发色底物法在酶促反应初速度内测定α1抗胰蛋白酶的活性

目的：优化发色底物法,使其在酶促反应初速度内测定α1抗胰蛋白酶（ AAT）的活性并用于血浆蛋白纯化过程中各样品活性的检测。方法采用酶标仪动态监测模式观察酶浓度和反应时间对酶促反应的影响;计算初速度并确定被底物饱和的最大酶浓度。将AAT与胰蛋白酶孵育,剩余靶酶和底物作用产生的光密度可反映AAT的活性。通过△D与AAT标准品活性进行拟合建立标准曲线,测定相关样品的活性,进行精密度和准确度验证。结果胰蛋白酶浓度为0．0625 mg／ml,20 min内酶促反应处于初速度内。 AAT标准曲线范围为200～1200 IU／ml, r＞0．99。该法测定Cohn Ⅳ、前处理液、洗脱峰样品中AAT的活性分别为（720．59±18．63）、（601．84±19．18）、（568．09±24．83）IU／ml。每个样品之间的RSD＜10％,加样回收率均在90％～110％。结论发色底物法经优化后,准确度和精密度大幅度提高,更适于实验室制备AAT或不同生产阶段样品的活性检测。     

α2－巨球蛋白活性检测方法的建立与优化

目的：建立α2－巨球蛋白（α2－macroglobulin ,α2－M）活性检测方法,检测Cohn组分Ⅳ中α2－M的活性。方法α2－M可与胰蛋白酶相互作用形成“α2－M－胰蛋白酶复合物”,利用酶标仪检测出“α2－M－胰蛋白酶复合物”与小分子底物Na－苯甲酰－DL－精氨酸－对硝基酰胺盐酸盐（ Na－benzoyl－DL－arginine 4－nitroanilide hydrochloride ,BAPNA）显色反应后的光密度值（410 nm）,根据建立的血浆α2－M活性标准曲线,定量计算出Cohn组分Ⅳ浓缩液中α2－M的活性。结果通过对实验体系中几个关键实验条件进行优化,建立了血浆α2－M活性标准曲线,并计算出Cohn组分Ⅳ浓缩液中α2－M活性的平均值为1．578 PU／ml。结论以正常人混合血浆作为参考标准品,用发色底物法检测Cohn组分Ⅳ浓缩液中α2－M的活性,方法简便易行,为α2－M制备过程中活性测定提供了实验基础。     

液相色谱-串联电喷雾离子阱质谱法研究人尿中埃坡霉素D的主要代谢产物

目的：研究埃坡霉素D在人尿中的主要代谢产物。方法：受试者6名静脉滴注埃坡霉素D,收集0～72h尿样,经SPE固相萃取小柱分离纯化后,采用液相色谱-串联电喷雾离子阱质谱法（LC—MS^n）对样品进行分析,通过比较空白尿样和给药后的尿样的总离子流色谱图和选择离子扫描色谱图,分析可能的代谢产物。代谢产物的结构鉴定主要依据代谢产物的各级质谱图与原药的各级质谱图的相关性推断所得。结果：在人尿中共检测到11种主要的代谢产物,根据所提供的代谢产物标准品鉴定出3种代谢产物的结构,代谢方式主要有氧化、还原、水解和结合反应。结论：本方法选择性好,为深入研究埃坡霉素类药物在人体内的代谢规律提供了可靠的方法和可参考的依据。     

32例绞窄性疝一期手术探讨

目的探讨绞窄性疝引起绞窄性肠梗阻和肠坏死行一期高位结扎术加修补术的可行性。方法对我院三十二例绞窄性疝引起急性绞窄性肠梗阻和肠坏死,术中使用抗生素,行一期手术治疗。结果术后未出现切口感染,随访1—10年远期未发现复发病例。结论对绞窄性斜疝病例术中、术后正确使用足量有效抗生素,同时行一期疝修补术能取得成功。     

胃十二指肠溃疡穿孔手术方式选择

目的对胃、十二指肠溃疡穿孔患者选择何种手术方式来解除急腹症、减少近远期并发症进行评估。手术治疗是针对溃疡穿孔造成的腹腔污染，采取积极措施清除腹腔渗出，闭合穿孔或去除病变，以达到抢救生命及治疗溃疡的目的。方法在解除急腹症基础上行十二指肠溃疡穿孔修补术或胃大部切除术。结果所有病例无出现近远期严重并发症。结论胃、十二指肠溃疡穿孔术式的正确选择有利于急腹症病人急性期恢复，减少并发症、降低死亡率。     

GM-CSF对诱导人血管内皮细胞血管形成的影响及VEGF的作用

目的： 研究炎性因子粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）对诱导人血管内皮细胞血管形成的影响及血管内皮生长因子（VEGF）的作用，为探讨GM-CSF和VEGF与动脉粥样硬化斑块内血管新生及斑块稳定性之间的关系提供实验基础。方法： 在 Matrigel上诱导人脐带静脉内皮细胞（HUVECs）形成管腔结构，从而建立稳定的血管形成的体外培养体系，然后施加实验因素。分别检测rhGM-CSF的浓度效应和时间效应，及加入VEGF165的作用。然后各实验组用CD34免疫细胞化学染色，光学显微镜下计数各组管腔数。最后用统计学方法进行分析。结果： 应用Matrigel可在体外诱导培养的HUVECs形成管腔结构。rhGM-CSF作用后，培养体系的管腔数逐渐增多，呈剂量及时间依赖效应；加入VEGF165后，管腔数显著增多。结论： 应用Matrigel可在体外诱导培养的HUVECs形成管腔结构。GM-CSF可以促进体外诱导人血管内皮细胞血管形成，并在一定范围内呈剂量及时间依赖效应。VEGF可以促进体外诱导人血管内皮细胞血管形成。     

Luschka关节对下颈椎稳定性影响的生物力学实验研究

目的：测试Luschka关节在仿生理状态脊柱功能单位（functiona lspinal unit,FSU）伸、屈活动时对下颈椎稳定性的影响。方法：自外伤致死新鲜尸体下颈段截取32个脊柱功能单位（FSU）,随机抽样,将32个标本均分Ⅰ、Ⅱ两组,Ⅰ组切除双侧Luschka关节,Ⅱ组保留Luschka关节,两组标本分别进行力学测试,根据White下颈椎临床不稳诊断评分标准,研究Luschka关节对维持下颈椎稳定性影响。结果：Luschka关节具有限制椎体向侧方移位（P〈0.05）及在下颈椎生理范围伸、屈活动时限制上椎体向侧方移位（P〈0.05）和旋转（P〈0.01）的作用。结论：Luschka关节对下颈椎稳定性有显著的影响,Luschka关节是下颈椎维持稳定的重要结构。     

重组人生长激素在猕猴体内相对生物利用度研究

目的评价重组人生长激素（rhGH）冻干粉针剂受试制剂与参比制剂在猕猴体内的相对生物利用度。方法猕猴随机分成两组，运用交叉设计方法，先后接受皮下注射受试制剂或参比制剂0．5IU·kg^-1，测定不同时间点生长激素血药浓度，并进行相关药动学参数分析。结果受试制剂与参比制剂的主要药代动力学参数Tmax分别为（3．0±1．4）、（2．3±1．8）h；Cmax分别为（173．2±79．0）、（159．0±41．3）μg·L^-1；AUC（0-12h）分别为（1139±258）、（1108±390）μg·h·L^-1；结论受试制剂的相对生物利用度为（107±16）％。     

护理教师在循证护理教育中的作用

1护理教师在循证护理教育中的作用 循证护理（Evidence—basedNursing，简称EBN）是近年来随着循证医学的发展而出现的一门新兴的护理观念和护理模式，其基本内涵是慎重、准确和明智地应用当前所能获得的最好的研究证据，结合护理专业技能和多年临床经验，并考虑病人的价值和愿望，将三者有机地结合在一起，制定出病人的护理措施。由于这一理念具有很强的科学性，强调将个人经验和临床研究证据紧密地结合在一起，强调病人的参与意识，因此，很快在各国护理领域中推广开来。而循证护理实践（Evidence—based Nursing Practice，简称EBP）就是将循证护理的理念运用到护理实践中的护理活动。     

整体护理在围手术期的应用

随着现代医学的发展,我国护理工作也要与国际接轨。整体护理是医学模式转变而产生的一种护理方法。它以现代护理为指导,以护理程序为核心,强调护理工作由护理疾病转向护理人为中心的整体护理。笔者在围手术期的整体护理中引用的理论体系是人的基本需要层次论。这一理论体系使这