沙棘籽中的原花色素化合物

沙棘Hippophae rhamnoides L.为胡颓子科沙棘属植物,广泛分布于欧亚大陆[1]。我国是沙棘属植物分布面积最大、种类最多的国家。沙棘具有祛痰、利肺、化湿、壮阴、升阳、健脾养胃与破瘀止血等多种功效[2],其化学成分研究多见于黄酮化合物[3],原花色素成分研究较少。原花色素是黄     

应用IC-RT-PCR法检测怀地黄中烟草花叶病毒(TMV)

目的: 建立一套快速、灵敏、高效的怀地黄TMV检测技术,为怀地黄TMV的脱毒检测提供技术支持,以实现怀地黄脱毒苗的产业化生产,改善病毒病引起的品种退化现象。 方法: 根据GenBank上登录的TMV外壳蛋白基因保守序列,设计特异性引物,利用免疫捕捉RT-PCR(IC-RT-PCR)技术检测怀地黄中的TMV,并对PCR扩增产物进行测序。 结果: 利用IC-RT-PCR技术扩增出了预期目的条带,其扩增产物与地黄TMV CP基因(登录号为AY555269)核苷酸序列的同源性达95.29%,氨基酸同源性达96.7%。 结论: 建立了怀地黄TMV的IC-RT-PCR检测技术,集免疫学与分子生物学检测技术于一体,灵敏度高,操作简便,适合于怀地黄TMV的快速检测。     

光甘草定通过调节ERK/IRS-1和PI3K/Akt信号通路改善HepG2细胞的胰岛素抵抗

目的 探索光甘草定改善肝细胞胰岛素抵抗（insulin resistance,IR）的作用和机制。方法 通过高胰岛素诱导人肝癌HepG2细胞建立IR模型,采用葡萄糖氧化酶法检测细胞的葡萄糖消耗量及生成;荧光标记法检测葡萄糖摄取量;蒽酮法检测糖原含量;ELISA检测葡萄糖代谢关键酶的活性;Western blotting检测磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B（phosphatidylinositol3-kinase/protein kinase B,PI3K/Akt）、细胞外调节蛋白激酶/胰岛素受体底物-1（extracellular regulated protein kinase/insulinreceptor substrate-1,ERK/IRS-1）信号通路相关蛋白以及葡萄糖转运蛋白4（glucose transporter 4,GLUT4）的表达。采用分子对接技术研究光甘草定和ERK分子间的相互作用。结果 光甘草定显著增加IR-HepG2细胞的葡萄糖消耗和摄取（P＜0.05）;通过显著提高糖原合成酶（glycogen synthase,GS）、葡萄糖激酶（glucokinase,GCK）和丙酮酸激酶（pyruvate kinase,PK）活性（P＜0.05、0.01）,促进IR-HepG2细胞的糖原合成和糖酵解;通过显著减弱磷酸烯醇丙酮酸羧激酶（phosphoenolpyruvate carboxykinase,PEPCK）和葡萄糖-6-磷酸酶（glucose-6-phosphatase,G6Pase）的活性（P＜0.05）,抑制IR-HepG2细胞的糖异生。IR-HepG2细胞经光甘草定处理后,Akt、糖原合成酶激酶-3β（glycogen synthase kinase-3β,GSK-3β）和叉头框蛋白O1（forkhead boxing protein O1,FOXO1）的磷酸化水平得到显著恢复（P＜0.01）,而这种作用被PI3K的抑制剂LY294002所逆转（P＜0.01）。同时,光甘草定显著促进GLUT4向质膜的易位（P＜0.01）。光甘草定显著降低IRHepG2细胞的ERK和IRS的磷酸化水平（P＜0.01）,还可作为ERK的I1/2型抑制剂。结论 光甘草定通过抑制ERK/IRS-1通路,激活PI3K/Akt信号通路,修复IR-HepG2细胞的糖代谢紊乱,缓解IR症状。     

滋肾活血润燥法治疗非胰岛素依赖型糖尿病的临床初探

非胰岛素依赖型糖尿病是一原因不明、有遗传倾向的代谢性疾病.临床以高血糖为主要表现.笔者认为,该病机理关键在肾,肾藏精,主水,为全身阴液的根本.阳亢,热淫、瘀血内生为其标.病本肾虚,病标为瘀、热.     

蟾毒灵诱导人宫颈癌HeLa细胞凋亡的蛋白组学研究

目的:该文通过考察蟾毒灵(bufalin)处理人宫颈癌HeLa细胞株后对细胞蛋白质表达谱的影响,寻找蟾毒灵在HeLa细胞中的可能作用靶点。方法:通过MTT检测细胞活性确定蟾毒灵的IC50,并通过流式细胞术和Hoechst 33342染色检测蟾毒灵诱导细胞凋亡。应用蛋白质组学技术寻找差异表达蛋白点并进行鉴定,用Western blotting试验进行确认。结果:蟾毒灵具有较强的细胞毒作用,IC50(154±21.5)nmol.L-1,可以诱导HeLa细胞发生凋亡。蛋白组学的结果显示蟾毒灵处理组与对照组相比有11个差异表达蛋白,其中9个蛋白点发生了下调;2个蛋白发生了上调。这些蛋白可能是蟾毒灵在HeLa细胞中的作用靶点。Western blotting分析显示heat shock protein 27,vimentin,HNRPK在蟾毒灵处理后的表达调节结果与双向电泳的结果吻合。结论:蟾毒灵可以诱导人宫颈癌HeLa细胞发生凋亡,其凋亡诱导作用可能是多个靶点蛋白共同参与的结果。     

沙棘籽原花色素寡聚体和多聚体的研究

目的对沙棘Hippophae rhamnoides籽中原花色素寡聚体和多聚体组分进行检测分析。方法采用高效液相色谱-电喷雾串联质谱技术分析沙棘籽原花色素单体和寡聚体组分,根据ESI提供的质谱信息,确定其主要的结构特征;采用Sephadex LH-20柱色谱按聚合度大小对沙棘籽多聚体组分进行分级,并通过苄硫醇酸降解反应(简称硫解)对各分级组分的组成结构特征进行分析。结果共检测到4种单体和8种二聚体。4种单体分别为儿茶素、表儿茶素、棓儿茶素和表棓儿茶素;二聚体包括3种原花青素二聚体、1种原飞燕草素二聚体和4种混合二聚体,并根据ESI提供的质谱信息,分析确定了混合二聚体组成单元的连接顺序。平均聚合度为9.1、13.2和17.0。棓儿茶素是构成各组分末端单元的主要组成成分,棓儿茶素和表棓儿茶素(合并计算)是构成各组分延伸单元的主要组成成分。结论沙棘籽原花色素结构和组成显著不同于葡萄籽原花青素,主要为原飞燕草素。     

乌梅丸合芍药甘草汤治疗慢性非特异性溃疡性结肠炎30例

笔者１９８７年以来采用乌梅丸合芍药甘草汤治疗慢性非特异性溃疡性结肠炎３０例,取得较好疗效,现总结如下。１临床资料３０例中男２３例,女７例;年龄最小２３岁,最大７０岁,平均３６５岁;病程最短１年,最长２０年,平均１０５年;全部病例均经纤维结肠镜检查...     

沙棘籽中的原花色素化合物

沙棘Hippophae rhamnoides L.为胡颓子科沙棘属植物,广泛分布于欧亚大陆[1]。我国是沙棘属植物分布面积最大、种类最多的国家。沙棘具有祛痰、利肺、化湿、壮阴、升阳、健脾养胃与破瘀止血等多种功效[2],其化学成分研究多见于黄酮化合物[3],原花色素成分研究较少。原花色素是黄     

沙棘籽原花色素寡聚体和多聚体的研究

目的对沙棘Hippophae rhamnoides籽中原花色素寡聚体和多聚体组分进行检测分析。方法采用高效液相色谱-电喷雾串联质谱技术分析沙棘籽原花色素单体和寡聚体组分,根据ESI提供的质谱信息,确定其主要的结构特征;采用Sephadex LH-20柱色谱按聚合度大小对沙棘籽多聚体组分进行分级,并通过苄硫醇酸降解反应(简称硫解)对各分级组分的组成结构特征进行分析。结果共检测到4种单体和8种二聚体。4种单体分别为儿茶素、表儿茶素、棓儿茶素和表棓儿茶素;二聚体包括3种原花青素二聚体、1种原飞燕草素二聚体和4种混合二聚体,并根据ESI提供的质谱信息,分析确定了混合二聚体组成单元的连接顺序。平均聚合度为9.1、13.2和17.0。棓儿茶素是构成各组分末端单元的主要组成成分,棓儿茶素和表棓儿茶素(合并计算)是构成各组分延伸单元的主要组成成分。结论沙棘籽原花色素结构和组成显著不同于葡萄籽原花青素,主要为原飞燕草素。