肌萎缩侧索硬化症发病机制的遗传学研究进展

肌萎缩侧索硬化症(amyotrophic lateral sclerosis,ALS)是一种罕见的累及上、下运动神经元的神经退行性疾病,临床表现为肌肉进行性无力、萎缩,患者最终因吞咽、呼吸困难而死亡。ALS的病因众多,其中遗传因素相关性极大。神经元中蛋白质内稳态失衡、异常蛋白质的朊病毒样增殖和传播、线粒体功能障碍、谷氨酸介导的兴奋性毒性、神经元内物质运输障碍是目前公认的发病机制。对发病机制相关基因突变的研究将搭起ALS分子水平研究和细胞水平研究的桥梁,从而加深对ALS的发生和发展及基因突变在其中扮演角色的了解,并为疾病的治疗提供新的思路与启示。     

新型隐球菌性脑膜炎51例临床分析

新型隐球菌性脑膜炎(CM),虽是最常见的颅内真菌感染,但临床并不常见.由于各种原因,此病极易误诊,病死率极高,现就1992年至2004年收集的51例新型隐球菌性脑膜炎的临床资料总结如下.     

自噬在Duchenne型肌营养不良中的研究

目的检测Duchenne型肌营养不良症(DMD)患者骨骼肌中LC3和p62的表达情况,分析自噬在DMD骨骼肌细胞坏死中的作用。方法收集2008年1月~2015年5月在我院就诊的病理确诊为DMD的患者(DMD组,81例),另以怀疑为肌病,但肌肉病理未见明显病变者为对照组(6例)。所有入选者均行心肌酶学、肌电图、骨骼肌活检常规组织学和酶学染色、抗dystrophin-N,-C,-R和抗dysferlin免疫组织化学染色。检测其中6例DMD患者及对照组骨骼肌中LC3和p62的表达。结果 81例DMD患者均为男性,起病年龄(4.60±2.35)岁,首发症状多以双下肢起病为主。血清肌酸激酶值的高峰出现在患者年龄的6~8岁,随着肌细胞明显坏死,肌酸激酶水平下降,但仍高于正常。在DMD患者骨骼肌中,组织病理均示典型肌营养不良改变。半定量Western blot提示DMD患者骨骼肌中LC3-II的表达降低,而p62表达显著升高。结论自噬功能障碍可能参与了DMD骨骼肌细胞坏死的病理生理过程。     

杜兴型肌营养不良50例临床及病理分析

目的：总结分析杜兴型肌营养不良（Duchenne muscular dystrophy, DMD）患儿的临床及病理特点,旨在加强对DMD的认识,提高DMD的早期诊断率。方法：对50例通过临床表现、骨骼肌活检并进行单克隆抗体免疫组化染色确诊的DMD患儿的临床资料进行回顾性分析。结果：DMD患儿临床表现为：自幼跑步慢,爬楼、蹲起费力,逐渐出现走路姿势异常,检查发现肌酸激酶显著增高,肌电图呈肌源性损害。组织化学染色显示：50例患儿苏木精-伊红染色均可见肌纤维大小不一,圆形化,肌纤维明显变性、坏死,肌纤维不同程度再生,结缔组织增生;部分肌纤维间可见少量炎性细胞浸润。免疫组织化学染色显示：50例患儿均可见肌纤维膜dystrophins蛋白表达完全缺失,33例患儿肌纤维膜sarcoglycans（-α,-β,-γ,-δ）不同程度表达减弱。结论：对具有上述临床表现的患儿,建议行骨骼肌活检并进行单克隆抗体免疫组化染色,发现肌细胞膜上dystrophins蛋白缺失即可确诊DMD。     

脂质沉积性肌病中自噬和泛素相关蛋白表达研究

[目的]探讨自噬相关蛋白和泛素相关蛋白的表达对脂质沉积性肌病(lipid storage myopathy,LSM)的影响.[方法]选择2010年1月至2015年12月在本院就诊的LSM患者30例作为本次临床研究对象,采用随机数据表法选择其中15例作为观察组,选取同时段于本院进行健康体检且年龄性别相匹配的15例正常体检者作为对照组,采用Western Blot检测上述两组骨骼肌中自噬相关蛋白和泛素相关蛋白的表达情况.[结果]观察组骨骼肌中自噬相关蛋白p62、LC3 Ⅰ的表达水平显著高于对照组,而LC3 Ⅱ的表达水平显著低于对照组,且观察组骨骼肌中LC3 Ⅰ/LC3 Ⅱ的比值明显高于对照组;此外,观察组骨骼肌中泛素蛋白连接酶MuRF1、Astrogin-1和锌指蛋白ZNF216的表达水平均明显高于对照组,差异均具有统计学意义(P<0.05).[结论]人体自噬功能的抑制以及泛素化相关蛋白表达水平的升高对脂质沉积性肌病的发生发展具有诱导作用.     

大鼠脑缺血区皮层XIAP表达的动态变化及其意义

目的观察大鼠脑缺血区皮层XIAP表达的动态变化,探讨其在缺血后抗神经元凋亡过程中的可能机制。方法采用RT-PCR,免疫组化和western blot等方法分别从mRNA和蛋白水平测定脑缺血区皮层不同时间点XIAP表达的变化。结果XIAP转录水平和蛋白表达的改变呈时间依赖性;RT-PCR显示模型组大鼠在脑缺血后3h就有XIAP mRNA转录水平的明显上调,持续至24h后逐渐下降;免疫组化和western blot显示在脑缺血后6h有XIAP蛋白表达的增加,12h时XIAP蛋白表达至高峰（P〈0．01）,48h基本恢复至缺血前水平。结论XIAP在脑缺血过程中可能具有抗凋亡作用。     

神经生长因子促血管生成与神经再生的相关性研究

[目的]研究在大鼠脑缺血模型中,通过阻断粘着斑激酶(FAK)磷酸化,来抑制神经生长因子(NGF)的促血管生成作用,从而观察其对NGF促神经再生作用的影响,探讨NGF促血管生成作用和促神经再生二者的关系.[方法]雄性SD大鼠24只,随机分为四组:假手术组、脑缺血组、NGF治疗组、NGF+ TAE226(FAK抑制剂)干预组,制备大鼠局灶性永久性脑缺血模型并干预,术后d14取室管膜下区(SVZ)和海马齿状回区(SGZ)脑组织做组织切片,用荧光标记法,统计细胞增殖标记物,Brdu以及SVZ区和SGZ区神经元前体细胞标记蛋白,DCX蛋白的表达,观察神经干细胞向神经元分化的情况.[结果]假手术组和脑缺血组少见Brdu的标记阳性细胞,SVZ和SGZ区少有DCX蛋白表达;NGF组Brdu标记的阳性细胞及SVZ和SGZ区DCX蛋白表达均明显多于其他三组;NGF+ TAE226组较NGF组双标的阳性神经元数目均有较明显下降,但多于脑缺血组,且差异有显著性(P＜0.05).[结论]大鼠脑缺血后,NGF的促血管生成作用有利于缺血后神经再生.     

亨廷顿蛋白相关蛋白1与脑源性神经营养因子的胞吞关系的机制研究

目的探讨亨廷顿蛋白相关蛋白1(HAP1)与脑源性神经营养因子(mBDNF)胞吞的相关性和可能的机制。方法神经营养因子(NGF)诱导分化PC 1 2细胞,将荧光质粒HAP1A-CFP和(或)mBDNF-ds-red转染进入细胞,培养4 8 h后在含有BDNF或p7 5NTR抗体的培养基中继续培养,激光共聚焦显微镜观察荧光的表达情况及其在细胞中的定位;利用小鼠皮层神经元(正常型和HAP1基因敲除型)在生物素标记mBDNF的培养基中孵育6 0 m in,激光共聚焦显微镜观察皮层神经元免疫荧光的效果。结果共转染HAP1A-CFP和mBDNF-ds-red质粒的细胞,2种荧光蛋白存在部分共定位3 4%。共转染的细胞在抗BDNF培养基孵育下,或者单转染HAP1A-CFP质粒的细胞在mBDNF-ds-red荧光蛋白+抗BD-NF/抗p7 5NTR培养基孵育下,2种荧光蛋白几乎没有共定位现象。单转染HAP1A-CFP质粒的细胞在mBDNF-ds-red荧光蛋白培养基孵育下,mBDNF与HAP1蛋白的共定位比例高达9 3%。正常新生小鼠皮层神经元内可见内吞的mBDNF免疫荧光,HAP1基因敲除小鼠的皮层神经元内未见。结论 mBDNF的胞吞必需HAP1的表达和参与。     

急性脑血管病与代谢综合征的相关性分析

目的探讨急性脑血管病与代谢综合征的相关性。方法收集本院2008年11月~2009年1月85例(急性脑血管病45例,对照组40例)汉族住院患者的代谢指标,首先对代谢综合征与急性脑血管病进行列联表分析;其次使用二项Logistic回归分析代谢综合征的各组分与急性脑血管病发病率的关系。结果急性脑血管病的发生与代谢综合征高度相关,并首次提出了代谢综合征的组分中高血糖、高血压病、超体重与脑血管病发病率的关系式。结论预防急性脑血管病首先要有效地控制代谢紊乱,其中降低血糖,控制体重,降低血压是最为重要的三个环节。     

隐球菌性脑膜炎78例脑脊液细胞学改变

目的总结隐球菌性脑膜炎(CNM)的脑脊液标本细胞学检测资料,提高对隐球菌性脑膜炎的诊断。方法总结近6年(2003年1月至2008年7月)我院CNM的临床资料、脑脊液诊断情况。结果共78例患者,常规涂片墨汁染色首检阳性者48例(61.5%),26例(33.3%)重复送检时发现隐球菌,余4例(5.1%)墨汁染色始终呈阴性,靠隐球菌培养确诊。55例(70.5%)行细胞学检查的患者首次送检即直接找到隐球菌。结论脑脊液细胞学较常规涂片墨汁染色首检隐球菌阳性率更高。CNM的诊断有赖于脑脊液墨汁染色、细胞学检查、隐球菌培养等多种手段相结合以提高其阳性率。