解剖学实验教学方法的探索

解剖学属形态学科，具有较强的直观性和实践性，但实验环境差，刺激气味大，因此在实验教学中能否充分发挥学生的主体作用调动学生的积极性，是上好解剖实验课的关键。我科室自2003年以来以调动学生学习的主动性为主导思想，对实验教学方法进行了改革，取得了较好的效果。     

Polo样激酶1基因在大鼠肝再生和肝卵圆细胞增殖中的差异表达

肝脏具有很强的再生能力,当发生轻、中度肝损害时,肝细胞可经增殖和分化等复杂过程完成肝再生;而在肝细胞大量损害或肝细胞增殖能力被抑制时,卵圆细胞可增殖并分化为肝细胞或胆管细胞.然而,目前研究结果已初步证实肝细胞癌的发生也源起于卵圆细胞,其分子机制仍有待深入研究[1-3]. Polo样激酶1(Plk1)属于保守的丝氨酸/苏氨酸激酶家族,在调控细胞周期进程和细胞分裂方面起着十分重要的作用[4-6].研究结果表明,Plk1在肝癌中的表达增强[7-8].我们在前期研究中也发现Plk1基因在肝细胞癌中差异表达[9].但是Plk1在肝卵圆细胞中的表达及其病理意义鲜见报道.本研究以二乙酰胺基芴(2-AAF)为致癌物诱导大鼠肝卵圆细胞增殖,与单纯肝再生组织进行对比分析,探讨Plk1在肝卵圆细胞中的表达及其与癌前状态的关系.     

过表达miR-302诱导结肠癌细胞促炎水平升高、线粒体氧化应激并抑制裸鼠成瘤的研究

目的 探讨过表达miR-302对结肠癌(CC)细胞促炎水平、线粒体氧化应激水平及对裸鼠成瘤的影响.方法 将CC细胞SW480随机分成空白对照组(Control组)、阴性对照组(miR-NC组)、过表达组(miR-302 mimic组);实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测miR-302表达量;酶联免疫吸附法(ELISA)检测促炎因子水平[白细胞介素(IL)-6、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)];qRT-PCR检测促炎因子mRNA表达[IL-1β、肿瘤坏死因子(TNF)-α];流式检测线粒体膜电位变化;试剂盒检测氧化应激标记物水平[丙二醛(MDA)、乳酸脱氢酶(LDH)];Western blot法检测线粒体损伤相关蛋白表达B细胞淋巴瘤-2(Bcl2)相关X与Bcl2的比值(Bax/Bc12)、裂解型含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(Caspase)-3与 Caspase3的比值(Cleaved cas3/cas3)以及 c-Myc;建立裸鼠移植瘤模型检测肿瘤组织质量;免疫组化检测caspase 3阳性表达量.结果 与miR-NC组相比,miR-302 mimic组miR-302表达量、促炎因子水平(IL-6、iNOS、IL-1β mRNA、TNF-α mRNA)、氧化应激标记物水平(MDA、LDH)、线粒体损伤相关蛋白表达(Bax/Bcl2、Cleaved cas3/cas3)及肿瘤组织 caspase 3阳性表达量均明显升高(P＜0.05);与miR-NC组相比,miR-302 mimic组线粒体膜电位、c-Myc表达量、肿瘤组织质量均降低(P＜0.05).结论 过表达miR-302诱导CC细胞炎症因子水平升高、线粒体氧化应激并抑制裸鼠成瘤.     

miR-375 靶向调控YAP表达对肝癌细胞增殖和侵袭能力的影响

[摘要] 目的：探讨miR-375 靶向调控Yes 相关蛋白（Yes-associated protein, YAP）的表达对肝癌细胞增殖和侵袭能力的影响。方法：收集2015 年1 月至2016 年12 月河南中医药大学第二附属医院普外二科行手术切除的70 例肝细胞癌（hepatocellular carcinoma,HCC）患者的癌组织及对应的癌旁组织标本，以及肝癌细胞系SMMC-7721、Hb611、HepG2 和BEL-7405，用qPCR 法检测HCC癌组织和肝癌细胞中miR-375 的表达水平。双荧光素酶报告基因检测miR-375 与YAP的相互作用；分析miR-375 和HCC患者的临床病理特征之间的关系，MTT法检测miR-375 对肝癌细胞增殖能力的影响，Transwell 小室法检测抑制miR-375 表达后HCC细胞侵袭能力的变化；Western blotting 检测HepG2 细胞中YAP的表达。建立裸鼠肝癌皮下移植瘤模型，观察抑制miR-375表达后移植瘤体积和质量的变化，免疫组化法和Western blotting 检测裸鼠移植瘤中YAP的表达情况。结果：HCC组织中miR-375 和YAP表达水平明显高于癌旁组织（均P<0.05），肝癌HepG2 细胞中miR-375 的表达水平最高（P<0.05）。miR-375 能与YAP的3’UTR特异性结合，调控YAP的表达活性。抑制miR-375 的表达后，HepG2 细胞增殖、侵袭的能力显著减弱（均P<0.05），裸鼠移植瘤体积和质量都明显减小（均P<0.05），移植瘤组织细胞中YAP的表达水平相应下调（P<0.05）。结论：miR-375 在肝癌的发生发展过程中起重要作用，可以通过靶向调控YAP的表达影响肝癌细胞的恶性生物学行为。     

CT诊断腮腺良恶性肿瘤对头颈外科的应用价值

目的：探讨CT诊断腮腺良恶性肿瘤的应用价值,对头颈外科手术的确立提供帮助。方法：收集整理我院2002年2月—2011年8月经手术病理证实的19例腮腺良性肿瘤和8例恶性肿瘤病例,分析其CT影像表现特征,判断肿瘤的良恶性并与手术病理结果对照。结果：CT诊断符合率78.6%（21/27）,其中,良性肿瘤诊断符合率78.1%（15/19）,恶性肿瘤符合率75%（6/8）,腮腺良性肿瘤CT常表现为形态规则,边缘清晰,多位于腮腺浅叶,无侵袭性及淋巴结转移。恶性肿瘤表现为形态不规则,边缘不清晰肿块影,常累及深叶或跨深浅两叶,具有侵袭性及淋巴结转移。结论：腮腺良恶性肿瘤,在部位、形态、边缘、侵袭性、淋巴结转移等方面有显著影像学差异。CT扫描对腮腺良恶性肿瘤的定位、定性诊断具有较高的价值,CT可明确腮腺肿瘤的部位及良恶性的影像学特征,为头颈外科手术提供影像依据。     

项韧带的断层影像解剖学观察

目的 为颈部疾患的影像诊断及临床治疗提供解剖学资料.方法 采用30例成人头颈断层标本和25张正常CT、MRI片,在横、矢状断面上分别观测项韧带及其周围结构的形态变化和CT、MRI的影像学表现.结果 颈部连续横断面标本上,颈椎棘突至皮肤间,可见项韧带自上而下由窄到宽,再由宽到窄的形态学变化.在断面上测量,项韧带长(132.4&#177;0.13)mm,最大前后径(56.30&#177;0.11)mm,左右径(16.00&#177;0.16)mm,形如尖向前的三角形.CT和MRI片上,CT轴位扫描或增强扫描均可见项韧带影像,而MRI颈椎正中矢状断面快速扫描,项韧带呈底向后的梯形高信号影像.结论 正中矢状断面利于观察项韧带的整体形态学结构,横断面可较好显示其局部结构.项韧带的断层影像解剖为临床诊治项韧带及其周围结构的相关病变提供了重要的形态学依据.     

茵陈蒿汤对新生大鼠高胆红素血症的治疗作用及机制研究

目的:研究茵陈蒿汤对新生大鼠高胆红素血症的治疗作用及作用机制。方法:200只7日龄SPF级SD大鼠,随机选取36只作为正常组,其余腹腔注射胆红素诱发新生大鼠高胆红素血症,剔除不合格大鼠,选择建模成功大鼠144只随机分为模型组和茵陈蒿汤低、中、高各剂量组,各36只。茵陈蒿汤低、中、高各剂量组分别给予2、4、8 g/(kg·d)茵陈蒿汤灌胃,正常组和模型组灌胃等量的生理盐水,两周为1疗程。观察大鼠的一般行为变化,检测血清和脑组织中胆红素含量和神经元细胞膜Na~+-K~+-ATP酶活力,酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清中神经元特异性烯醇化酶(NSE)浓度,TUNEL法检测脑组织细胞凋亡率,逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测脑组织caspase-3 mRNA的表达。结果:与正常组比较,模型组和茵陈蒿汤低、中、高各剂量组大鼠给药24 h和14天后血清及脑组织胆红素浓度明显升高,脑组织神经元细胞膜Na~+-K~+-ATP酶的活性明显降低,神经元特异性烯醇化酶含量明显升高,脑组织细胞凋亡率显著升高,差异均有统计学意义(P0.05,P0.01)。给药24 h后,与模型组比较,茵陈蒿汤高剂量组大鼠脑组织中胆红素的浓度明显降低,脑组织神经元细胞膜Na~+-K~+-ATP酶的活性明显升高,差异均有统计学意义(P0.05)。给药14天后,与模型组比较,茵陈蒿汤低、中、高各剂量组大鼠血清及脑组织胆红素浓度明显降低,脑组织神经元细胞膜Na~+-K~+-ATP酶的活性明显升高,神经元特异性烯醇化酶含量和脑组织细胞凋亡率显著降低,差异均有统计学意义(P0.05,P0.01)。与同组24 h比较,茵陈蒿汤低、中、高各剂量组给药14 d后,血清及脑组织中胆红素的含量明显降低,脑组织神经元细胞膜Na~+-K~+-ATP酶的活性明显升高,神经元特异性烯醇化酶含量明显降低,差异均有统计学意义(P0.05,P0.01)。与正常组比较,模型组大鼠caspase-3 m RNA的表达显著升高(P0.05)。与模型组比较,茵陈蒿汤低、中、高各剂量组大鼠caspase-3 m RNA的表达显著降低(P0.05,P0.01)。结论:茵陈蒿汤对新生大鼠高胆红素血症有明显的治疗作用,可能通过改善新生大鼠的脑组织中Na~+-K~+-ATP酶活力,升高血清神经元特异性烯醇化酶的表达,降低脑组织细胞凋亡率及凋亡基因caspase-3 m RNA的表达来发挥作用。     

胸腹腔镜联合手术治疗食管癌应用体会

目的探讨胸腹腔镜联合治疗食管癌的可行性和近期疗效。方法胸腔镜下游离胸段食管同时清扫胸腔淋巴结。腹腔镜下游离胃并清扫腹腔淋巴结,将胃裁为管状。颈部切口将管状胃经食管床提至颈部与食管吻合。结果所有病例均在胸腹腔镜联合下顺利完成食管癌根治术,术后恢复快,并发症少。近期随访无复发。结论胸腹腔镜联合手术治疗食管癌能带给患者较小的创伤,降低术后并发症,改善患者生活质量,近期疗效满意。