全国不同产地对叶百部HPLC指纹图谱研究

目的:建立全国不同产地对叶百部的总生物碱HPLC指纹图谱,并进行聚类分析和主成分分析,为评价其质量与分类提供依据。方法:以Merck STARRP-18e(5μm,4.6 mm×250 mm)为色谱柱,流动相为乙腈-0.02%氨水溶剂系统,梯度洗脱,柱温35℃,检测波长210 nm,对各批样品色谱图采用聚类分析进行归类,并按照产地位置的相关性进行分析。结果:从样本中选取了8个稳定性好、吸收峰强、特征明显的色谱峰作为对叶百部指纹图谱的参照峰。通过聚类分析将31批产地的对叶百部分成了4类,第Ⅰ~Ⅲ类的样品相似度均大于0.90;聚类分析结果与其产地的地理位置分布结果较为一致。结论:该研究建立了对叶百部总生物碱HPLC指纹图谱及质量分析方法,精密度、重现性和稳定性良好,能较好地按有效成分区分不同产地的对叶百部,可为对叶百部药材的质量控制提供科学依据。     

对叶百部遗传多样性的ISSR分析

目的分析不同居群对叶百部Stemona tuberosa的亲缘关系和遗传多样性。方法应用ISSR分子标记技术研究长江流域以南各省对叶百部的遗传多样性;采用POPGENE32进行亲缘关系分析,NTSYSpc-2.10E进行UPGMA聚类分析。结果 7条ISSR引物共检测到74个清晰的扩增位点,多态性位点74个,多态性位点百分率100%;有效等位基因数(Ne)为1.524 4,平均Nei’s基因多样性指数(He)为0.314 6,平均Shannon多样性指数(I)为0.478 6,各居群间的遗传距离介于0~0.950 2,平均值为0.416 3。结论从分子角度揭示了对叶百部具有较高的遗传多样性,其居群间亲缘关系与地理环境有一定的相关性,实验结果将为后续对叶百部引种栽培及根用药植物资源的持续利用,特异生物碱的筛选及其运用于化学分类,以及对叶百部道地药材产区的科学选择奠定理论基础。