阴茎原发性淋巴瘤一例报告

患者,63岁。发现阴茎肿块3d于2009年11月3日入院。查体：阴茎中部皮下、阴茎海绵体与尿道海绵体相邻处可触及约1.5 cm×1.0 cm×0.8 cm结节,中等硬度,表面光滑,基底固定,与皮肤无粘连,表面皮肤无异常,无压痛。实验室检查无异常。超声检查示肿物位于皮下,均质,与阴茎海绵体及尿道海绵体均有血管交通。CT检查腹膜后无肿大淋巴结。硬膜外麻醉下行阴茎肿物切除术,术中见肿物呈椭圆形,表面光滑,与尿道海绵体及阴茎白膜紧密粘连但未侵润,肿物与尿道海绵体有1支血管交通,与阴茎海绵体有2支血管交通,完整切除肿物。肿物切面呈暗红色、均质、细腻。病理检查：灰红色结节,1.4 cm×0.8cm ×0.6 cm,切面灰红色,质地中等。     

人sCD40L-Ig重组腺病毒载体的构建、表达及功能检测

目的:构建含有分泌型人胞外区CD40L融合蛋白(sCD40L-Ig)基因的重组腺病毒载体,确定其表达和功能学意义。方法:通过PCR获得人源IgGFc和sCD40L基因并予以连接,将其插入到腺病毒穿梭质粒pAdTrack-CMV中,构建重组质粒pAdTrack-sCD40L-Ig。将其与pAdEasy-1-BJ5183菌行同源重组后,用293细胞包装,通过观察绿色荧光蛋白(GFP)和Western blot分析等方法鉴定重组腺病毒,并进行双向混合淋巴细胞反应(MLR)以确定其功能。结果:所构建的sCD40L-Ig基因的重组腺病毒,经酶切和PCR鉴定正确。原代腺病毒的滴度达到2.69×1011pfu/L,并有相对分子质量(Mr)为61×103的目的蛋白表达。MLR显示,重组腺病毒对淋巴细胞的增殖有抑制作用。结论:成功地构建了含有sCD40L-Ig基因的重组腺病毒,并对MLR有抑制作用。     

茯苓素预防大鼠肾移植急性排斥反应的实验研究

目的探讨茯苓素(Poria cocos)预防大鼠肾脏移植急性排斥反应的作用和机制。方法以Wist-ar大鼠为供者,SD大鼠为受者,建立原位(腹腔)肾脏移植模型,移植前按照分组分别以生理盐水、茯苓素25mg.kg-1.d-1、茯苓素50 mg.kg-1.d-1和环孢素A(CsA)5 mg.kg-1.d-1灌胃。术后观察大鼠移植肾功能和存活时间,测定各组术后1周外周血中白细胞介素2(IL-2)和γ干扰素(IFN-γ)含量以及CD4+、CD8+细胞百分比和CD4+/CD8+的比值,并观察移植肾的病理变化。结果茯苓素50 mg.kg-1.d-1组和CsA组移植肾和受者存活时间较茯苓素25 mg.kg-1.d-1组和生理盐水组显著延长(P0.05),而且病理损害程度较茯苓素25 mg.kg-1.d-1组和生理盐水组明显减轻,但茯苓素50 mg.kg-1.d-1组较CsA组移植肾存活时间显著减少(P0.05)。各组移植肾功能和尿量变化与存活时间和移植肾病理变化相一致,茯苓素50 mg.kg-1.d-1组和CsA组肾功能异常发生时间明显晚于茯苓素25 mg.kg-1.d-1组和生理盐水组。茯苓素50 mg.kg-1.d-1组外周血IL-2和IFN-γ的含量较茯苓素25 mg.kg-1.d-1组和生理盐水组显著降低(P0.01),但显著高于CsA组(P0.01);茯苓素50 mg.kg-1.d-1组外周血CD4+细胞百分比显著低于茯苓素25 mg.kg-1.d-1组(P0.05)和生理盐水组(P0.01),CD8+细胞百分比显著低于生理盐水组(P0.05)。结论茯苓素对肾脏移植急性排斥反应有较好的抑制作用且与剂量呈正相关,但效果不如CsA。     

经膀胱路径机器人辅助腹腔镜根治性前列腺切除术13例报告

目的 分享经膀胱路径机器人辅助腹腔镜根治性前列腺切除术(TvRARP)的技术要点及体会。方法 收集2021年11月-2022年5月于西安交通大学第二附属医院行TvRARP的13例患者的临床资料。评估该术式手术时间、术中估计出血量、术中输血量、术后拔除尿管时间、术后住院时间、术后即刻尿控率、术后国际勃起功能指数-5问卷(IIEF-5)评分及围手术期并发症等。结果 13例患者手术时间为(142±39) min。术中估计出血量为(76±40) mL,无患者输血。术后中位IIEF-5评分16(12～22)分，术后中位住院时间3(2～5) d。术后中位拔除尿管时间7(5～14) d,其中12例(92.3%)患者拔除尿管后实现即刻尿控。无ClavienⅢ级及以上并发症发生，ClavienⅠ～Ⅱ级并发症4例(30.8%)。结论 TvRARP有较高的即刻控尿率和较佳的性功能保护作用，无严重并发症发生，适合经严格筛选的早期局限性前列腺癌患者。     

重组腺病毒介导CD40L和CTLA4Ig的共表达和对人混合淋巴细胞反应的抑制作用

CD40／CD40L和B7／CD28是两条重要的共刺激通路，在T淋巴细胞活化过程中提供共刺激信号，在自身免疫性疾病和移植排斥反应的发生、发展过程中起重要作用，干预其相互作用，可有效地预防和治疗自身免疫性疾病和排斥反应。本研究基于我们构建的重组腺病毒CIMOL-IRES-CTLA4Ig，观察其体外的共表达情况和对人外周血混合淋巴细胞反应（MLR）的作用。     

沉默组织因子重组腺病毒的构建和胰岛中沉默效果检测

目的 构建复制缺陷型重组腺病毒介导短发夹RNA(shRNA):干扰组织因子(TF)在胰岛表达.方法 设计并合成四对单链寡核苷酸(ss oligo),经变性退火为双链寡核苷酸(ds oligo)插入穿梭质粒pENTR/U6载体,测序正确后经脂质体介导入成人胰岛,通过实时定量RT-PCR方法筛选对TF沉默效果最佳穿梭质粒pENTR/U6-shRNA,然后与腺病毒骨架质粒行同源重组.筛选出正确重组子,用293A细胞包装出表达TF-shRNA的复制缺陷型重组腺病毒并测定其病毒滴度.通过实时定量RT-PCR腺病毒沉默TF效果予以检测.结果 测序结果提示所构建的pENTR/U6-shRNA质粒正确,并从四对ds oligos筛选出对组织因子沉默效果最佳的穿梭质粒pENIR/U6-shRNA,经同源重组后成功构建了介导shRNA-TF复制缺陷型重组腺病毒.转染胰岛后,通过实时定量RT-PCR方法检测发现shRNA-TF腺病毒感染胰岛后对TF mRNA的沉默效果4 d后达最佳效果,为54.29%(P＜0.05 vs NC).结论 成功构建的介导shRNA复制缺陷型重组腺病毒可以体外抑制胰岛细胞中组织因子的表达.     

伴有2型糖尿病的前列腺增生患者TURP术中应用5%葡萄糖溶液进行冲洗的安全性评价

目的研究伴有2型糖尿病的良性前列腺增生症（BPH）患者行经尿道前列腺切除术（TURP）时,5%葡萄糖溶液作为TURP冲洗液的安全性。方法收集伴有2型糖尿病行TURP术的BPH患者21例,随机收集同期非糖尿病行TURP术的BPH患者52例作为对照。采集病历资料,统计年龄、国际前列腺症状评分（IPSS）、B超计算前列腺重量。术中采用5%GS作冲洗液行TURP术,统计分析两组患者术前、术中30 min、术后30 min和术后1 d即刻血糖,进一步分析两组在手术时间、冲洗液用量、切除腺体重量方面的差异。结果两组患者组内比较,血糖值均随手术时间延长逐渐升高,与术前相比有显著性差异（P〈0.01）,但术前、术中及术后血糖比较,组间无显著性差异（P〉0.05）。无糖尿病相关的严重并发症发生。结论 TURP术中应用5%葡萄糖溶液作为冲洗液可引起血糖升高,但在充分术前准备和熟练手术操作情况下其作为冲洗液对于糖尿病患者也是相对安全的。     

共表达sCD40L-Ig和CTLA4-Ig双基因修饰原代人内皮细胞包被大鼠胰岛模型的建立

目的:建立以分离培养的原代人脐静脉内皮细胞包被大鼠胰岛细胞模型。方法:分离培养原代人脐静脉内皮细胞,并分别通过免疫组化试验检测人Ⅷ因子相关抗原,透射电镜观察Weible-palade小体,荧光显微镜观察DiI-Ac-LDL的吞噬效果,对所分离的人脐静脉内皮细胞进行鉴定。分离大鼠胰岛细胞,然后在肝素化培养皿中进行共表达sCD40L-Ig和CTLA4-Ig双基因的内皮细胞包被。对包被后的胰岛细胞进行形态学观察并检测其包被前后的功能。结果:分离培养的内皮细胞表达人Ⅷ因子相关抗原,电镜下可以观察到Weible-palade小体,荧光显微镜下可以观察到内皮细胞对DiI-Ac-LDL的吞噬。共表达sCD40L-Ig和CTLA4-Ig双基因的内皮细胞包被胰岛模型可以观察到内皮细胞的绿色荧光,未包被胰岛和内皮细胞包被胰岛的胰岛素释放指数分别为4.09和3.94,与未包被胰岛实验组相比,内皮细胞包被胰岛对高糖刺激反应无明显差异,但胰岛素释放量有所减少。结论:成功分离培养并鉴定了原代人脐静脉内皮细胞,并成功建立内皮细胞包被胰岛细胞模型,包被后胰岛功能正常。     

低分子肝素和小剂量肝素在高危出血倾向患者血液透析中的疗效比较

目的:比较小剂量肝素和低分子肝素在高危出血倾向患者血液透析中的应用及优劣. 方法:比较76例高危出血倾向血液透析患者在透析前用小剂量肝素和低分子肝素处理后动静脉瘘穿刺点压迫所需时间、透析后透析器及管路凝血情况. 并比较透析前后血小板计数、凝血酶时间(TT)、部分凝血活酶时间(APTT)变化. 结果:低分子肝素组与小剂量肝素组相比,透析后穿刺点平均所需压迫时间、透析器及管路凝血情况以及皮肤黏膜出血停止时间无差异,但潜血转阴时间较小剂量肝素组短(P＜0.05). 两组透析前各项指标差异无统计学意义,透析后结果显示血小板计数下降、TT和APTT较透析前延长(P＜0.05),其中小剂量肝素组的APTT延长比较明显(P＜0.01). 低分子肝素组较小剂量肝素组TT,APTT时间缩短(P＜0.05),但血小板计数无差异. 结论:低分子肝素较小剂量肝素用于有出血倾向患者的血液透析更具安全性.     

白藜芦醇抑制膀胱癌细胞体外侵袭能力的研究

目的探讨白藜芦醇对膀胱癌T24细胞体外迁移与侵袭能力的影响及可能的机制。方法采用划痕试验检测白藜芦醇对T24细胞体外迁移能力的影响,Transwell实验检测白藜芦醇对T24细胞体外侵袭能力的影响,Real-time PCR与Western检测白藜芦醇对MMP-2与MMP-9蛋白表达水平变化的影响。结果 30μmol/L白藜芦醇处理T24细胞24h与48h后,划痕试验发现白藜芦醇可抑制T24细胞体外迁移能力,Transwell实验证实白藜芦醇可抑制膀胱癌T24细胞体外侵袭能力。Real-time PCR与Western结果表明,白藜芦醇可从mRNA与蛋白水平抑制MMP-2与MMP-9的表达,且呈时间依赖性。结论白藜芦醇可能通过下调MMP-2与MMP-9的表达而抑制膀胱癌T24细胞体外迁移与侵袭能力,可能成为治疗膀胱癌的新策略。