自身免疫性卵巢功能损伤与ＴＨ１／ＴＨ２型细胞因子表达关系的研究

目的：探讨ＴＨ１／ＴＨ２型细胞因子的表达与自身免疫性卵巢功能损伤机理关系。方法：分别用猪卵巢透明带（ＰＺＲ）、猪卵透明带单克隆抗体靶抗原（１７Ｄ３mAb-ZP)和ＰＺＰ的抗独特型抗体（Ａb2）免疫小鼠,并测定各免疫组ＩＬ－２,ＩＬ－４水平,观察卵巢组织形态学改变,结果：Ab2免疫组主要介导ＴＨ２型免疫应答,而ＰＺＰ和１７Ｄ３mAb-ZP免疫组主要介导ＴＨ１型免疫应答,ＰＺＰ和１７Ｄ３mＡb-ＺＰ免疫组对卵巢组织形态的影响较明显。结论：自身免疫性卵巢功能损伤与ＴＨ型免疫应答有关。     

真核细胞表达质粒pCMV4增强hCGβ-C3d3DNA疫苗的表达效率和免疫效力

目的：比较以pCMV4和pcDNA3为载体的hCGβ-C3d3DNA疫苗的表达效率和免疫效力。方法：分别构建pcDNA3-hCGβ-C3d3、pCaMV4-hCGβ-C3d3真核细胞表达质粒，并转染真核细胞瞬时表达系统COS-7细胞，以分析体外表达效率。抽提与纯化pcDNA3、pcDNA3-hCGβ-C3d3、pCMV4-hCGβ-C3d3质粒。对6周龄BLAB／C小鼠行DNA免疫。于末次免疫后6周采血，用间接ELISA分析实验动物外周血抗hCGβ抗体效价。结果：对COS-7体外表达效率分析，由pCMV4介导的hCGβ-C3d3表达效率明显高于pcDNA3。动物DNA免疫结果，pCMV4-hCGβ-C3d3刺激动物机体产生的免疫应答强度及免疫效果显著高于pcDNA3-hCGβ-C3d3。结论：pCMV4真核表达质粒hCGβ-C3d3体外表达效率及动物DNA免疫效力均显著高于pcDNA3真核表达质粒。     

抗子宫内膜抗体、IL-4、IFN-γ在子宫内膜异位症患者局部及外周的变化

目的　探讨子宫内膜异位症病人体内免疫学改变。方法　对１８例正常生育期的妇女及３４例各期内膜异位症的患者分别检测其血清及腹腔液中抗子宫内膜抗体、ＩＬ４、ＩＦＮγ的水平。结果　血清中内异症组与对照组比较抗子宫内膜抗体阳性率有显著性差异（Ｐ＜０．００５）;ＩＬ４水平在腹腔液中内异症各期与对照组比较及内异症Ⅰ期与Ⅱ期以上组间比较均有显著性差异（Ｐ＜０．０５,Ｐ＜０．０５,Ｐ＜０．０５）。血清中ＩＬ４水平在内异症Ⅱ期以上组与对照组相比有显著性差异（Ｐ＜０．０５）。ＩＦＮγ在腹腔液中内异症各期组与对照组比较均有显著性差异（Ｐ＜０．０５,Ｐ＜０．０１）。结论　子宫内膜异位症腹腔液中ＩＬ４、ＩＦＮγ变化较血清中明显。随着内异症期别的增加,腹腔液ＩＬ４、ＩＦＮγ均有上升的趋势,尤以ＩＬ４升高更为明显。子宫内膜异位症血清中抗子宫内膜抗体的变化较腹腔液中明显。     

分子佐剂C3d增强hCGβ基因免疫体液免疫效应

目的：该实验室前期工作已成功构建真核表达质粒pcDNA3-hCGβ、pcDNA3-hCGβ-C3d3且证明其能在真核表达系统中有效表达。通过动物DNA免疫，以期证实分子佐剂C3d增强免疫避孕疫苗免疫原性。方法：抽提与纯化pcDNA3、pcDNA3-hCGβ、pcDNA3-hCGβ-C3d3质粒，进行动物DNA免疫。免疫剂量分别为5、10、20pmol，共免疫2次，每次间隔3周。末次免疫后6周采血，用间接ELISA分析实验动物外周血抗hCGβ抗体效价。结果：C3d分子佐剂能明显提高抗hCGβ抗体滴度；且其作用呈剂量依赖性。结论：分子佐剂确实能增强hCGβ免疫原性；此结果将有助于免疫避孕疫苗的技术进步及实际应用。     

实验性自身免疫性卵巢炎卵巢功能早衰的机理研究

目的：探讨卵透明带免疫对卵巢功能的损伤及作用机理。方法：分别以猪卵透明带抗原和缓冲液通过皮内及两后脚掌多点注射免疫Ｂａｌｂ／ｃ小鼠，每２ｗ免疫１次，连续免疫３次。经３次免疫后，测定外周血雌二醇浓度和血清抗卵透明带抗体滴度，观察卵巢组织病理形态学及免疫组化，分析ＩＬ－１，ＥＧＦ在卵巢中的表达。结果：免疫小鼠外周血抗ＳＰ抗体滴度明显高于对照组，而雌二醇浓度则明显低于对照组，且二者存在显著负相关。     

补肾活血方对小鼠实验性卵巢早衰防治作用的研究

目的：探讨补肾活血中药复方对实验性的免疫性卵巢早衰（POF）的防治作用。方法：以免疫层析分离的猪卵透明带皮下和两后脚掌多点注射免疫8－10周龄雌性BALB／c小鼠建立POF的动物模型。分别在免疫早期或3次免疫后连续灌服中药复方，分析灌服中药后阴道脱落细胞涂片，外周血雌二醇（E2）浓蔗和血清抗透明带（ZP）抗体水平变化，及受试动物脾淋巴细胞对不同浓度ZP刺激的反应和卵巢滤泡和黄体数改变。结果：预防组和治疗组小鼠体内血清E2匀比免疫组高（P＜0.01,P<0.05），而抗ZP抗体则明显下降。卵巢组织形态学分析显示，治疗组和预防组生长滤泡和黄体数均比免疫组明显增加（P＜0.05,P<0.01）。免疫组脾淋巴细胞呈现抗原特异性的增殖反应，明显高于对照组，而治疗组脾淋巴细胞对抗原的特异性反应降低。结论：补肾活血中药复方主要通过抑制特异性免疫损伤，使卵巢内残存的少数滤泡能得以复苏，恢复部分卵巢功能，而且中药的预防效果优于效果。     

高效液相色谱法测定替诺福韦艾拉酚胺中的对映异构体

目的 建立高效液相色谱法测定替诺福韦艾拉酚胺中的对映异构体。方法 用直链淀粉-三(3,5-二甲基苯基氨基甲酸酯)键合硅胶为填充剂(CHIRAL PAK AD-H,4.6 mm×250 mm, 5μm或效能相当的色谱柱);以无水乙醇-甲醇-正庚烷-三乙胺(350∶50∶600∶1)为流动相等度洗脱；检测波长为260 nm;流速为0.4 mL·min^-1;柱温：30℃。结果 主成分峰与对映异构体峰的分离度均不小于1.5,对映异构体平均回收率为98.6%。结论 该方法专属性强、灵敏度高、准确度和重复性好，方法简单、经济，可用于替诺福韦艾拉酚胺对映异构体的检查。