人骨髓间充质干细胞源性多巴胺神经元的结构和功能特征

背景：研究人骨髓间充质干细胞定向分化为多巴胺神经元及分化后细胞的功能特征，对细胞移植治疗包括帕金森病在内的神经精神性疾病具有重要临床意义。 目的：采用脑源性神经营养因子、forskolin及多巴胺联合诱导人骨髓间充质干细胞向多巴胺神经元定向分化，观察诱导产生的多巴胺神经元的结构和功能。 设计：随机对照观察。 单位：郑州大学及河南大学。 材料：实验于2005-03／2006-09在郑州大学和河南大学实验室完成。实验用骨髓取自15名健康志愿者。脑源性神经营养因子、多巴胺、forskolin及单克隆抗体酪氨酸羟化酶为美国Sigma公司产品。 方法：①通过密度梯度离心获取人骨髓中的单个核细胞，贴壁培养纯化骨髓间充质干细胞。采用50μmol／L脑源性神经营养因子，10μmol／L forskolin和10μmol／L多巴胺联合对骨髓间充质干细胞进行诱导。②诱导2周后应用电子显微镜观察细胞超微结构；免疫细胞化学染色检测神经元烯醇化酶（NSE）和酪氨酸羟化酶（TH）的表达；采用RT-PCR检测多巴胺神经元分化过程中转录因子Nurrl，Ptx3，Lmx1b及酪氨酸羟化酶mRNA表达；同时以未诱导的细胞为对照，应用高效液相色谱检测细胞多巴胺的释放水平。 主要观察指标：①细胞超微结构。②NSE和TH的表达变化。③细胞内关键转录因子及酪氨酸羟化酶mRNA变化。④细胞释放多巴胺情况。结果：①细胞超微结构：诱导2周后细胞胞浆中有大量密集的呈扁平囊状的粗面内质网及其间的一些游离核糖体以及神经微丝的形成。②NSE和TH表达的变化：免疫细胞化学染色结果表明诱导分化后NSE和TH阳性细胞的表达随诱导时间的延长逐渐增高（P〈0．001）。③细胞内酪氨酸羟化酶及关键转录因子变化：RT-PCR结果显示细胞均可表达Nurrl，Ptx3，Lmx1b和酪氨酸羟化酶的mRNA。④细胞释放多巴胺情况：诱导2周后的细胞多巴胺释放水平高于未经诱导的细胞，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：脑源性神经营养因子、forskolin及多巴胺可在体外诱导人骨髓间充质干细胞向多巴胺神经元分化，并具有多巴胺神经元的结构和功能特征。     

水蛭注射液通过降低白细胞浸润减轻鼠脑缺血再灌注损伤

目的:探讨水蛭注射液对缺血再灌注大鼠脑的保护机制。方法:采用颈总动脉栓线法造成大鼠脑缺血再灌注模型,观察缺血脑组织内白细胞浸润情况及脑梗塞面积的变化,检测大鼠脑匀浆超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、血清肿瘤坏死因子(TNF)的变化。结果:缺血24h时药物组脑匀浆SOD的活性显著高于对照组(P<0.01),而药物组的脑匀浆MDA和血清TNF的浓度明显低于对照组(P<0.05),药物组的脑梗塞区内白细胞浸润及脑梗塞面积也明显小于对照组(P<0.01)。结论:水蛭注射液对缺血再灌注大鼠脑有保护作用,其机制可能与抑制白细胞的浸润、减少自由基的生成有关。     

中西医结合治疗尿路感染30例

笔者采用中西医结合方法治疗尿路感染，取得了满意疗效，现报道如下。一般资料30例病例中，全部经清洁中段尿细菌定量培养及药敏（尿细菌定量≥1×10^5／ml）确诊，而且确切排除假阳性的可能。男性9例，女性21例；年龄8～70岁，平均41岁；病程最长2年，最短3天。     

针药并用治疗腰椎间盘突出症50例

笔者采用针灸和中药治疗腰椎间盘突出症50例,效果较好,报道如下。 一般资料本组男性31例,女性19例;年龄17～61岁;病程最短1天,最长7年。 治疗方法1.中药汤剂：当归20g,熟地黄20g,杜仲20g,川续断20g,赤芍15g,乌梢蛇10g,威灵仙15g,山茱萸15g,     

中西医结合治疗免疫性不孕症2062例临床观察

目的:探讨对女性免疫性不孕症患者的中西医结合治疗效果.方法:对原发及继发不孕的3496例妇女血清进行抗精子抗体(ASAb)、抗子宫内膜抗体(EMAb)、抗卵巢抗体(AOAb)、抗心磷脂抗体(ACAb)的检测,发现其阳性率分别为23.11%、34.95%、20.77%、30.41%,共发现2062例阳性.对其采用中药消抗丸加地塞米松、维生素E和维生素C进行周期性治疗,2个周期为1个疗程.结果:疗程结束其抗体转阴率均可达到85%以上,妊娠率平均达到36.66%.结论:中西医结合治疗可以减少或消除免疫性不孕症患者血清中抗体对妊娠各环节的影响,从而达到治疗不孕的目的.     

抗相思子毒素抗体的嵌合改造与功能评价北大核心CSCD

目的:制备并评价针对相思子毒素(Abrin)的具有中和活性的特异性人源化嵌合抗体。方法:从鼠源单抗中钓取抗体可变区轻重链序列4条,两两配对载入人源化IgG1表达载体pFRT-KIgG1,经表达、纯化等步骤得到4株人源化嵌合抗体;间接ELISA测定嵌合抗体与Abrin的结合力;ForteBio测定嵌合抗体与Abrin的亲和力;体外细胞学实验鉴定抗体的中和功能;无细胞体系评价抗体是否阻碍Abrin抑制荧光酶合成;选择6~8周雌性BALB/c小鼠,腹腔注射Abrin和不同浓度抗体,观察抗体的体内保护效应;流式细胞术分析抗体是否阻断Abrin与细胞的结合。结果:ELISA和ForteBio结果显示,4株嵌合抗体中仅H1L1嵌合抗体与Abrin的结合[EC_(50)=(0.1212±0.0040)μg/ml和亲和力(亲和常数3.97×10^(-10)M)]与母本抗体[EC_(50)=(0.15825±0.00235)μg/ml,亲和常数5.59×10^(-10)M]相似;体外细胞保护试验显示,H1L1[EC_(50)=(3.7455±0.0575)ng/ml]约为母本抗体[EC_(50)=(1.5825±0.5335)ng/ml]中和作用的42%;无细胞体系荧光素酶合成试验显示,H1L1[EC_(50)=(0.6729±0.0755)μg/ml]与母本抗体[EC_(50)=(1.0365±0.0045)μg/ml]接近,均能逆转Abrin抑制蛋白合成的作用;BALB/c小鼠体内中和保护实验结果显示,H1L1与10D8均能提供良好的体内保护作用;流式细胞术分析发现,H1L1并不能通过抑制Abrin黏附或进入细胞抑制其毒性。结论:4株嵌合抗体中,仅H1L1是轻、重链正确配对且拥有良好中和活性的候选抗体,有潜在的用于Abrin中毒救治的开发价值,应用前景良好。     

融合免疫学、生物化学和分子生物学综合性、设计性实验教学探讨

受河南大学实验课程的整合与创新研究项目的资助,针对临床医学专业的学生开设了"检测细胞凋亡"为主线,融合原来附属于生物化学、分子生物学和免疫学课程的实验课,收到了良好的实验教学效果。实践证明,学生对这种融合性、综合性系列实验特别感兴趣,这种实验教学模式,极大地激发了学生自主学习的积极性,在巩固和拓展了理论课学习内容的基拙上,培养了学生的科研素质、创新精神和动手能力。教学成果的取得,为医学基础实验课程的整合和教学方法的改革与创新提供了宝贵的经验。     

医学整合的现状与思考

医学整合作为生物-心理-社会医学模式的必然产物,愈来愈受到人们的重视.医学整合作为一个世界性的难题,已经有很多医学院校和医院将其付诸行动,并积极探索医学整合的方法和模式,获得了一些有益的经验和教训.但医学整合的道路是漫长而曲折的,还需要我们继续积累经验,不断修正观念,最终获得这场革命的胜利.