儿茶素对拟衰老大鼠耳蜗氧自由基生成的影响

【目的】观察儿茶素对衰老大鼠动物模型耳蜗氧自由基生成的影响,初步探讨儿茶素对听觉老化的保护效应及其机制。【方法】通过腹腔注射D-半乳糖（D-gal）建立大鼠衰老动物模型,以腹腔注射生理盐水为阴性对照组,检测其听觉脑干诱发电位（ABR）明确衰老动物听力减退情况,检测大鼠耳蜗组织丙二醛（MDA）含量和超氧化物歧化酶（SOD）活性;并观察胃内灌注儿茶素后衰老动物模型上述指标的变化。【结果】衰老模型组大鼠与对照组大鼠相比较,ABR阈值增高,耳蜗组织中MDA含量明显增高,SOD活性明显降低（P〈0.05）;儿茶素保护组大鼠耳蜗组织中MDA含量和SOD活性水平较对照组无变化（P〉0.05）,而与衰老模型组相比却逆转上述指标变化,并能提高听力（P〈0.05）。【结论】氧自由基及其引发的脂质过氧化反应参与了听觉老化过程,儿茶素可能通过提高SOD活性、减少MDA生成发挥清除自由基抗氧化作用,从而改善听觉功能。     

鼻咽癌成纤维细胞分泌性蛋白质的变化分析

目的 建立细胞分泌性蛋白质组学研究方法,分析鼻咽癌形成过程中成纤维细胞分泌蛋白的变化特征.方法 分别收集5份鼻咽癌和正常鼻咽组织标本,无血清培养成纤维细胞,收集细胞上清液,超滤法脱盐并浓缩上清液中分泌性蛋白,运用双向凝胶电泳(2-DE)技术建立分泌性蛋白表达图谱;并用比较蛋白质组学方法分析2组成纤维细胞分泌蛋白的差异,基质辅助激光解析飞行时间质谱分析鉴定差异蛋白;ELISA分析2组细胞上清液中半乳糖凝集素1的表达.结果 用自建细胞分泌性蛋白2-DE图谱,从2组细胞上清液中筛查出表达差异大于2倍的蛋白质点18个,质谱分析鉴定出11个分泌性蛋白;其中半胱氨酸蛋白酶抑制剂C、补体组分Cls前体、不均一性核糖核蛋白Al在鼻咽癌间质成纤维细胞(CAFs)上清液中表达下调,而其余8个包括半乳糖凝集素1、14-3-3sigma蛋白、组织蛋白酶L等分泌性蛋白在CAFs上清液中表达上调;2组细胞上清液中半乳糖凝集索1分别为(4.95±0.76)ng/ml、(9.90±0.36)ng//ml(CAFs组),二者差异有统计学意义(P＜0.05).结论 鼻咽癌形成过程中成纤维细胞分泌性蛋白的变化涉及细胞信号转导、蛋白合成与降解等途径,CAFs可能通过上述途径调控肿瘤微环境,影响鼻咽癌的发生、发展、侵袭转移;这为今后分泌组学研究奠定了实验基础.     

骨髓增生异常综合征合并自身免疫病的WPSS分析

目的 探讨骨髓增生异常综合征(myelodysplastic syndrome,MDS)合并自身免疫病(autoimmune disease)患者的WPSS积分与临床特点及预后的关系.方法 对该院收治的23例合并自身免疫病的MDS患者进行临床回顾性分析和随诊观察,并与同时期收治的52例不合并自身免疫病的普通MDS患者进行比较,分析其临床特点、WPSS积分及预后差异.结果 合并自身免疫病的MDS患者与普通MDS患者比较,两组患者中转化为白血病者的比率无显著性差异,但合并自身免疫病MDS患者的生存时间较短.WPSS分析提示,合并自身免疫病的MDS患者中,低危和极低危患者比例较低,而高危和极高危患者比例较高.如WPSS评分相同.合并自身免疫病的MDS患者与普通MDS患者的生存时间无显著性差异.结论 合并自身免疫病MDS患者的生存时间较普通MDS患者短,其原因可能是合并自身免疫病MDS患者中,高危和极高危患者比例较高,而低危和极低危患者比例较低.合并自身免疫病的MDS具有高度异质性,WPSS是判断其预后的良好指标.     

细胞移植及其在耳蜗疾病中的应用

本文综述了近年来体细胞移植技术在心脏、中枢神经系统、内分泌系统、肝脏疾病中应用,阐述了内耳体细胞移植技术的可行性与存在的问题,提出了细胞移植技术对耳聋防治可能具有广阔的应用前景.     

脑源性神经营养因子和神经生长因子对顺铂诱导的内耳毒性的保护作用

目的研究豚鼠耳蜗内脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)和神经生长因子(nerve growthfactor,NGF)在顺铂致耳中毒后的表达,并探讨其对内耳的保护作用。方法将豚鼠分成对照组、顺铂组,分别给生理盐水、顺铂腹腔注射,于注射后3、5、7天取豚鼠耳蜗行石蜡切片,进行BDNF和NGF免疫组织化学染色,观察螺旋神经节BDNF和NGF蛋白表达。结果对照组耳蜗螺旋神经节细胞中BDNF几乎不表达,NGF呈中度阳性表达。顺铂组BDNF在3天时达到高峰,以后减弱;NGF在5天时达到高峰,以后减弱。结论正常豚鼠耳蜗有中度NGF的表达,表明NGF可能对内耳的正常生理功能起重要作用。顺铂干预后螺旋神经节BDNF和NGF出现高表达,提示BDNF和NGF对顺铂诱导的螺旋神经元损伤有保护作用。     

显微喉镜下Nd:YAG激光治疗喉狭窄18例

目的 :将 Nd:YAG激光同手术显微镜结合 ,在支撑喉镜下开展 YAG激光喉显微外科手术 ,探讨该手术治疗喉狭窄的方法及其疗效。方法 :对应用显微喉镜激光手术治疗的 1 8例喉狭窄病人临床资料进行回顾性分析。结果 :本组 1 8例 ,1次激光术后可拔管 1 0例 ,2次激光术后拔管 5例 ;所有病例随访 6～ 1 3个月 ,1 2例效果满意 ,均已拔管 ,未再次行气管切开术。结论 :根据喉狭窄的具体情况 ,选择显微喉镜激光手术 ,可显著提高疗效 ,值得临床推广使用     

鸟氨酸脱羧酶和谷氨酸脱羧酶65在鼻腔鼻窦良恶性病变中的表达及意义

 目的 研究鼻腔鼻窦腺癌、癌旁组织、鼻内翻性乳头状瘤和慢性鼻窦炎鼻息肉中鸟氨酸脱羧酶(ODC)和谷氨酸脱羧酶65(GAD65)的表达水平及其临床病理意义。 方法 67例鼻腔鼻窦腺癌及癌旁组织、48例鼻内翻性乳头状瘤和35例慢性鼻窦炎鼻息肉常规制作石蜡包埋切片，ODC和GAD65染色方法为EnVision免疫组织化学法。 结果 鼻腔鼻窦腺癌ODC和GAD65表达阳性率（73.1%，61.2%）明显高于癌旁组织（28.4%，χ²=17.26，P<0.01；20.9%，χ²=13.28，P<0.01）、鼻内翻性乳头状瘤（20.8%，χ²=8.66，P<0.01；27.1%，χ²=5.10，P<0.05）和慢性鼻窦炎鼻息肉（11.4%，χ²=28.28，P<0.01； 7.1%，χ²=14.98，P<0.01）。鼻腔鼻窦高分化腺癌，未侵犯鼻腔和鼻窦外周组织及淋巴结未转移病例（临床分型T2N0M0）ODC和GAD65表达阳性率明显低于鼻腔鼻窦中分化和低分化腺癌，侵犯鼻腔和鼻窦外周围组织及淋巴结有转移病例(临床分型T3N0M0、T4N1M0）（P<0.01）。 结论 ODC和GAD65酶活性改变可能是反映鼻腔鼻窦腺癌发生、进展、生物学行为及预后的重要酶学指标。     

一个遗传性出血性毛细血管扩张症家系的临床和基因诊断

目的：探讨一个遗传性出血性毛细血管扩张症(hereditary hemorrhagic telangiectasia,HHT)家系的临床特征 及基因诊断的可行性。方法：收集先证者及家系成员的病史资料并进行临床诊断。同时,对先证者进行致病基因突 变检测;鉴定出可能致病性变异后,对家系成员进行特定致病基因突变检测及基因诊断。结果：该家系中4代有5例 个体以鼻衄为突出临床表现。先证者临床诊断为HHT;2例在世家系成员为临床疑诊个体。ENG(endoglin)基因5'非编 码区c.1-127C>T突变见于先证者和2例临床疑诊个体,未见于其他家系成员;综合临床与基因突变分析2例临床疑诊个 体确诊为HHT。结论：HHT临床表现个体差异大,ENG基因c.1-127C>T突变是此HHT家系的可能致病性变异。临床 与基因诊断相结合可提高HHT的诊治水平。     

鼻内镜术后布地奈德对术腔恢复及术腔黏膜修复过程的影响

目的探讨慢性鼻窦炎、鼻息肉鼻内镜术后局部应用布地奈德术腔黏膜阶段性修复的特点及规律,为鼻内镜术后处理措施提供依据。方法对62例慢性鼻窦炎、鼻息肉患者行鼻内镜术,术后1~4周清理鼻腔及局部应用激素布地奈德1周,鼻内镜检同时取筛窦外侧壁、筛窦顶及上颌窦口处囊泡或黏膜组织,分别进行光、电镜观察对比。结果局部应用布地奈德1周,鼻内镜检术腔黏膜光滑,水肿基本消失,无囊泡形成。电镜下上皮为假复层纤毛柱状上皮,纤毛排列尚整齐,其间有微绒毛。28例纤毛横断而可见9+2型微管结构,24例为9+1型微管结构,10例中心微管缺如。上皮细胞高尔基复合体发达,内质网轻度扩张,线粒体部分呈凝集变性,有的线粒体为Ⅰ度肿胀,溶酶体基本正常。结论局部应用布地奈德能有效切断这种失衡修复的上皮化组织-囊泡的过程,继而遏制病变复发,使术腔上皮化呈均衡状态恢复。     

脑源性神经营养因子基因修饰骨髓基质细胞对体外培养小鼠螺旋神经元的影响

目的探讨人脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)基因工程细胞的建立及其对体外培养的小鼠螺旋神经元生长活性的影响。方法参照分子克隆技术成功构建BDNF真核表达载体———pcD-NA3.1(-)-BDNF,体外证实BDNF基因转染猿猴病毒40肝脏转化细胞(COS7)后正常表达,将骨髓基质细胞分离培养,体外转染骨髓基质细胞建立BDNF基因工程细胞,观察该基因工程细胞对体外培养小鼠螺旋神经元的生长活性的影响。结果成功构建BDNF基因真核表达载体,并且建立了BDNF基因工程细胞;在体外BDNF基因工程细胞能促进螺旋神经元的生长,并保护螺旋神经元免受氧化损伤。结论建立的BDNF基因修饰的骨髓基质细胞,对体外螺旋神经元生长、生存起着重要的保护作用,为进一步研究基因修饰的骨髓基质细胞内耳移植奠定了重要的基础。