甘胆酸化学发光定量免疫分析方法的建立

目的 建立甘胆酸（CG）化学发光免疫检测方法.方法 采用竞争法,固相微孔L板包被技术,通过与参比试剂盒临床结果相关性的比较,保证其具有同等的临床诊断价值.结果 本试剂盒的线性范围为0.25～ 40 μg/mL,灵敏度为0.05μg/mL,批内精密度分别为7.1％和7.4％;批间精密度为11.3％和15.74％;样品的回收率在85％～115％之间.与透明质酸、Ⅳ型胶原、Ⅲ型前胶原氨端肽、层粘连蛋白、胆酸以及鹅脱氧胆酸的交叉反应率在0.010％～1.480％之间,均不会对CG的正常测定构成干扰.通过临床样品正常值的测定确定了正常值范围,与有关文献报道基本一致.同时,与北京北方生物技术研究所的放免药盒临床结果进行科学比较,两组结果的相关系数r为0.947.结论 该试剂盒与参比试剂盒的测定结果具有较高的符合率,应用于临床,可为慢性肝炎复发、轻度肝硬变、肝癌、肝胆胃肠消化系统疾病的研究诊断提供可靠的指标.同时,肝胆酸与血清Ⅳ型胶原、透明质酸和前白蛋白（PA）动态联检对于肝硬化的诊断、疗效及预后判断具有重要的临床意义.     

糖类抗原CA72-4化学发光定量免疫分析方法的建立

目的 建立糖类抗原CA72-4化学发光定量免疫测定方法.方法 一株抗CA72-4单克隆抗体经微孔板固相包被与另一株酶标单克隆抗体建立双夹心反应体系,检测样品中CA72-4抗原的含量.通过与国外权威试剂盒血样测值的对比,分析该方法临床应用的可行性.结果 该分析方法线性范围为0～ 160 U/mL,灵敏度为0.55U/mL.批内CV值为:5.49％,4.53％;批间CV值为:8.12％,7.81％;回收率为:99.74％ ～ 104.11％;与CEA,CA125,CA19-9无交叉反应;与法国Cisbio analysis公司所生产的CA72-4免放药盒血清测值对比分析后,发现两者相关性较高,并确定了本分析方法的正常范围.结论 该分析方法的测定结果与参比试剂盒结果有较高符合率,可用于临床血清中CA72-4的检测.     

临床-解剖复合分级系统对CABG近期预后的预测效能分析

摘要：目的　建立临床-解剖复合分级系统,评价欧洲心脏手术风险评分系统（EuroSCORE）Ⅱ和SYNTAX评分系统对预测冠状动脉旁路移植术（CABG）后病死率是否存在复合作用。方法　回顾性分析行CABG患者的围术期资料。利用EuroSCOREⅡ和SYNTAX评分分别对患者进行风险分级,并根据两种系统分级情况交叉排列,风险分级重新分布,构建临床-解剖复合分级系统。评价该系统的精确度和校准力,并与EuroSCOREⅡ及SYNTAX积分进行比较。结果　1 301例患者院内实际病死率为1.54%（20/1 301）。EuroSCORE不同亚组除术前不稳定型心绞痛和SYNTAX积分差异无统计学意义外,其他变量差异均有统计学意义;SYNTAX积分不同亚组只有年龄、不稳定型心绞痛和30 d死亡的差异有统计学意义;复合分级系统组间比较除不稳定型心绞痛、心功能分级（NYHA分级）及外周动脉疾病外,其他变量差异均有统计学意义。H-L拟合优度检验提示EuroSCOREⅡ、SYNTAX积分及复合分级系统拟合度尚可,ROC曲线分析提示复合分级系统分辨力最佳（AUC=0.862）,EuroSCOREⅡ和SYNTAX积分的AUC分别为0.849和0.732（P＜0.01）。复合分级系统提高了术后30 d死亡的预测能力,与EuroSCOREⅡ相比,净重新分类指数（NRI）=14.05%,Z=7.205,P＜0.01;与SYNTAX比较,NRI=37.85%,Z=4.240,P＜0.01。结论　EuroSCOREⅡ与SYNTAX积分的复合分级系统可以提高单一类型评分系统对CABG近期病死率的预测能力。     

老年钙化性主动脉瓣狭窄与外周血炎性细胞及血脂水平的关系

摘要： 目的 探讨老年 （≥65岁） 患者发生钙化性主动脉瓣狭窄与其外周血炎性细胞水平及脂质代谢异常的相关性。方法 连续纳入2015年6月—2017年6月间在我院诊断为钙化性主动脉瓣狭窄的老年患者76例作为病例组,选取78例因胸部不适住院的老年人 （除外心脏瓣膜病） 作为对照组。2组入院时均检测白细胞计数 （WBC）、 中性粒细胞比例 （N%）、 中性粒细胞计数 （N）、 淋巴细胞计数 （L）、 中性粒细胞淋巴细胞比值 （NLR）、 超敏C-反应蛋白 （hs- CRP）、 氨基末端B型利钠肽原 （NT-pro BNP）、 总胆固醇 （TC）、 三酰甘油 （TG）、 载脂蛋白α （apo-α）、 高密度脂蛋白（HDL）、 低密度脂蛋白 （LDL）、 极低密度脂蛋白 （VLDL） 等指标, 比较这些指标在2组间的差异。结果 病例组WBC、 N%、 N、 NLR、 hs-CRP、 NT-pro BNP、 VLDL均高于对照组, L、 HDL均低于对照组 （P＜0.05）; 多因素回归分析显示, 吸烟、 hs-CRP及NT-pro BNP升高是老年钙化性主动脉瓣狭窄的独立危险因素。结论 老年钙化性主动脉瓣狭窄不是一种简单的退行性病变, 其与全身炎症反应、 脂质代谢异常有关。     

抗血管紧张素Ⅱ单克隆抗体制备及初步鉴定

目的 运用杂交瘤技术制备血管紧张素Ⅱ单克隆抗体,并对其进行初步鉴定.方法 制备血管紧张素Ⅱ免疫原免疫BALB/c小鼠,将小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,通过筛选克隆后获得细胞株并制备血管紧张素Ⅱ单克隆抗体,对抗体的亚型、效价、亲和常数、交叉反应率进行测定并评估其用于化学发光免疫分析的性能.结果 共制备出6株单克隆抗体,其中9A2、3B3株单抗具有良好的亲和力、特异性、灵敏度和稳定性,9A2株单抗用于化学发光免疫分析测定样本结果与正常人水平一致.结论 本研究成功制备出亲和力高、特异性和稳定性好的血管紧张素Ⅱ单克隆抗体,可应用于AⅡ化学发光免疫分析中,具有良好的临床检测价值.     

马鹿茸化学成分的研究

从马鹿茸的乙醇提取物中首次分得１６个化合物。经理化常数和光谱分析，鉴定为：胆固醇肉豆蔻酸酯（Ｉ）、胆固醇油酸酯（Ⅱ）、胆固醇软酸酯（Ⅲ）、胆固醇硬脂酸脂（Ⅳ）、胆固醇（Ｖ）、胆旮－５０烯－３Ｂ－醇－７－酮（Ⅵ）、胆甾－５－烯－３β，７α－二醇（Ⅶ）、胆甾－５－烯－３β、７β－二醇（Ⅷ）、尿嘧啶（Ⅸ）、次黄嘌呤（Ⅹ）、同酐（Ⅺ）、脲（Ⅻ）、脲（ＸⅢ）、对羟基苯甲醛（ＸⅣ）、对羟基苯甲酸（ＸＶ）和尿苷     

儿童骨肉瘤的手术治疗及预后分析

目的探讨15岁以下儿童骨肉瘤的手术治疗方法以及治疗效果.方法回顾2003年6月至2011年12月我院治疗的15岁以下骨肉瘤患者共54例,男33例,女21例.按不同手术方式对其生存时间及术后并发症进行随访.同期随访15~25岁青少年骨肉瘤患者77例(男48例,女29例)作为对照,随访总例数为131例.在15岁以下儿童组中按手术方式分为截肢组(19例),假体置换组(8例)以及生物重建组(27例).比较儿童组和青少年组之间整体生存率的差别,并比较不同手术方式之间儿童骨肉瘤患者预后的差异,应用Kaplan-Meier法计算患者生存率,应用Log-rank检验进行单因素分析,研究年龄因素以及手术方式与骨肉瘤患者生存率之间的关系.结果所有患者均获得随访,总的随访时间为4-77个月,平均39.7个月.Log-rank单因素统计分析显示儿童组和青少年组之间生存率差异有统计学意义(P=0.048<0.05),不同手术方式之间生存率差异无统计学意义,截肢组与假体置换组相比(P=0.962>0.05),截肢组与生物重建组(P=0.303>0.05),假体置换组与生物重建组(P=0.452>0.05).结论本研究显示年龄可以作为骨肉瘤预后的影响因素,儿童骨肉瘤相对于青少年骨肉瘤来说,总体生存预后较差.对于儿童骨肉瘤手术治疗来说,不同的手术方式对其生存预后无明显影响.     

抗血管紧张素Ⅰ杂交瘤细胞株制备方法的建立

目的 制备抗血管紧张素Ⅰ(angiotensin I,AⅠ)的杂交瘤细胞株,比较不同连接载体产出杂交瘤细胞的效果.方法 通过对载体分别为牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)的AⅠ-BSA和AⅠ-OVA免疫原进行小鼠免疫,将骨髓瘤细胞与免疫合格的小鼠进行脾细胞融合,筛选出阳性杂交瘤细胞株,经过克隆、扩大培养、腹水诱生等工序,生产出AⅠ单克隆抗体,测定并比较不同连接载体产出杂交瘤细胞抗体的性能,筛选具有应用价值的抗体.结果 本方法共产出9株AⅠ杂交瘤细胞株,其中AⅠ-OVA组产出4株,AⅠ-BSA组产出5株,进行各细胞抗体的功能检验,测定亚型、亲合常数,与AⅡ、1～7氨基酸肽段、5～8氨基酸肽段以及1～9氨基酸肽段均无交叉反应,优选出AⅠ-BSA组的D11C12单抗建立检测方法进行性能评价,空白限为0.04ng/mL,低值样本的分析内精密度为4.5％,高值样本的分析精密度为3.5％,与对照试剂盒进行68例样本检测结果相关性对比,r为0.9728.结论 成功建立抗血管紧张素Ⅰ杂交瘤细胞株制备方法,可以满足AⅠ单克隆抗体的使用要求.     

7种危险评分系统对CABG术后病死率预测效能的比较

目的 评价7种危险评分系统对于单中心接受冠状动脉旁路移植术(CABG)患者术后病死率的预测效能.方法 收集2010年1月至2011年1月施行CABG患者围手术期资料.应用7种危险评分系统:SinoSCORE、Additive EuroSCORE、Logistic EuroSCORE、OPR、Cleveland model、Parsonnet score、QMMI预测每一位患者术后病死率和全部患者的平均预计病死率.根据预计病死率将全部患者分为6组:Ⅰ组(0～1.99％),Ⅱ组(2.00％ ～ 3.99％),Ⅲ组(4.00％～5.99％),Ⅳ组(6.00％～7.99％),Ⅴ组(8.00％～9.99％),Ⅵ组(＞10％).比较不同危险程度的实际病死率和预计病死率评价评分系统的预测能力.运用Hosmer-Lemeshow拟合优度检验评价评分系统的校准度,运用ROC曲线下面积(AUC)评价评分系统的分辨力.结果 全组共1103例患者,平均年龄(62.8±8.8)岁.患者术后22例死亡,实际病死率1.99％.SinoSCORE、Additive EuroSCORE、Logistic EuroSCORE、OPR、Cleveland model、Parsonnet score、QMMI预测平均全组病死率分别为3.01％、4.38％、3.83％、1.69％、4.42％、6.71％、3.71％,其中最接近实际病死率的是OPR、SinoSCORE、QMMI.分组比较显示:Logistic EuroSCORE在各组中全部高估术后病死率.Additive EuroSCORE在Ⅵ组中预测病死率明显低于实际病死率,其他各组均高估了术后病死率.而SinoSCORE、Cleveland model、Parsonnet score、QMMI除了在Ⅰ组低估了患者术后病死率,其他各组高估了术后病死率.OPR低估了Ⅰ组和Ⅳ组患者的病死率,高估了其他组患者的病死率.利用Hosmer-Lemeshow拟合优度检验评价7种评分系统的校准度,结果显示7种评分系统校准度尚可,P值全部＞0.05.通过ROC检验比较7种评分系统的分辨力,其中只有SinoSCORE的AUC =0.751( ＞0.70),证明SinoSCORE对于本组患者的死亡分辨力良好.结论 通过比较,SinoSCORE对于本中心接受CABG患者术后病死率预测效能好,可以运用于术前危险性评估.