性为限制条件筛选黄连化学成分;通过PubChem数据库筛选符合异喹啉型的生物碱化合物,通过Uniprot数据库获取黄连生物碱的作用靶点,构建黄连生物碱作用靶点的蛋白相互作用网络;基于GeneCards数据库筛选原发性高血压的相关靶点,利用Venny2.1工具绘制黄连生物碱作用靶点和高血压疾病靶点的韦恩图,通过生物信息学手段对黄连生物碱对高血压的作用靶点进行GO分析及KEGG分析。结果:富集通路分析KEGG通路有神经活性配体受体相互作用、cAMP信号通路、钙信号通路、间隙连接、HIF-1信号通路、cGMP-PKG信号通路、多巴胺能突触信号通路等。结论:黄连生物碱通过调节神经机制、离子浓度、抗氧化应激、抗炎等相关机制干预高血压。     

芪黄药对改善糖尿病肾病大鼠肾间质纤维化的作用及机制探讨

目的:观察芪黄药对对糖尿病肾病大鼠肾间质纤维化及炎症因子的影响,利用网络药理学技术探讨可能的机制,并进行验证.方法:30只Wistar大鼠随机选取10只作为对照组,予水和普通饲料喂养;其余大鼠予高糖高脂饲料喂养,并腹腔注射链脲佐菌素造模,造模成功后随机分为模型组、芪黄药对组,每组10只.药物干预30d,观察血糖水平变化.末次给药后监测24 h尿蛋白定量及肾功能,取肾脏组织检查进行免疫组化染色分析,并用网络药理学技术对可能靶点进行预测,应用ELISA对预测靶点进行验证.结果:芪黄药对可明显降低糖尿病肾病大鼠的血糖、肌酐、尿素氮和尿蛋白水平,并能明显改善肾间质纤维化.网络药理学预测芪黄药对可能通过槲皮素、山柰酚、异鼠李亭、芦荟大黄素、芒柄花黄素等有效成分,作用于IL-6、VEGFA、CASP3、MAPK8、EGFR等靶点,通过影响VEGF、MAPK等信号通路,发挥改善糖尿病肾病肾间质的炎症反应、细胞凋亡、氧化应激等生物学过程的作用,进而改善糖尿病肾病肾间质纤维化.ELISA验证了芪黄药对可下调VEGFA、MAPK的表达,明显降低了IL-1β、IL-6、IL-17水平.结论:芪黄药对可改善糖尿病肾病肾间质纤维化,作用机制轴可能是"多成分-靶点(VEGFA、MAPK)-袁型(炎症反应)-功能(肾间质纤维化)".     

当归芍药散加减联合三元气血针法治疗经前-经期痛经的疗效观察

【目的】 观察当归芍药散加减联合三元气血针法治疗经前-经期痛经的临床疗效。【方法】 将60例经前-经期痛经患者随机分为试验组和对照组，每组各30例。对照组给予布洛芬缓释胶囊口服治疗，试验组给予中药汤剂当归芍药散加减联合三元气血针法治疗，连续治疗3个月经周期。观察2组患者治疗前和治疗3个月经周期后视觉模拟量表（VAS）评分、COX痛经症状评价量表（CMSS）评分和健康状况调查量表（SF-36）评分的变化情况，并评价2组患者的临床疗效。【结果】（1）治疗3个月经周期后，试验组的总有效率为93.3%（28/30），对照组为70.0%（21/30），组间比较，试验组的疗效明显优于对照组（P＜0.05）。（2）治疗后，2组患者的VAS评分均较治疗前明显降低（P＜0.01），且试验组对VAS评分的降低作用明显优于对照组（P＜0.01）。（3）治疗后，2组患者CMSS的严重程度和持续时间评分均较治疗前明显降低，且试验组对CMSS的严重程度和持续时间评分的降低作用均明显优于对照组（P＜0.01）。（4）治疗后，2组患者SF-36的一般健康、精神健康、躯体疼痛、生理机能、生理职能、情感职能、社会功能和精力等8个维度评分均较治疗前明显改善（P＜0.01），且试验组对SF-36各维度评分的改善作用均明显优于对照组（P＜0.05）。【结论】 与单纯西药治疗相比，中药汤剂当归芍药散加减联合三元气血针法治疗经前-经期痛经临床效果更显著，能更大程度地降低疼痛评分、改善痛经相关症状和提高患者生活质量。     

基于“动则生阳”理论探讨有氧运动对阳虚证慢性心力衰竭模型大鼠的作用和机制

【目的】基于“动则生阳”中医理论,探究有氧运动(AE)对阳虚证慢性心力衰竭(CHF)模型大鼠的作用和机制。【方法】采用腹主动脉缩窄术(AAC)建立CHF大鼠模型,AAC结合冷刺激(CS)法建立阳虚证CHF大鼠模型。将健康SD大鼠50只分为假手术组、安静组(Calm组)和运动组(AE组),其中Calm组包括心力衰竭安静组(AAC+Calm组)和阳虚心力衰竭安静组(AAC+CS+Calm组),AE组包括心力衰竭运动组(AAC+AE组)和阳虚心力衰竭运动组(AAC+CS+AE组),分别对应处理。运动/安静干预8周后,使用中医阳虚证候积分表评估阳虚程度,应用超声、称质量和苏木素-伊红(HE)染色等方法评估心室重构和心功能水平,蛋白免疫印迹法检测心肌组织自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3B(LC3B)、p62、Beclin-1表达。【结果】与假手术组比较,Calm组大鼠阳虚证候积分,左心室舒张末期厚度(LVEDd)、左心室收缩末期厚度(LVESd)、心脏质量/体质量比值(HW/BW)、左心室质量/体质量比值(LVW/BW),Beclin-1表达水平和LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ比值升高,左心室射血分数(EF)值和p62表达水平降低(均P<0.01),HE染色结果显示心室重构,可见心肌细胞呈不同程度的排列紊乱,心肌肥大,细胞核肿胀;而与AAC+Calm组比较,AAC+CS+Calm组大鼠的上述变化程度更明显(均P<0.01)。与Calm组比较,AE组能明显拮抗上述变化(均P<0.01)。【结论】CHF大鼠的阳虚程度与其心室重构程度、心功能恶化程度密切相关,有氧运动能有效纠正CHF大鼠的阳虚状态,并拮抗CHF导致的心室重构和心功能恶化,其机制可能与调节心肌细胞自噬相关。     

基于数据挖掘探讨疫病学说对儿童新型冠状病毒性肺炎的用药启发

本研究通过中医传承辅助平台(V2.5)探讨疫病学说对儿童新型冠状病毒性肺炎的用药启发。收集《温病大成(第一部)》中关于治疗小儿时疫的处方,筛选出适用于现在治疗小儿时疫的完整处方58个,将处方录入中医传承辅助平台(V2.5),运用其集成规则分析、改进的互信息法、复杂系统熵聚类、无监督的熵层次聚类分析等功能总结明清医家治疗小儿时疫的理论依据和用药规律。根据统计分析结果得出明清医家治疗小儿时疫的药物频次和药物间关联规则,最终获得核心药物组合16个,提取新方8个。结果表明,儿童新型冠状病毒性肺炎,内因其体稚阳,正气娇弱;外因疫气秽浊,袭人尤甚,触而发之。治疗上,应以固护脾土为前提,攻补兼施;若疫气在表、胃气未败治宜清肺热兼芳香化浊,若疫病已传、损伤阳明则应清热养阴、因势利导。