当归芍药散抑制小鼠离体子宫收缩效应与效应物质分析评价

目的：探讨当归芍药散水提取物和50％乙醇提取物对小鼠离体子宫收缩效应及效应物质的异同。方法：采用小鼠离体子宫平滑肌收缩模型评价两种提取物的效应差异；采用HPLC-TOF／MS及对照品对照，分析了不同提取方法样品中化学成分组成的异同。结果：水提物对小鼠离体子宫收缩频率、收缩幅度和平均肌张力抑制效应均不及50％乙醇提取物；水提物中化学信号不及50％乙醇提物中化学信号丰富；从水提取物和50％乙醇提取物中分析鉴定了14个化舍物。结论：当归芍药散不同溶剂提取物在小鼠离体子宫收缩效应和化学成分上存在较大差异，为当归芍药散的制备方式和效应物质基础的阐明提供了依据。     

不同品种葛根中葛根素及总黄酮的含量测定

目的 建立不同品种葛根中葛根素及总黄酮的含量测定方法.方法 采用RP-HPLC法,以甲醇-水(32:68)为流动相,检测波长为250 nm测葛根素含量;紫外分光光度法测柴葛、粉葛中总黄酮含量.结果 葛根素峰分离度提高,峰形改善;葛根素0.204～2.04 μg范围内与峰面积线性关系良好(r=0.999 9),回收率为98.7%(n=5),精密度RSD=0.86%.总黄酮浓度在4.08～16.32 μg/ml范围内与吸收度线性关系良好(r=0.999 8).结论 该法灵敏、准确、简便易行,重复性好,可用于中药葛根药材及饮片的质量控制.     

姜黄素纳米混悬液的抗癌活性及细胞摄取研究

目的 制备姜黄素纳米混悬液(CUR-NS)并进行体外抗癌活性及细胞摄取研究。方法 采用反溶剂沉淀法制备CUR-NS。用粒度分析仪测定其粒径大小,同时用原子力显微镜进行形态学考察。采用MTT法检测姜黄素原药和CUR-NS对肿瘤细胞MCF-7的增殖抑制作用。同时,运用高效液相色谱法对药物细胞摄取进行定量研究。结果 CUR-NS的平均粒径为(69.65 ± 0.50)nm,多分散系数为0.34 ± 0.03,zeta电位为(-8.67 ± 0.26)mV。原子力显微镜下观察发现,CUR-NS中粒子基本呈球形,粒径与粒度分析仪所测结果基本相符,且分散性良好,无聚合粘连。短期物理稳定性研究表明,CUR-NS在4 ℃下避光保存1个月后,粒径大小和分布基本保持稳定。MTT细胞毒性实验表明,24 h内姜黄素原药和CUR-NS的半数抑制浓度(IC50)分别为(44.09 ± 0.93)μmol·L-1和(36.23 ± 0.58)μmol·L-1,CUR-NS对肿瘤细胞MCF-7增殖的抑制作用明显强于姜黄素原药。定量摄取研究发现将姜黄素制成纳米混悬液,可在一定程度上改善其化学稳定性,增加肿瘤细胞对药物的摄取。结论 纳米混悬技术是改善姜黄素类难溶性及化学不稳定药物的理化及生物活性的有效制剂方法。     

小鼠离体子宫收缩模型定量药理学研究

目的该文探索建立了小鼠离体子宫收缩模型,以此为对象,对药物效应定量方法进行了评价研究,并与大鼠模型进行了比较。方法缩宫素诱导离体子宫收缩,观察10-8.5～10-5mol·L-1浓度范围内维拉帕米对子宫收缩的抑制作用,采用两次归一化的方法对数据进行处理,计算各浓度的抑制率,并根据实验结果计算药物的ED50,以上述方法观察维拉帕米对大鼠及小鼠离体子宫的不同作用。结果随着维拉帕米浓度增加,其对离体子宫收缩抑制作用不断增强,在10-5mol·L-1浓度下子宫收缩被完全抑制。两次归一化的方法对结果进行计算后,得到维拉帕米对大鼠及小鼠离体子宫收缩抑制作用的ED50分别为10-7.24(10-7.46～10-7.04)mol·L-1及10-7.58(10-7.78～10-7.38)mol·L-1。结论采用本方法进行实验及数据处理,可以较好的排除多种因素的干扰,从而对药物效应的强弱进行量化。经工具药物进行验证,认为该方法灵敏、可靠、经济,可以用于离体子宫活性药物的评价。     

冬凌草甲素纳米结晶黏附性缓释片的制备及体外评价

目的制备冬凌草甲素纳米结晶黏附片,考察其体外释放性、黏附性和结晶药物形态。方法采用高压均质法将冬凌草甲素制成纳米结晶,以羟丙甲纤维素(HPMC)和卡波姆为生物黏附材料,甘露醇为稀释剂和支架剂制备冬凌草纳米结晶生物黏附性缓释片。采用紫外分光光度法测定冬凌草甲素的含量,采用正交设计结合多元线性回归,以累计释放率为主要考察指标,考察了HPMC、卡波姆、甘露醇的用量对药物溶出的影响,确定了片剂的优化处方,并对片剂的黏附性和体外药物释放做了考察。结果最佳处方含HPMC31.0%,卡波姆21.7%,甘露醇7.44%。片剂中药物以纳米结晶形式从片剂中溶出,而且具有黏附和缓释作用。结论以最佳制备工艺条件制备纳米结晶片,制备工艺简单,重现性好。同时体外实验表明,冬凌草甲素纳米结晶生物黏附性缓释片显示了纳米结晶与生物黏附的双重优点。     

当归-川芎挥发性成分与其抗子宫痉挛活性相关性分析

目的:评价当归-川芎不同配比药对挥发性成分与其抑制小鼠离体子宫平滑肌收缩效应的相关性。方法:采用小鼠离体子宫收缩模型评价当归-川芎不同配比药对挥发性成分的生物效应,采用气相色谱-质谱(GC-MS)联用技术对挥发性成分进行分析鉴定,探讨两者的相关性。结果:离体子宫平滑肌收缩试验表明不同配比当归-川芎药对挥发油对小鼠离体子宫收缩效应强弱依次为:当归-川芎(2∶1)>当归-川芎(3∶1)>当归-川芎(1∶1)>当归-川芎(3∶2);GC-MS分析结果表明对离体子宫收缩效应最佳的当归-川芎(2∶1)药对挥发油中主要成分的比例关系为:(Z)-ligustilide:(Z)-3-butylidenephthalide:4,5-dihydro-3-butyl-phathalide:(E)-ligustilide:Unknowncompound:8,9-dehydro-Cycloisolongifolene:Neocnidilide:(E)-3-butylidenephthalide(80.75∶4.02∶2.07∶1.66∶0.81∶0.61∶0.53∶0.52)。结论:不同配比当归、川芎药对挥发性成分抑制离体子宫平滑肌收缩效应强度不同,可能是由于挥发油中各组成成分比例不同引起;挥发油中以内酯类成分为主,提示该类成分可能为抑制子宫收缩的主要活性成分。     

LC/MS法测定犬血浆中的水飞蓟宾浓度

目的建立犬血浆中水飞蓟宾浓度的LC-MS测定方法。方法取犬血浆400μl,加200μl磷酸氢二钠(0.1mol.L-1)和50μl内标萘酚(10mg·mL-1),3ml乙醚萃取后取上清液挥干,100μl甲醇复溶,离心并取10μl进行LC-MS测定。色谱条件:色谱柱为ODS-C18柱(2.1mm×150mm,5μm,Phenomenex,USA),流动相为甲醇:2%乙酸水=55∶45,流速为0.2ml.min-1;质谱条件:电喷雾离子化(ESI)方式,以选择性负离子方式检测,水飞蓟宾和内标萘酚的选择检测离子质荷比分别为m/z481.00([M-H]-)和m/z142.92([M-H]-)。结果水飞蓟宾的线性范围为25～8000μg.L-1,定量下限(LOQ)为25μg.L-1。准确度、精密度及回收率均符合有关要求。结论本方法专属性强,检测限低,灵敏度高,线性关系良好,方法简便快捷、经济,适用于水飞蓟宾药代及毒代动力学研究。     

水飞蓟宾纳米结构脂质载体中主药含量及包封率测定

 目的 建立测定水飞蓟宾纳米结构脂质载体中主药含量及包封率的方法。 方法 采用高效液相色谱法测定药物含量，色谱柱为 Kromasil C₁₈ 柱（ 4.6 mm×150 mm ， 5 μm ），流动相为甲醇 -0.35 mol·L^-1 醋酸（ 48 ∶ 52 ） , 流速为 1 mL·min^-1 ，检测波长为 288 nm ；分别采用离心超滤法、葡聚糖凝胶过滤法分离水飞蓟宾纳米结构脂质载体和游离药物以测定包封率。 结果 ■ 水飞蓟宾在 1~40 mg·L^-1 内线性良好（ <> r =0.9998 ），平均回收率为 99.57%(RSD=0.52%) ，离心超滤法及葡聚糖凝胶过滤法测得平均包封率分别为 96.87% ， 84.20% 。 结论 采用离心超滤法分离脂质载体与游离药物，高效液相色谱法测定药物含量，可高效、准确、方便地测定水飞蓟宾纳米结构脂质载体包封率。