复方透骨草溶液抑菌和抗炎作用的实验研究

目的评价复方透骨草溶液的抑菌和抗炎作用,初步探索其抗炎的作用机制,为临床应用提供实验依据。方法采用体外抑菌实验,观察复方透骨草溶液对常见皮肤癣菌和酵母菌的抑制作用;采用二甲苯致小鼠耳肿胀、角叉菜胶致大鼠足趾肿胀的模型,观察复方透骨草溶液和地塞米松磷酸钠注射液外用涂抹的抗炎作用,并检测大鼠足趾致炎4 h后组织中的白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的水平。结果体外抑菌实验表明,复方透骨草溶液对皮肤癣菌和酵母菌的最小抑菌浓度(MIC)分别为原液浓度的12.5%和25.0%;其能降低二甲苯致小鼠耳廓的肿胀度,高剂量给药组与阴性对照组比较差异有统计学意义(P0.01);对角叉菜胶致大鼠足趾肿胀有明显的减轻作用,给药组与阴性对照组比较差异均有统计学意义(P0.01);能显著降低大鼠足趾肿胀损伤后组织中致炎因子IL-1β的表达,给药组与阴性对照组比较差异均有统计学意义(P0.05,P0.01)。结论复方透骨草溶液具有显著的抑菌和抗炎作用,并通过降低组织中的炎症因子IL-1β的水平,从而抑制炎症发展的过程。     

复方透骨草液外用毒性评价

目的:考察复方透骨草液外用的毒性,为临床应用的安全性提供实验依据。方法:①家兔皮肤急性毒性实验:家兔皮肤1 d内4次涂抹复方透骨草液,观察动物的急性毒性反应,14 d后检测血液生化指标ALT、AST、BUN、CREA、TP和ALB,大体解剖观察心、肝、脾、肾等主要脏器,并计算脏器指数。②家兔皮肤刺激实验:分别采用家兔完整皮肤和破损皮肤模型,连续7 d涂抹复方透骨草液,观察给药期及恢复期皮肤的红斑及水肿情况,记录皮肤刺激反应评分,判断药物是否具有刺激作用及刺激强度。恢复期结束行病理学检查。③豚鼠主动皮肤过敏预实验:豚鼠于第1、7、14天涂抹复方透骨草液进行致敏,以0.9%NaCl溶液为阴性对照,1%1-氯-2,4-二硝基苯溶液为阳性对照;末次致敏后14 d进行激发,激发后连续观察72 h,对皮肤的红斑和水肿情况进行初步评价。结果:①家兔1 d内外用大剂量复方透骨草液无明显急性毒性表现;与对照组相比,各项血液生化指标及主要脏器均无明显异常。②连续7 d涂抹复方透骨草液后,家兔完整皮肤未出现明显的红斑、水肿反应,无刺激性;家兔破损皮肤均出现轻度刺激症状(勉强可见红斑),且随着给药次数增加,药物对皮肤的刺激程度增强,末次给药后呈轻度刺激表现,停药后刺激症状逐渐消失,但部分动物的破损皮肤仍可见局部表皮增厚、真皮内纤维组织增生。③豚鼠外涂复方透骨草液激发后6、24、48、72 h均未出现红斑、水肿反应,无致敏性。结论:家兔外用相当于人临床用量45倍的复方透骨草液后未见急性毒性反应。复方透骨草液对家兔完整皮肤无刺激性,但对破损皮肤有一定的刺激性,对豚鼠无致敏性。     

标志物组合检测在益母草肾毒性评价中的应用

目的:采用标志物组合检测的方法评价益母草肾毒性。方法:Wistar大鼠随机分为对照组、益母草水提物组(40 g生药/kg)和醇提物组(40 g生药/kg)。药物组灌胃给予相应剂量的药液,对照组灌胃给予等量纯水,连续9周,停药恢复4周。各组于不同时间点采集血液和尿液样本,末次给药后和恢复期结束时分离肾脏。HE染色后光镜下观察肾组织形态学变化;生化分析仪检测血清总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)以及尿液总蛋白(uTP)、尿白蛋白(uALB)、尿肌酐(uCr)水平;酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清半胱氨酸蛋白酶抑制蛋白C(CysC)、中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)以及尿液NGAL(uNGAL)、肾损伤分子-1(KIM-1)、白介素-18(IL-18)水平。采用受试者工作特征曲线(ROC)分析结合二元Logistic回归分析的方法,比较单一标志物与标志物组合的检验效能。结果:①与同时间点对照组相比,益母草水提物组第9周血清TP水平明显降低(P0.05),第4、8周血清BUN水平显著升高(P0.01);醇提物组第8、9周血清BUN水平显著升高(P0.01),第2周尿液uCr水平显著降低(P0.05)。至恢复期结束,以上指标的组间比较,差异均无统计学意义(P0.05)。②与同时间点对照组相比,益母草水提物组和醇提物组各时间点血清CysC、NGAL及尿液uNGAL、KIM-1、IL-18水平均显著升高(P0.01);至恢复期结束,水提物组和醇提物组以上标志物水平仍明显高于对照组(P0.01)。③给药9周后,益母草水提物组和醇提物组大鼠出现不同程度的肾小管上皮细胞肿胀及蛋白管型,且醇提物所致的肾损伤更为明显;停药4周后,水提物组和醇提物组大鼠肾损伤有所恢复,但仍可见一定程度的肾小管上皮细胞肿胀。④单一标志物的ROC分析显示,血清标志物CysC、NGAL和尿液标志物uNGAL、KIM-1、IL-18的曲线下面积(AUC)均远大于其他标志物。标志物组合的ROC分析显示,水提物组血清BUN+CysC+NGAL组合AUC为0.999,尿液uNGAL+KIM-1组合AUC为0.991,且均具有较高的敏感性和特异性,检验效能高于其他标志物组合及单一标志物;醇提物组以上两种组合的AUC均为1.000,亦具有较高的检验效能。结论:益母草水提物、醇提物长期给药可诱导大鼠肾损伤,且醇提物所致的肾损伤更为明显;血清BUN+CysC+NGAL及尿液uNGAL+KIM-1组合检测可用于益母草肾毒性的评价。     

手足癣的中医临床治疗和药理研究进展

手足癣是皮肤科较常见的浅部皮肤真菌感染性疾病之一,临床上分为水疱鳞屑型、角化过度型和浸渍糜烂型,具有传染性、复发性的特点,其致病真菌主要为红色毛癣菌、白色念珠菌等。手足癣在我国发病率较高,而现阶段对手足癣的关注度较其他常见皮肤科疾病相对较低、研究工作也较少。目前常用的临床治疗手足癣的方法主要分为西医治疗、中医治疗及中西医结合治疗。西医治疗常选用抗真菌药物,主要包括外用药和口服药,但部分外用药治疗过程中会出现耐药性且停药后易复发,部分口服药物治疗过程中还会出现明显的不良反应,如肝毒性等,具有一定的局限性。中医中药外治法治疗手足癣的历史悠久,疗效较佳且副作用小,有较好的优势。现系统查阅并收集了近10年中医临床治疗手足癣的相关文献,根据中医病因、病机确立了"清热燥湿、杀虫止痒"的基本治则,同时对常用中药制剂方面进行了归纳总结;通过中医方解与现代中药药理研究分析了相关单味中药的功效与药理作用,发掘与总结中医中药治疗特色的临床实用价值。对既往与近期研究新进展情况进行了综述,同时从制剂工艺与质控标准、药效与毒理、临床疗效评价三个方面分析了目前存在的不足之处,以期为更好地提高中医治疗手足癣提供更多的思考与方法。     

基于中药特点的肝毒性研究与思考

中药的安全性是临床应用的关键因素。肝脏作为药物代谢的重要场所,也是药物毒性反应的主要靶器官之一。中药毒性与药性、体质、配伍等密切相关。中药肝毒性的作用机制涉及氧化应激、线粒体损伤、炎症反应、胆汁淤积、能量及糖脂代谢紊乱、肝药酶影响等,且因中药成分复杂,具有多途径、多靶点作用,加之药物成分间相互作用等影响因素,导致中药毒性研究和安全性评价存在诸多问题。中药安全性评价应结合中药的特点,排除农药残留、重金属、真菌等外源性污染因素,并重视同名异物、产地与种植条件、炮制、配伍等源于中药自身因素的影响。近年来,中药肝毒性研究采用结构预警预测肝毒性成分,加强离体与整体实验、药代与毒代综合分析,并结合运用系统毒理学等新理论、新技术与新方法进行精准评价,为临床用药安全提供更全面的参考。     

商陆致大鼠肾损伤的基因组学研究

目的采用寡核苷酸微阵列芯片技术探讨商陆长期给药对大鼠肾组织相关细胞因子及基因表达的影响, 以阐释商陆致大鼠肾损伤的作用机制。方法将大鼠随机分为对照组及商陆低、高剂量组（10、20 g·kg-1）,灌 胃商陆水煎液（20 mL·kg-1）或等体积纯水,每天1 次,连续49 d。采用酶联免疫吸附法（ELISA）和免疫组化法 （IHC）检测肾组织中相关炎性因子[白细胞介素（IL）1β、IL-6、肿瘤坏死因子α（TNF-α）]含量及核因子κB （NF-κB）表达;采用全基因组寡核苷酸生物芯片检测大鼠肾组织基因表达,筛选差异基因,并进行京都基因与 基因组百科全书（KEGG）通路分析;采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）法验证差异基因。结果与对照组比 较,商陆高、低剂量组大鼠肾组织中IL-1β、IL-6、TNF-α 含量均明显升高（P＜0.05,P＜0.01）,商陆高剂量 组大鼠肾组织中NF-κB 表达量明显升高（P＜0.05）;商陆高、低剂量组分别有2 560、1 923 个差异表达基因, 两组均激活了丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）信号通路中的MAP、p38 MAPK、JNK 3 条信号通路,且高剂量组 引起MAPK 通路的差异基因数是低剂量组的2 倍;商陆高剂量组还激活了Janus 激酶/信号转导与转录激活因 子（JAK-STAT）信号通路及细胞凋亡（Apoptosis）信号通路。验证实验结果表明,与对照组比较,商陆低剂量组 大鼠肾组织的转化生长因子β1（TGF-β1）基因表达量明显升高（P＜0.01）,而高剂量组大鼠肾组织的IL-1β、表 皮生长因子受体（EGFR）、TGF-β1 基因表达量均显著升高（P＜0.01）。结论通过IL-1β、TGF-β1/β2 等细胞 因子激活MAPK、JAK-STAT 及细胞凋亡信号转导通路,继而引起炎性反应和细胞凋亡,可能是商陆致大鼠肾 损伤的机制之一。