登革1型病毒荧光定量PCR快速检测

目的建立登革1型病毒的快速特异的荧光定量PCR检测方法。方法设计登革1型病毒特异的引物和TaqMan探针,制作标准曲线,并检测其特异性、重复性、再现性和敏感性,采用荧光定量PCR和常规PCR对临床标本进行检测比较。结果成功构建了标准曲线,回归方程为Y=-3.410logX+45.10,相关系数R2=0.999,扩增效率Eff=96.5%,灵敏度可达103 copies/mL,此荧光定量PCR方法对登革1型病毒检测高度特异,与其他3型登革病毒和乙型脑炎病毒之间并无交叉反应;采用登革病毒种特异引物探针和本研究建立的登革1型病毒型特异引物探针对166份cDNA样本进行荧光定量PCR检测,均发现126份为阳性,阳性率均为75.9%,Ct值为20.84～36.36,浓度范围为1～1.3×104copy/μL;常规PCR方法检测到其中36份为阳性,阳性率为21.7%。结论荧光定量PCR方法能够快速灵敏地检测登革1型病毒,并能实现对病毒滴度的绝对定量。     

登革病毒感染湿热证小鼠模型的建立

目的:根据中医理论建立登革热湿热证动物模型,并对模型加以评价。方法:采用复合因素:高糖高脂饲料+高温仓+感染因子登革病毒(DEN),建立研制登革病毒感染的小鼠模型,观察小鼠一般生物学状态、临床表现及实验室检查指标,并给予中药方剂进行治疗。从病因、症状、体征、实验指标及中药治疗反证等方面评价模型。结果:动物模型符合登革热病的特点,未改变登革热模型的关键指标(湿热毒组病毒测定G值:32.70),同时模型小鼠出现明显湿热证客观指标的变化(P<0.01),经中药复方治疗后,上述指标得到明显的改善。结论:在中医理论指导下采用复合因素接种DEN,可建立小鼠感染模型,为研究中医药治疗登革热的效果和机制提供了较为合适的动物模型。     

导诊护士应具备的语言修养

随着社会的进步,医学模式和护理观念的转变,护士除了要有过硬的专业技术,良好的护理素质和职业道德外,还要善于与患者沟通[1]。而沟通则离不开语言交流,语言可反映出一个人的文化素养和精神面貌,也是导诊护士的外在表现。它不仅会影响到导诊护士的人际关系,也会关系到导诊护士在患者心目中的形象。患者可以从导诊护士的语言修养中评价导诊护士及决定对其信赖的程度,因此,导诊护士的语言修养甚为重要。     

应用电针疗法联合中药疗法及康复训练治疗脑梗死的效果研究

目的 :探讨分析应用电针疗法联合中药疗法及康复训练治疗脑梗死的临床效果。方法 :选取2013年8月至2014年7月间我院收治的脑梗死患者46例作为研究对象,采用随机数字表法将其分为对照组(23例)和研究组(23例),单纯应用电针疗法为对照组患者进行治疗,应用电针疗法联合中药疗法及康复训练为研究组患者进行治疗,观察对比两组患者的临床疗效,并将对比的结果及两组患者的临床资料进行回顾性的分析。结果 :在研究组23例患者中,临床疗效判定等级为基本痊愈的患者有10例(占患者总数的43.48%),临床疗效判定等级为显效的患者有7例(占患者总数的30.43%),临床疗效判定等级为有效的患者有4例(占患者总数的17.39%),临床疗效判定等级为无效的患者有2例(占患者总数的8.70%),治疗的总有效率为91.30%;在对照组23例患者中,临床疗效判定等级为基本痊愈的患者有6例(占患者总数的26.09%),临床疗效判定等级为显效的患者有4例(占患者总数的17.39%),临床疗效判定等级为有效的患者有6例(占患者总数的26.09%),临床疗效判定等级为无效的患者有7例(占患者总数的30.43%),治疗的总有效率为69.57%。研究组患者的临床疗效明显优于对照组患者,差异显著(P<0.05),具有统计学意义。结论 :应用电针疗法联合中药疗法及康复训练治疗脑梗死的临床效果显著,值得在临床上推广应用。     

黄热病毒实时荧光定量PCR方法的建立

目的 建立黄热病毒的实时荧光定量PCR检测技术,以实现黄热病毒感染早期的筛选和检测.方法 以带有黄热病毒基因质粒为阳性模板,采用TaqMan探针法,制作标准曲线,以实现对黄热病毒的简单快速的高灵敏度、高特异性实时检测.结果 该方法检测的最低拷贝数可以达到3.457 copies/μl.组内及组间变异系数均低于5％,证明该方法具有良好的敏感性及稳定性.以1～4型登革病毒和乙脑病毒基因组为模板,检测结果为阴性,证明该方法有良好的特异性.结论 该方法可快速、灵敏、特异、定量检测黄热病毒,能用于黄热病毒感染的早期诊断.     

4种血清型登革病毒NS1蛋白序列及B细胞抗原表位特异性分析

目的比较4种血清型登革病毒NS1蛋白型特异性抗原表位基因序列及氨基酸序列之间的差异,为利用基因差异进行血清学分型及疫苗研究提供新的线索。方法利用DNAstar数据包中的Editseq程序,从20株登革病毒分离株的全基因组序列中将NS1基因型特异性抗原表位序列截取出来,再用ClustalX软件进行多序列比对,进行同源性分析,找出型内最为保守的抗原表位序列。并将比对结果在120株登革病毒序列中进一步验证。结果 NS1蛋白36～45和71～85位氨基酸为型特异性抗原表位,高度保守,型内完全相同,型间不同。结论 NS1蛋白36～45位氨基酸可以作为登革病毒血清分型和研制亚单位疫苗的靶标。     

一种可用于多DNA片段连接的新SOE-PCR方法

目的 通过对重叠延伸PCR技术的改进,建立一种可用于多DNA片段连接的SOE-PCR方法 .方法 扩增获得相互重叠的1.8、1.1、1.3 kb的短片段,以之作为亚片段模板.在SOE-PCR反应体系中加入不同数量用于重叠的亚片段模板及延伸所得目的 长片段扩增所需的外引物,同时加入了稀释100倍的内引物,使得亚片段模板在扩增过程中能动态达到最佳重叠延伸浓度.结果 获得了特异性强、丰度高的两段连接产物,与原有的SOE-PCR方法相比,大大减小了反应的非特异性条带扩增,产物丰度也优于传统的扩增方法 .采用同样方法尝试了单管反应对三个片段进行连接,获得了总长度为4.2 kb的长片段,且实验重复性、特异性好.结论 本研究以相互重叠的多个短片段为模板,实现多片段的连接和扩增,可降低受模板浓度条件的影响的实验操作难度.多片段连接时减少了操作步骤和突变几率,可广泛用于多DNA片段连接操作.     

两种品系小鼠建立登革病毒感染的湿热证模型研究

目的 建立两种不同品系小鼠登革病毒感染的湿热证模型,并比较感染情况差异,确定适合造模的小鼠。     

欣洛维外用治愈糖尿病难治性皮肤溃疡1例

糖尿病是一种慢性代谢性终身性疾病,该类病人抵抗能力差,病情恢复缓慢。我科曾收治1例糖尿病人皮肤烫伤后破溃致局部溃疡久治不愈,后用欣洛维换药短期治愈,现介绍如下。1 病例介绍 患者,男,61岁。因多饮、多食、消瘦乏力14年,左踝部皮肤烫伤破溃35天而入院。入科时血糖为27.8mmol/L,     

术前访视在心脏外科ICU中的应用效果

目的探讨术前访视在心脏外科ICU(CICU)中的应用效果。方法将113例施行体外循环心内直视手术,术后入CICU的成人患者按入院日期单双号随机分为2组:对照组(55例)由病房护士和手术室护士给予术前常规指导;试验组(58例)在对照组基础上由CICU专职护士给予术前访视。结果试验组的遵嘱行为明显高于对照组(P<0.01);机械通气的时间与入住CICU的时间明显短于对照组(P<0.05),术后满意度明显高于对照组(P<0.01)。结论术前访视有利于减轻患者焦虑状态,降低ICU谵妄的发生,使患者更好的配合护理工作,缩短了住院时间,同时也提高了患者的满意度,减少了护患之间的矛盾,值得临床上广泛应用。