分化抑制蛋白-1在套细胞淋巴瘤中的表达及预后关系

目的 探讨分化抑制蛋白-1(Inhibitor of differentiation-1,Id1)在套细胞淋巴瘤患者中的表达情况及其临床意义.方法 采用SP免疫组化法检测并分析45例套细胞淋巴瘤和20例淋巴结反应性增生淋巴结组织中Id1表达水平,以及Id1的表达与其临床预后指标的关系.结果 Id1在套细胞淋巴瘤和淋巴结反应性增生淋巴结组织中阴性、弱阳性和强阳性的表达率分别是15.56％,31.11％,53.33％和65.00％,25.00％,10.00％(P＜0.05).套细胞淋巴瘤组织中Id1阳性表达与患者LDH、临床分期、结外累及部位和近期疗效有关(P均＜0.05);年龄、性别、WBC计数、PLT计数、HB含量无相关(P均＞0.05).经过Log-rank检验显示,Id1低表达组和Id1高表达组的1年生存率分别是90.48％和79.17％ (P ＞0.05);3年生存率分别是66.67％和33.33％(P＜0.05);5年生存率分别是47.62％和16.67％ (P ＜0.05),Kaplan-Meier生存分析显示Id1高表达组3年、5年生存率低于Id1低表达组(P＜0.05).结论 Id1在套细胞淋巴瘤淋巴结中呈高表达,并与部分预后相关指标有关,Id1高表达组表现出低生存率,Id1可能成为套细胞淋巴瘤预后不良的评价指标.     

免疫磁珠分选骨髓衍生肝干细胞亚群c-Kit~+lin~-

目的：利用免疫磁性细胞分选系统分离纯化骨髓衍生肝干细胞亚群c-Kit^＋lin^-。方法：实验于2006—07／08在南方医科大学实验动物中心完成。6～8周龄的SPF级纯系BALB，C雄性小鼠10只，体质量18～20g。收集小鼠股骨骨髓细胞，利用免疫磁性细胞分选系统，通过两步法分选纯化c-Kit^＋lin^-：将获取的lin^-细胞悬液8℃条件下1500r/min离心10min，弃上清，按80μL/10^7加入Buffer重悬细胞。按20μL/10^7加生物素抗体磁珠，混匀，4℃冰箱孵育15min，按1 mL/10^7加入Buffer洗细胞1次，8℃条件下1500r/min离心10min，弃上清，按500μL/10^8加入Buffer重悬细胞。Buffer 500μL润MS柱，悬液过柱后，Buffer 500μL/次洗柱3次，柱子脱离磁场，加1mL Buffer，用配套柱塞推出柱中的c-Kit^＋lin^-细胞，收集到c-kit^＋lin-细胞，细胞计数。取2．0x108个细胞分成10等份，流式细胞仪分析c-Kit^＋lin^-细胞纯度，计算回收率，评估纯化效率，苔盼兰染色检测纯化前后的细胞活力。计算活细胞的百分率。细胞纯度和细胞回收率的计算：细胞纯度：分离产物中的阳性细胞数，分离细胞的总细胞数×100％，细胞回收率：分离产物中的阳性细胞数，起始标本阳性细胞总数×100％。结果：10只小鼠均进入结果分析。利用免疫磁性细胞分选系统分选出的骨髓衍生肝干细胞亚群c-Kit^＋lin^-细胞纯度和回收率分别为（77．98±2．34）％，75．40％，纯化前后细胞活力不受影响。结论：免疫磁性细胞分选系统能有效分选骨髓衍生肝干细胞亚群c-Kit^＋lin^-，纯度和回收率高，且不影响细胞活力.     

构建适合骨髓衍生肝千细胞移植的小鼠酒精性肝纤维化模型

目的:建立适合骨髓衍生肝干细胞移植的小鼠酒精性肝纤维化模型,为移植骨髓衍生肝干细胞对酒精性肝损伤修复的研究提供进一步探讨的价值。方法:实验于2006-02/06在南方医科大学实验动物中心完成。取Balb/c雌性小鼠100只,SPF级,5～6周龄,体质量15～18g,随机区组法分为造模组92只,对照组8只。用白酒灌胃法建立小鼠酒精性肝纤维化模型。造模组于灌胃的第4,8,12,16周末分别随机选取6只小鼠,眼球采血后,颈椎脱臼处死,取出肝脏,以100g/L的甲醛固定,石蜡包埋切片,苏木精-伊红染色和苦味酸-酸性复红染色,光镜观察病理变化。血标本用于测定生化及肝纤维化指标。对照组以等量的蒸馏水灌胃,于实验的第16周末处死,处理同造模组。组间比较采用单因素方差分析。结果:纳入Balb/c雌性小鼠100只,实验中造模组共23只小鼠死亡,多为急性和亚急性死亡。对照组全部成活。①灌胃初期,造模组小鼠出现精神萎靡等现象,实验开始4周后上述症状减轻,对照组小鼠则食欲正常,无嗜睡现象。②在实验刚开始1周时小鼠体质量(15.67±0.98)g,与实验开始时(16.38±0.58)g相比呈明显负增长(P<0.05)。第4,8,12,16周称质量时,造模组小鼠体质量[(16.17±0.91),(17.23±1.39),(18.27±0.85),(19.31±0.95)g]均明显低于对照组[(18.31±0.57),(19.52±0.85),(20.56±0.86),(21.41±0.95)g],(P<0.05)。③对照组小鼠肝脏表面光滑细润、色红等。造模组小鼠肝脏色泽较正常肝脏暗淡,表面充血,肝脏呈增大趋势。造模组小鼠的肝重比(肝脏湿重/小鼠体质量×100%)均大于对照组。④造模组4周时可见轻度酒精性脂肪肝病理改变,12周时酒精性肝炎改变加重并出现了纤维组织增生,16周时肝纤维化已明显形成。⑤不同时间点与对照组相比,血清中天冬氨酸氨基转氨酶、丙氨酸氨基转氨酶、天冬氨酸氨基转氨酶/丙氨酸氨基转氨酶、三酰甘油均呈升高的趋势:造模第8周后,天冬氨酸氨基转氨酶和三酰甘油的水平均逐步增高,尤其以天冬氨酸氨基转氨酶升高明显。⑥小鼠血清肝纤维化指标的变化:造模第8周后血清中透明质酸和层粘连蛋白的水平均逐步增高,与对照组相比,差异均有显著性意义。结论:应用酒精灌胃法可成功建立小鼠酒精性肝纤维化模型,为骨髓衍生肝干细胞的移植提供了前期的实验研究。     

毛细血管渗漏综合征的易患因素分析

目的 探讨重症医学科毛细血管渗漏综合征(CLS)的发病情况和易患因素.方法 重症医学科收治的2690例患者中出现CLS 191例,记录入院时和出现CLS时患者血生化指标、血常规、动脉血气分析和尿常规等结果,并记录采血时患者的生命体征,以及中心静脉压(CVP)、平均动脉压(MAP)等监测结果,据此进行第二代急性生理学及慢性健康状况评估(APACHEⅡ)、多器官功能障碍综合征(MODS)和全身性炎症反应综合征(SIRS)评分.将入院时、出现CLS时的各项临床资料相比较,进行CLS易患因素分析.结果 重症医学科中CLS发生率为7.10%.和入院时相比,出现CLS时患者体温升高(P<0.01),呼吸频率增快(P<0.05),白细胞计数和中性粒细胞百分率也升高(P<0.01),血小板计数下降(P<0.01);尿pH升高(P<0.01);吸入氧浓度增加(P<0.01),氧合指数下降(P<0.05),压力调整心率降低(P<0.01);血清钙离子浓度和阴离子间隙下降(P<0.05),血渗透压升高(P<0.01);血清谷丙转氨酶、谷草转氨酶和谷氨酰转肽酶等升高(P<0.01和P<0.05).出现CLS时患者SIRS评分、APACHEⅡ评分、MODS评分均较入院时升高(P<0.01).结论 CLS在重症患者中发生率并不低,全身性炎症反应加重、原发病恶化、血小板减少和低钙血症等是CLS常见的易患因素;出现CLS后,肝、肾等重要脏器功能也将受到不利影响.     

原发性卵巢Burkitt淋巴瘤病理分析1例并文献复习

目的:为了更好地认识原发性卵巢Burkitt淋巴瘤(Burkitt's lymphoma,BL)的临床表现、病理特征及其预后.方法:收集1例原发性卵巢BL的病例及其参考文献资料,观察其临床表现、临床病理学特征、免疫组织化学染色及1年的预后.结果:原发性卵巢BL临床表现主要为腹部或盆腔肿块,镜下可见肿瘤细胞弥漫增生,主要由淋巴样细胞组成,细胞中等大小,弥漫生长,细胞核圆形或卵圆形,染色质粗块状,核仁中等大小,嗜碱性,其中散在巨噬细胞,成"星空现象",免疫组织化学结果显示:CD79a(+),CD20(+),CD3(-),CD10(+),BCL-6(+),BCL2(-)和Ki-67(>90%).结论:诊断原发性卵巢BL需结合组织学及免疫组织化学结果,并对其鉴别诊断加以区分.     

免疫磁珠分选骨髓衍生肝干细胞亚群c-Kit+lin-

目的:利用免疫磁性细胞分选系统分离纯化骨髓衍生肝干细胞亚群c-Kit lin-。方法:实验于2006-07/08在南方医科大学实验动物中心完成。6～8周龄的SPF级纯系BALB/C雄性小鼠10只,体质量18～20g。收集小鼠股骨骨髓细胞,利用免疫磁性细胞分选系统,通过两步法分选纯化c-Kit lin-:将获取的lin-细胞悬液8℃条件下1500r/min离心10min,弃上清,按80μL/107加入Buffer重悬细胞。按20μL/107加生物素抗体磁珠,混匀,4℃冰箱孵育15min,按1mL/107加入Buffer洗细胞1次,8℃条件下1500r/min离心10min,弃上清,按500μL/108加入Buffer重悬细胞。Buffer500μL润MS柱,悬液过柱后,Buffer500μL/次洗柱3次,柱子脱离磁场,加1mLBuffer,用配套柱塞推出柱中的c-Kit lin-细胞,收集到c-kit lin-细胞,细胞计数。取2.0×106个细胞分成10等份,流式细胞仪分析c-Kit lin-细胞纯度,计算回收率,评估纯化效率,苔盼兰染色检测纯化前后的细胞活力。计算活细胞的百分率。细胞纯度和细胞回收率的计算:细胞纯度=分离产物中的阳性细胞数/分离细胞的总细胞数×100%,细胞回收率=分离产物中的阳性细胞数/起始标本阳性细胞总数×100%。结果:10只小鼠均进入结果分析。利用免疫磁性细胞分选系统分选出的骨髓衍生肝干细胞亚群c-Kit lin-细胞纯度和回收率分别为(77.98±2.34)%,75.40%,纯化前后细胞活力不受影响。结论:免疫磁性细胞分选系统能有效分选骨髓衍生肝干细胞亚群c-Kit lin-,纯度和回收率高,且不影响细胞活力。     

κ基因重排在霍奇金淋巴瘤H-RS细胞性质中的研究

目的:采用直接原位PCR法,对霍奇金淋巴瘤的恶性成分--H/R-S细胞的克隆性及其与背景 淋巴细胞的相关性进行研究.方法:采用直接原位PCR法.5'-生物素标记的Vk1/Jk124、Vk124、Vk3/Jk3、Vk4/Jk124、Vk5、VK6/Jk混合等6对K家族特异性引物对3例霍奇金淋巴瘤组织H/R-S细胞的K轻链基因重排情况进行检测.结果:(1)1例结节硬化型霍奇金淋巴瘤(NSHL)组织中,部分H/R-S细胞重复出现Vk3/Jk3基因重排,亦有部分H/R-S细胞重复出现Vk1/JK124基因重排,且阳性信号分别重复出现于其周围部分背景淋巴细胞核内,少数H/R-S细胞未检测出K基因重排;(2)2例混合细胞型霍奇金淋巴瘤(MCHL)组织中,所有H/R-S细胞均未检测出K轻链基因重排.结论:(1)本例NSHL的H/R-S细胞可能为多克隆性增生,且H/R-S细胞与其周围部分背景淋巴细胞间可能存在克隆相关性,即可能来自同一个B细胞克隆:(2)2例MCHL的H/R-S细胞发生了λ基因重排或是采用的K家族特异性引物法覆盖其Igk轻键的基因重排方式.     

CT诊断新生儿颅内出血65例临床分析

自CT应用于临床以来,对新生儿颅内出血及时准确的定性、定量、定位有很大帮助。我们对65例经过CT诊断的颅内出血和治疗转归情况报告如下:1 资料与结果1. 1 一般情况 男41例,女24例,早产儿8例,足月儿51例,     

弥漫性大B细胞淋巴瘤中CD40L的表达及意义

目的探讨弥漫性大B细胞淋巴瘤（DLBCL）组织中CD40L表达与DLBCL预后间的关系及意义。方法免疫组织化学法检测27例弥漫性大B细胞淋巴瘤、20例淋巴结反应性增生组织中CD40L的表达。结果（1）DLBCL中CD40L过度阳性率（25．93％）显著低于淋巴结反应性增生（63．64％），P〈0．05。（2）CD40L在Ⅲ、Ⅳ期DLBCL过度阳性率（14．29％）低于Ⅰ、Ⅱ期（38．46％），P〈0．05。CD40L过度阳性率在有结外浸润DLBCL（11．76％）低于无有结外浸润DLBCL（40％），P〈0．05。（3）DLBCL患者CD40L的过度阳性率与远处转移、临床分期均显著相关，P〈0．05。结论（1）CD40L过度阳性率与结外器官浸润及临床分期密切相关，其可能作为判断DLBCL侵袭性及预后的指标。（2）DLBCL中CD40L表达的减少可能是影响其发病的因素之一。     

适合干细胞移植的小鼠放射性肝损伤模型的构建

随着骨髓移植术前辐射预处理、光子刀立体定向、三维适形、组织间插植内照射等放疗技术在肝脏及腹部肿瘤中的应用,肝脏易受到大剂量的照射而引发放射性肝损伤.