通脉宁调控AngⅡ、LPC诱导血管平滑肌细胞c-fos、c-myc基因表达的研究

目的观察通脉宁胶囊对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、溶血磷脂酰胆碱(LPC)诱导的兔血管平滑肌细胞(VSMC)c-fos、c-myc癌基因表达的影响。方法组织贴块法培养兔主动脉平滑肌细胞,用AngⅡ、LPC诱导VSMC增殖,采用RT-PCR方法,观察通脉宁全方及益气拆方和活血拆方药物血清对AngⅡ、LPC诱导的VSMC c-fos、c-myc蛋白表达。结果AngⅡ、LPC组c-fos和c-myc蛋白表达增加,与空白组比较有显著性差异(P<0.01);通脉宁全方组、益气拆方组、活血拆方组均可使c-fos和c-myc的蛋白表达下调,与AngⅡ、LPC组比较有显著性差异(P<0.01);通脉宁全方组与益气拆方组、活血拆方组比较也有显著性差异(P<0.01)。结论通脉宁胶囊可下调AngⅡ、LPC诱导的VSMC c-fos、c-myc基因表达,而对VSMC增殖起到抑制作用。     

经穴注射骨髓间充质干细胞对后肢缺血大鼠血流的影响

目的:探讨骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BM-MSCs)移植治疗大鼠后肢动脉缺血的最佳移植方法.方法:SD大鼠24只,随机分为4组:空白对照组、模型组、经穴注射BM-MSCs治疗组(简称穴注组)、肌肉注射BM-MSCs治疗组(简称肌注组).穴注组取"三阴交""后三里""照海""环跳""阳陵泉"穴,肌注组在缺血后肢腓肠肌、内收肌任取5个非穴位点,两组均注射BM-MSCs.采用离断股动脉及其分支的方法制造大鼠后肢缺血模型.采用激光多普勒血流仪连续监测大鼠后肢患、健侧血流量(perfuse unit,PU),并用PU指数(患侧PU值/健侧PU值,PUI)表示血流量的增加值.检测血管内皮生长因子(VEGF)和碱性纤维母细胞生长因子(bFGF)的含量,免疫组织化学半定量分析VEGF和bFGF的表达量.结果:与模型组、肌注组相比,穴注组PUI在干细胞注射后第3天、14天、21天显著升高(P＜0.05,P＜0.01).与模型组相比,穴注组和肌注组的血清VEGF、bFGF及免疫组织化学VEGF、bFGF的表达量显著升高(均P＜0.01).结论:经穴注射BM-MSCs后,大鼠缺血后肢血流灌注恢复速度快,与肌肉注射的方法相比,能显著改善缺血大鼠后肢的血流量.     

通脉宁对AngⅡ及LPC诱导的血管平滑肌细胞内钙超载的影响

目的观察通脉宁全方及拆方药物血清对AngⅡ及LPC诱导的血管平滑肌细胞内钙超载的影响.方法组织贴块法进行血管平滑肌细胞(VSMC)培养,应用血清药理学研究的方法,AngⅡ 10-6mol/L、LPC 10-8mol/L作为刺激因子,制备通脉宁全方、益气拆方、活血拆方药物血清.采用Fluo-3染色荧光探针标记测定钙离子荧光强度.结果通脉宁全方及拆方药物血清对AngⅡ及LPC诱导的VSMC内钙超载具有明显的干预作用,且通脉宁全方组的干预作用明显优于益气拆方组及活血拆方组.结论通脉宁药物血清抑制AngⅡ及LPC诱导的VSMC增殖与部分阻断AngⅡ及LPC细胞内的信号转导途径有关,这可能是通脉宁抑制VSMC增殖的作用途径之一.     

中医病证相符的糖尿病慢性皮肤溃疡大鼠造模方法初探

目的 观察不同造模方法致糖尿病大鼠慢性皮肤溃疡创面形态及愈合时间的影响。方法 50只SD大鼠随机分为5组：皮肤缺损组（QS组：剪皮）,糖尿病组（DM组：STZ+剪皮）,糖尿病加金黄色葡萄球菌组（DMJJ组：STZ+剪皮+金葡菌）,糖尿病加激素组（DMJS组：STZ+剪皮+激素注射）,糖尿病加激素加异物组（DMYW组：STZ+剪皮+激素注射+异物埋置）。糖尿病模型稳定后每周测量血糖1次,每日称量体重、观察疮面情况、测量创面面积。12 d后处死,石蜡包埋肉芽组织观察其组织病理形态。结果 DMJJ组前5d愈合速度快于其余组（P<0.01）;DMYW组的愈合时间延长,DMYW组愈合率显著偏低,与其余组比较有统计学意义（P<0.01）。造模12 d其余组愈合率无统计学差异,DMYW组愈合率显著低于其余组（P<0.01）。结论 注射激素大鼠表现出中医“阴证”证型特点,糖尿病加激素注射加异物埋置复合因素造模法能使大鼠创面表现出与临床相似的“阴证”证型特点。     

前方牵引矫治恒牙早期安氏Ⅲ类错[牙合]畸形的临床分析

目的总结前方牵引矫治器矫治恒牙早期安氏Ⅲ类错[牙合]畸形的临床应用效果。方法选择正畸门诊14例恒牙早期安氏Ⅲ类错[牙合]畸形要求矫治的患者,使用前方牵引器进行矫治。分别拍摄术前、术后头颅定位侧位片,进行X线头影测量分析。结果14例患者均经6—9个月（平均7．8个月）的前方牵引矫治治疗。Ⅲ类错[牙合]畸形纠正,A点前移,上、下颌骨间不调改正,侧貌改善明显。结论恒牙早期安氏Ⅲ类错[牙合]畸形应用前方牵引可促进上颌发育、前移,抑制下颌向前方生长,能有效改善患者侧貌外形。     

摆型矫治器的临床应用

目的观察摆型矫治器的临床应用效果。方法用摆型矫治器对15例安氏Ⅱ类错[牙合]畸形患者进行远移磨牙矫正治疗,治疗前后进行模型测量及X线头影测量分析。结果15例安氏Ⅱ类错[牙合]畸形患者经4—6个月戴用摆型矫治器,每侧磨牙平均远移5．15mm,最大8．50mm,最小3．30mml,取得了满意的效果。结论摆型矫治器是一种制作简便、经济有效和患者依赖少的远移磨牙的矫治装置,方便可靠。     

舒脉胶囊对血管紧张素Ⅱ诱导的血管平滑肌细胞迁移的影响

目的 观察舒脉胶囊及其拆方药物血清对血管紧张素Ⅱ(angiotensin Ⅱ,AngⅡ)诱导的血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMC)迁移的影响.方法 采用组织贴块法进行VSMC培养,AngⅡ 10-7 mol/L作为刺激因子,将药物血清分为舒脉胶囊全方组、活血化瘀拆方组和补脾益肾拆方组,测微尺测量细胞迁移的距离,免疫组织化学法测量基质金属蛋白酶-2(metalloproteinase-2,MMP-2)的表达情况.结果 与AngⅡ组比较,舒脉胶囊全方组、活血化瘀拆方组细胞迁移距离显著减小(P<0.01),MMP-2表达减少(P<0.01),其中舒脉胶囊全方组细胞迁移距离显著小于活血化瘀拆方组(P<0.01).结论 舒脉胶囊通过抑制MMP-2的表达而抑制VSMC迁移,全方作用优于拆方.     

朱红膏对破损皮肤模型大鼠汞蓄积及肾组织形态的影响

目的:通过对破损皮肤模型大鼠连续给予朱红膏4周和停药4周各相关指标的检测,探讨其对汞蓄积和肾组织形态的影响,为临床安全用药提供科学依据。方法:将大鼠随机分成4组:破损皮肤对照组、朱红膏低、中、高剂量组。于连续给药4周和停药4周后,分别测定尿汞、血汞、肾汞、β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶(NAG)、β2-微球蛋白(β2-MG)、血清尿素氮(BUN)、肌酐(SCr)、尿蛋白(PRO)和尿液pH,计算肾脏系数,进行肾脏组织形态学观察。结果:连续给药4周,3个剂量组大鼠尿汞、血汞和肾汞含量与对照组比较显著升高(P<0.01),且存在量毒关系。停药4周,3个剂量组大鼠尿汞和血汞含量均恢复正常,肾汞含量仍明显升高(P<0.01)。高剂量组大鼠NAG显著升高。停药4周,不同剂量组与对照组比较没有差异。结论:对破损皮肤大鼠长期大剂量使用朱红膏会出现汞蓄积,有可能造成肾组织损伤,临床使用朱红膏应积极监测患者体内的汞含量和肾功能指标。     

通脉宁胶囊对LPC诱导的血管平滑肌细胞增殖及钙超载的影响

通脉宁胶囊是陈淑长教授多年来应用于临床治疗周围血管疾病血瘀证的有效方药，具有益气活血、通络止痛的作用。由黄芪、党参、丹参、当归、赤芍等组成。本实验室前期采用兔颈动脉球囊损伤模型研究通脉宁胶囊对PTA术后RS的预防作用，结果显示通脉宁可明显降低内膜及中膜厚度，减少管壁胶原，使管壁血管内皮生长因     

回阳生肌膏及其拆方对糖尿病慢性皮肤溃疡大鼠血清白细胞介素-1α和血栓素B_2含量的影响

目的观察回阳生肌膏及其拆方对糖尿病慢性皮肤溃疡大鼠白细胞介素-1α(IL-1α)和血栓素B2(TXB2)含量的影响,探讨其促进糖尿病慢性皮肤溃疡愈合的作用机制。方法 160只大鼠随机抽取6只作为空白组,不做任何处理,其余大鼠制备糖尿病模型,2周后随机分为1、3、5、7、14 d处理组,各处理组再分为正常组、模型组、回阳生肌膏组(全方组)、温阳益气拆方组(益气组)、活血生肌拆方组(活血组)。正常组及模型组给予凡士林纱条,全方组、益气组及活血组给予相应药物纱条。正常组采用皮肤缺损法,其他组采用复合因素制备慢性皮肤溃疡模型。在相应给药时间点处死各组大鼠,酶联免疫法检测各时点大鼠血清中IL-1α和TXB2的含量。结果 IL-1α含量:给药3 d益气组显著高于空白组、模型组、全方组和活血组(P0.05);给药5 d,全方组显著高于空白组和模型组(P0.05);给药7 d,各给药组显著高于空白组和模型组(P0.05),全方组高于益气组、活血组(P0.05);给药14 d,模型组和活血组低于空白组(P0.05)。TXB2含量:给药3 d,正常组和全方组高于空白组(P0.05);给药5 d,全方组高于空白组和正常组(P0.05);给药7 d,益气组高于空白组、模型组、全方组和活血组(P0.05);给药14 d,活血组高于空白组、模型组、全方组和益气组(P0.05),空白组和正常组低于其他各给药组(P0.05)。结论回阳生肌膏及其拆方均能促进炎症反应,刺激炎症因子分泌,益气温阳药对创面的促炎作用早期更为明显。