胞外体的多重作用

Exosome又称胞外体，是由细胞多泡体（MVB）与质膜融合并把其内含小泡排泌到细胞外而形成的一群膜性小囊泡。Exosome参与多种生理、病理过程。特别是抗原提呈细胞（APC）分泌的Exosome富含MHCⅠ／Ⅱ类分子、协同刺激分子、热休克蛋白70～90等抗原提呈相关分子，具有抗原提呈功能；肿瘤细胞来源的Exosome含有多表位肿瘤抗原，能诱发特异性的细胞毒性T细胞。Exosome有望作为新一代生物医学基础研究和应用开发的技术平台，近年来引起了学者的广泛关注。现就Exosome的起源、生物学特征与功能作一综述。     

乳腺癌MDA-MB-231细胞源Exosomes对内皮细胞增殖的影响及MAPK/ERK和PI3K/Akt信号通路的作用

目的研究人乳腺癌MDA-MB-231细胞源Exosomes对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的促增殖作用,并初步探讨MAPK/ERK和PI3K/Akt信号转导通路在此过程中的作用。方法低温超速离心及密度梯度离心法提取乳腺癌MDA-MB-231细胞源Exosomes。采用MTT法分别检测50、100、200、400μg/ml Exosomes对HUVECs促增殖作用的影响,流式细胞仪测定200μg/ml Exosomes对HUVECs细胞周期的影响,Western blotting检测200μg/ml Exosomes诱导下HUVECs细胞内细胞外调节蛋白激酶(ERK)和蛋白激酶B(Akt)蛋白的表达水平。结果乳腺癌MDA-MB-231细胞源Exosomes可促进HUVECs细胞增殖,且呈时间和剂量依赖性。200μg/ml Exosomes作用HUVECs细胞24h后,S期细胞比例(27.8%±3.37%)较对照组(15.34%±0.71%)增加(P<0.05),G1/S期细胞比例(2.22%±0.37%)与对照组(4.67%±0.47%)比较下降(P<0.05)。Western blotting结果显示,200μg/ml Exosomes作用HUVECs细胞24、48、72h后,磷酸化ERK表达(0.3378±0.0415,0.4967±0.0511,0.9205±0.0462)与磷酸化Akt蛋白表达(0.4091±0.0361,0.5484±0.0382,0.7496±0.0481)与对照组(磷酸化ERK 0.1836±0.0324,磷酸化Akt 0.2582±0.0215)相比有所增加(P<0.05)。结论乳腺癌MDA-MB-231细胞源Exosomes能促进HUVECs的增殖,其机制可能与细胞周期改变,以及MAPK/ERK和PI3K/Akt信号通路的持续活化有关。     

乳腺癌MDA-MB-231细胞源exosomes对血管内皮细胞EGFR表达的影响

目的研究人乳腺癌MDA-MB-231细胞源exosomes介导表皮生长因子受体(EGFR)对人脐静脉内皮细胞株(HUVECs)EGFR表达影响,探讨肿瘤组织血管内皮细胞异常表达EGFR的机制。方法超速离心及密度梯度离心法提取MDA-MB-231细胞源exosomes;免疫细胞化学法检测MDA-MB-231细胞EGFR的表达;Western blot法检测MDA-MB-231细胞、exosomes及HUVECs EGFR蛋白表达;免疫细胞化学法检测HUVECs与exosomes共培养24h后EGFR的表达;RT-PCR法检测MDA-MB-231细胞与实验组HUVECs细胞EGFR mRNA的表达。结果 EGFR在MDA-MB-231细胞中呈高表达,MDA-MB-231细胞及exosomes可见相对分子质量为170×103的EGFR蛋白呈阳性反应带,HUVECs呈阴性反应带;HUVECs与exosomes共培养24h后,镜下可见实验组部分HUVECs细胞质有淡黄色或棕黄色颗粒,EGFR阳性表达率为(21.4±3.1)%,与对照组(无EGFR蛋白表达)比较,差异有统计学意义(P<0.01)。MDA-MB-231细胞EGFR mRNA表达阳性,而实验组HU-VECs EGFR mRNA表达阴性。结论 MDA-MB-231细胞源exosomes携带癌基因EGFR,并能介导其向周围血管内皮细胞转移,这可能是肿瘤内皮细胞异常表达EGFR的一种方式。     

丝裂霉素、5-氟尿嘧啶、三苯氧胺联合应用对人乳腺癌细胞株的作用

目的观察丝裂霉素 (mitomycin ,MMC)、5 氟尿嘧啶 (5 fluorouracil,5 Fu)、三苯氧胺(tamoxifen ,TAM)联合应用对人乳腺癌细胞株MCF 7和MDA MB 4 35S的作用。方法采用MTT法 (四甲基偶氮唑蓝比色法 ,3 (4,5 dimethyl 2 thiazoly) 2 ,5 diphenyl 2H tetrazolium bromide)利用中效原理判断药物联合应用的效应。结果MMC、5 Fu单用及联合应用时 ,随着药物浓度增加其效应也增加 ;TAM与MMC、5 Fu合用时 ,TAM +MMC中效浓度为 1 6 5× 10 -5mmol/L ,TAM +5 Fu中效浓度为 0 0 32 6mmol/L ,对MCF 7细胞作用加强 ,而对MDA MB 4 35S细胞作用不明显 ;MMC与5 Fu高浓度合用时呈协同作用 (CI <1) ,低浓度时呈拮抗作用 (CI >1) ;两药合用时浓度比例变化及给药时间次序对效应影响不大。结论TAM与MMC、5 Fu合用时 ,对MCF 7细胞作用加强 ,而对MDA MB 4 35S细胞作用不明显。     

浅议病理生理学教学改革

本文从病理生理学理论和实验教学两个方面论述了病理生理学方法的改革与实践。教学模式变学生被动为自主学习，在传授知识同时注重培养学生自学创新能力。     

抗Ⅳ型胶原单克隆抗体CⅣ的研究与鉴定

用人胎盘Ⅳ型胶原免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，以杂交瘤技术建立了一株能稳定分泌抗ＣｏｌⅣ单抗（ＩｇＧ亚类为ＩｇＧ１）的杂交瘤细胞株。其染色体众数为８７。用胚胎及成人组织的免疫组化（ＡＢＣ－ＡＥＣ法）显示：皮肤，肾小球，肾小管，血管内皮，乳腺，肺组织，胎盘，眼球角膜的基底膜均呈特异性阳性染色，命名为ＣⅣ。此抗体的制成，对于较理想，可靠地显示基底膜，判断肿瘤的良恶性及探讨其浸润机制有重要意义。     

病理生理学重点课程建设

本文介绍了重庆医科大学病理生理学重点课程建设在师资培养、教学管理、教学改革等方面所做的工作。     

医学生对大学英语四、六级考试改革看法的调查分析

通过分析医学专业学生对大学英语四、六级考试及改革措施看法,为英语考试改革提供参照。随机选择300名本科学生作问卷调查。发现四、六级考试和证书的重要性有扭曲膨胀的趋势,改革势在必行;同时,大学生们普遍承认汉语水平下降。英语四、六级考试和其改革内容与当代大学生的意愿具有较高的契合度。     

Anti-tumor Effect and Its Mechanisms of Ursolic Acid on Human Esophageal Carcinoma Cell Eca-109 in Vivo

Objective:To investigate the anti-tumor effect and possible mechanisms of ursolic acid on human esophageal carcinoma in vivo.Methods:A transplanted tumor model by injecting Eca-109 cells into subcutaneous tissue of BALB/c nude mice was established.40 nude mice bearing tumors were randomly divided into 4 groups and 0.2 ml saline or 0.2 ml ursolic acid(25-100 mg·kg-1.d-1)was injected into abdominal cavity respectively once everyday and lasted for fourteen days.The changes of tumor volume were measured continuously and tumor inhibition rate was calculated.The morphological changes of apoptosis were observed by electron microscope.The expressions of COX-2,bcl-2 and Bax protein in transplanted tumors were detected by immunohistochemistry.At last the PGE2 level of transplanted tumors was detected by radioimmunoassay.Results:Treatment of nude mice with 25,50,or 100 mg·kg-1.d-1 of ursolic acid significantly inhibited the growth of the human esophageal carcinoma tumor in nude mice and induced Eca-109 cells apoptosis as demonstrated by electron microscopy analyses.The expressions of COX-2 and bcl-2 in the transplanted tumors were decreased in ursolic acid groups,while the Bax increased.The PGE2 level of transplanted tumors was decreased in ursolic acid groups with a dose-related manner.Conclusion:Ursolic acid has anti-tumor effects against human esophageal carcinoma cells in vivo,which are likely mediated via induction of tumor cell apoptosis and inhibition of COX-2 and PGE2.     

原发性肝癌血清糖抗原50的检测及意义

目的 探讨血清糖抗原５０（ＣＡ５０）检测在原发性肝癌诊断中的价值。方法 采用ＩＲＭＡ方法检测３８例原发性肝癌患者血清ＣＡ５０水平,并与４３例良性肝病及２０例正常对照对比分析。结果 肝癌患者血清ＣＡ５０明显高于良性肝病组及正常对照组（Ｐ〈０．０５）。ＣＡ５０诊断肝癌的敏感性为５７．８％,与ＡＦＰ联合检测诊断肝癌的敏感性可由单纯测定ＡＦＰ的６５．７％提高到８９．４％。结论 在原发性肝癌中,血清ＣＡ５０