泽兰中迷迭香酸含量测定方法学研究

目的:建立泽兰中迷迭香酸的含量测定方法,为《欧洲药典》泽兰专论的质量标准提供研究数据。方法:采用高效液相色谱法。基于样品提取和色谱条件的优化结果建立迷迭香酸的分析方法,同时对该方法进行系统的方法学验证,包括采用单变量分析(OVAT)进行方法的耐用性研究及按照《欧洲药典》的方法测定该色谱系统的滞留体积。结果:迷迭香酸检测质量浓度线性范围为5.02~60.30μg·m L~(-1)(r=0.999 9);加样回收率为95.5%~101.6%,RSD=2.1%(n=9);重复性、中间精密度、稳定性及耐用性试验的RSD均小于3.0%;该色谱系统滞留体积为2.4 m L。结论:该方法操作简单,重复性、准确度及耐用性良好,可作为泽兰中迷迭香酸的含量测定方法列入《欧洲药典》泽兰专论的质量标准草案。     

HPLC同时测定尿塞通胶囊中丹参素钠、橙皮苷及丹酚酸B含量

目的建立同时测定尿塞通胶囊中丹参素钠、橙皮苷、丹酚酸B含量的方法。方法采用高效液相色谱法,C18色谱柱,以乙腈-0.1%磷酸为流动相进行梯度洗脱,流速1.0 mL/min,柱温30℃,检测波长286 nm。结果丹参素钠、橙皮苷、丹酚酸B分别在0.038 44~1.922μg、0.000 207 052 8~4.044μg、0.034 28~1.714μg范围内线性关系良好,平均回收率为90.9%~107.1%,RSD为2.1%~3.2%。结论所建立的方法简便、准确,可用于尿塞通胶囊的质量控制。     

pCDNA3.1-Annexin A7载体的构建及在Hea-P细胞中的表达

[目的]构建pCDNA3.1-Annexin A7载体并稳定转染Hca-P细胞.[方法]提取小鼠总RNA,逆转录成cD-NA,PCR扩增,获取Annexin A7 CDS,将PcDNA3.1( )质粒和Annexin A7 CDS片段行BamH I和EcoR I双酶切,构建并抽提pCDNA3.1-Annexin A7质粒,测序鉴定后转染Hca-P细胞,经400 μg/mL G418完全培养基筛选获得pCDNA3.1-Armexin A7载体稳定转染的Hca-P细胞,在蛋白质水平检验Annexin A7的表达并行基因组DNA鉴定.[结果]成功构建pCDNA3.1-Annexin A7载体,经测序鉴定,所得到的载体中的CDS经比对与库中序列一致.pCDNA3.1-Annexin A7载体转染Hca-P细胞后,获得稳定上调表达Annexin A7的Hca-P细胞株;行基因组DNA鉴定,证实pCDNA3.1-Annexin A7已转入Hca-P细胞中,western-blotting结果显示转染前后蛋白的表达相对值Annexin A7/GAPDH分别为0.43544±0.0112和0.45957±0.0065(P＜0.05).[结论]pCDNA3.1-Annexin A7的构建并稳定转染Hca-P细胞成功,为通过上调Annexin A7在Hca-P的表达以证实Annexin A7与恶性肿瘤淋巴道转移潜能关系的相关研究打下了基础.     

pCDNA3.1-Annexin A7载体的构建及在Hca-p细胞中的表达

[目的]构建pCDNA3.1-Annexin A7载体并稳定转染Hca-p细胞。[方法]提取小鼠总RNA,逆转录成cDNA,PCR扩增,获取Annexin A7 CDS,将PcDNA3.1（＋）质粒和Annexin A7 CDS片段行BamH Ⅰ和EcoR Ⅰ双酶切,构建并抽提pCDNA3.1-Annexin A7质粒,测序鉴定后转染Hca-p细胞,经400μg/mL G418完全培养基筛选获得pCDNA3.1-Annexin A7载体稳定转染的Hca-p细胞,在蛋白质水平检验Annexin A7的表达并行基因组DNA鉴定。[结果]成功构建pCDNA3.1-Annexin A7载体,经测序鉴定,所得到的载体中的CDS经比对与库中序列一致。pCDNA3.1-Annexin A7载体转染Hca-p细胞后,获得稳定上调表达Annexin A7的Hca-p细胞株;行基因组DNA鉴定,证实pCDNA3.1-Annexin A7已转入Hca-P细胞中,western-blotting结果显示转染前后蛋白的表达相对值Annexin A7/GAPDH分别为0.43544±0.0112和0.45957±0.0065（P〈0.05）。[结论]pCDNA3.1-Annexin A7的构建并稳定转染Hca-p细胞成功,为通过上调Annexin A7在Hca-P的表达以证实Annexin A7与恶性肿瘤淋巴道转移潜能关系的相关研究打下了基础。     

不同情况下小儿静脉穿刺角度的选择与技巧

小儿静脉穿刺，是一项十分重要的技术，穿刺成功与失败与患儿胖瘦、肤色、解剖变异、脱水、循环障碍、水肿影响有关，另外与静脉穿刺针头、操作技巧、心理因素有关。     

高血压性脑出血的临床护理体会

目的：总结探讨高血压脑出血的术后护理方法及康复措施。方法：制定护理方案,严密观察病情,监测生命体征,预防并发症的发生。结果：总有效率为91．4％。结论：科学、严密、有效的护理措施,可提高护理质量,降低病死率、致残率。     

探讨突发急性呼吸窘迫症患者的临床护理

外科患者在围手术期因严重的感染和炎症而引发急性呼吸窘迫综合征（ARDS）临床上并不少见,这种严重的并发症早期易被原发病所掩盖,发病后病情进展快,治疗困难,预后欠佳,病死率较高。我院于2008-2009年间共收治ARDS患者30例,经呼吸机支持和积极抢救成功26例,现将护理体会报告如下。     

急性脑血管病并发消化道出血的观察与护理

消化道出血是急性脑血管病较常见的并发症 ,是预后不良的先兆 ,如护理妥善和得当 ,可转危为安。我科对 1 50例脑血管病进行了临床观察 ,其中消化道出血先兆 2 5例 ,出血者 2 0例 ,经我们细心观察和护理 ,均取得了满意效果。1　临床资料1 1　出血发生时间　 2 0例中消化道出血与急性脑血管病基本同时发病 4例占 2 0 % ,1天 - 2天后出血 5例 ,占 2 5% ,3天 - 6天后出血 1 1例 ,占 55%。1 2　症状与体征　意识障碍者 1 5例 ,占 75% ;体温升高者 1 2例 ,占 60 % ;血压升高者 1 7例 ,占85%。脑血管病病情越重 ,消化道出血可能性越大。2　治疗急…     

膜联蛋白A7表达稳定下调的小鼠肝癌Hca-F细胞株的建立

目的:建立针对膜联蛋白A7(annexin A7)的shRNA(small hairpin RNA)稳定转染的小鼠肝癌细胞株Hca-F,为后续研究奠定基础.方法:构建3条针对annexin A7的shRNA(shRNA1、2、3),分别与pSilencer连接,构建表达载体并分别转染Hca-F细胞,在mRNA和蛋白质水平比较3条shRNA对annexin A7表达的抑制作用,筛选抑制效果最好的shRNA转染Hca-F.稳转后用含400 μg/ml G418的完全培养基筛选,获得annexin A7表达稳定下调的Hca-F细胞株后传代扩增,应用Western印迹法检测Hca-F细胞annexin A7蛋白的表达,并与空载体转染组及正常对照组进行比较.结果:经DNA测序鉴定,所得到干扰序列与GenBank中序列一致;筛选出其中shRNA1对annexin A7的表达抑制效果最好.pSilencer-shRNA1转染Hca-F细胞株后,annexin A7蛋白的表达远低于空载体转染组和正常对照组(0.318 6 vs 0.798 7,0.824 3,P<0.05),而后二者间无统计学差异.结论:成功建立了annexin A7表达稳定下调的小鼠肝癌Hca-F细胞株,为后续研究奠定了基础.