高良姜不同部位胃肠解痉及镇痛作用的比较研究

目的比较高良姜水煎液及不同部位(黄酮、二芳基庚烷、挥发油)的胃肠解痉及镇痛作用,为探讨高良姜调理脾胃的药效物质基础提供依据。方法采用小肠炭末推进法观察高良姜不同部位对正常小鼠小肠运动的影响;以冰番泻叶致小鼠脾胃虚寒泄泻模型考察其抗寒证腹泻作用;采用扭体法及甲醛致痛法考察其镇痛作用;采用兔体外回肠试验观察其对正常肠肌收缩和氯化乙酰胆碱(Ach)、氯化钡(BaCl2)所致体外肠肌收缩及对Ach诱导兔回肠平滑肌内钙释放和外钙收缩的解痉作用。结果高良姜水煎液、黄酮部位、二芳基庚烷部位能明显降低脾胃虚寒小鼠的腹泻指数(P<0.01,P<0.05);仅黄酮部位高剂量对正常小鼠小肠推进运动有明显抑制(P<0.05);高良姜水煎液、黄酮部位、二芳基庚烷部位能不同程度减少小鼠的扭体次数,缩短甲醛致痛后小鼠舔后足时间(P<0.01,P<0.05),其中二芳基庚烷部位作用最强;高良姜水煎液、黄酮部位、二芳基庚烷部位能明显抑制正常情况下体外肠收缩(P<0.01,P<0.05);高良姜3个提取物的低、中、高浓度组对Ach、BaCl2所引起的体外肠收缩均有明显抑制作用(P<0.01,P<0.05),抑制率与药物终浓度呈一定量效关系;对Ach诱导兔回肠平滑肌内钙释放和外钙收缩均有明显抑制作用(P<0.01,P<0.05)。结论高良姜黄酮部位和二芳基庚烷部位为其解痉止痛治疗脾胃寒证相关疾病的主要有效部位,其中胃肠解痉作用以黄酮类较强,镇痛作用则以二芳基庚烷部位更强。     

Nobiletin对慢性低灌注损伤后小鼠脑海马神经血管单元的影响

目的观察川陈皮素(NOB)对小鼠慢性脑低灌注(CCH)模型海马区神经血管单元各主要组分的保护作用。方法昆明小鼠随机分为对照组、模型组和NOB高、低剂量处理组各10只,模型组和NOB处理组进行双侧颈总动脉结扎,对照组不结扎。术后2 w进行旷场实验及Y迷宫检测学习记忆功能,Western印迹法测定小鼠海马区神经元生长相关蛋白(GAP)-43、突触素(SYN)、水通道蛋白(AQP)4表达,检测海马神经细胞可塑性及血脑屏障功能。结果与模型组相比,NOB处理组自由活动无显著差异,其中高剂量组探索能力显著增强,逃避潜伏期显著减短(P<0.05);NOB处理组均显著增加海马区GAP-43、SYN、AQP4及Claudin-5表达(P<0.05)。结论NOB可通过对海马的神经血管单元各组分的保护作用,改善CCH所致小鼠学习记忆功能受损。     

从布渣叶中制备异鼠李素-3-O-β-D-芸香糖苷的研究

目的 从布渣叶中分离制备高纯度异鼠李素-3-O-β-D-芸香糖苷.方法 采用大孔吸附树脂富集布渣叶总黄酮,用Sephadex LH-20凝胶柱从布渣叶总黄酮中分离化合物单体,并采用IR、MS和1H-NMR、13C-NMR对其进行结构鉴定,利用TLC和HPLC对其纯度进行测定.结果 从布渣叶中分离出异鼠李素-3-O-β-...     

β-聚糖酶的诱导合成Ⅱ:初始pH值与培养温度的影响

以绿色木霉 (Trichodermaviride)LH -0 11为产酶菌株 ,利用自制复合碳源 ,对初始pH值、培养温度等因素对 β 聚糖酶合成的影响进行了研究。结果表明 :以预处理玉米芯为碳源 (浓度 15 g/L) ,调节碳氮比为 6.4,初始 pH 4.8,15 0r/min摇瓶培养 ,前期( 3 2± 1)℃培养 2 4h ,后期 ( 2 8± 1)℃变温调控培养 72h ,纤维素酶活力和木聚糖酶活力分别达到了 3 .76U/mL和 13 .95U/mL。     

倒提壶化学成分研究

目的研究民族药倒提壶（Cynoglossum amabile）的化学成分。方法用硅胶色谱技术分离化学成分,经理化常数测定、波谱解析等方法进行结构鉴定。结果分离得到7个化合物,鉴定了其中5个,分别为豆甾醇（stigmasterol,1）、正二十八烷酸（octacosanoic acid,2）、胡萝卜苷（daucosterol,3）、邻羟基苯甲酸（o-hydroxybenzoic acid,4）和3,4-二羟基苯甲酸（3,4-dihydroxybenzoic acid,5）。结论化合物2、4、5为首次从该属植物中分离得到。     

双频复合超声提取中药有效成分的动力学数学模型研究

目的:建立双频复合超声提取丹参有效成分的动力学数学模型.方法:在超声条件下的中药提取过程,当超声作用强度足够大时,扩散边界层可以无限小,以至溶质一经药材表面便迅速进入溶液主体中,可以假定整个提取过程由内扩散控制.根据Fick第二定律建立了丹参药材中的丹参酮类化合物双频复合超声强化溶剂提取过程的动力学模型.针对丹参药材颗粒大小、提取固液比对双频复合超声提取过程影响较大的因素进行了验证.结果:通过Origin软件进行数学模拟,得出拟合图形与实验值比较吻合.结论:双频复合超声条件下的丹参中药材提取过程是符合普通的提取动力学的.     

布渣叶保护急性心肌缺血损伤有效部位化学成分研究

目的 对布渣叶Microcos paniculata保护异丙肾上腺素致急性心肌缺血损伤有效部位化学成分进行研究.方法 采用硅胶、Sephadex LH-20柱色谱以及制备液相色谱等方法进行分离纯化,根据其波谱数据鉴定结构.结果 从布渣叶保护急性心肌缺血活性部位分离得到11个化合物,分别鉴定为牡荆苷(1)、异牡荆苷(2)、异鼠李素(3)、山柰酚(4)、槲皮素(5)、5, 6, 7, 8, 4''-五甲氧基黄酮(6)、5, 6, 7, 8, 3'', 4''-六甲氧基黄酮(7)、香草酸(8)、咖啡酸(9)、阿魏酸(10)、芥酸酰胺(11).结论 化合物6、7、9、11均为首次从该属植物中分离得到,其中化合物11为首次从该属植物中分离得到的脂肪酰胺类化合物,化合物6、7为首次从该属植物中分离得到的多甲氧基黄酮类化合物.     

布渣叶查耳酮合酶基因全长cDNA克隆及其表达模式分析

目的克隆布渣叶查耳酮合酶基因(Mp CHS)全长c DNA,并对其在不同部位和不同生长阶段叶片中的表达模式进行分析。方法以布渣叶叶片总RNA逆转录合成c DNA为模板,根据其转录组数据设计特异引物序列,PCR扩增Mp CHS基因全长c DNA,经质粒连接、转化、扩培,挑选阳性克隆测序、分析并构建原核表达载体。同时,采用实时荧光定量PCR(RT-q PCR)对Mp CHS基因的表达模式进行分析。结果成功克隆得到Mp CHS基因全长c DNA(Gen Bank:KY472608)。生物信息学分析表明其开放阅读框为1 176 bp,编码含391个氨基酸的蛋白,其相对分子质量为42 700,理论等电点6.11,具有CHS家族蛋白3个保守的功能活性位点(165 C、304 H和337 N)和特征多肽标签序列RLMMYQQGCFAGGTVLR和GVLFGFGPGL。系统进化树分析发现Mp CHS与可可、陆地棉等木本植物的亲缘关系比较近。RT-q PCR结果表明,Mp CHS基因在不同部位均有表达,在叶片中的表达量随着生长过程逐步降低。结论首次克隆得到Mp CHS基因,并分析了Mp CHS基因在布渣叶不同部位和不同生长阶段叶片中的表达模式,为Mp CHS基因的原核表达和功能验证奠定了基础,也为进一步解析布渣叶黄酮类生物合成途径提供了参考。     

基于数据挖掘、网络药理学、分子模拟和实验验证探究治疗糖尿病 足溃疡外用中药复方专利的用药规律及作用机制

基于国家知识产权局专利数据库,分析外用中药复方专利治疗糖尿病足溃疡（diabetic foot ulcer, DFU）的用药规律及作用机制,并通过实验验证相关结果。方法 根据纳入和排除标准检索数据库中治疗DFU 的外用中药复方专利,去重后构建DFU 外用中药复方专利集,对其进行频数、性味归经、关联规则及聚类分 析,筛选治疗DFU 的外用核心中药数据集;进一步建立疾病-核心中药-活性成分-共有靶点网络模型,通过共 有靶点建立蛋白-蛋白互作网络（protein-protein interaction networks,PPI）,利用Metascape 平台进行基因本体 （gene ontology,GO）富集分析与京都基因与基因组百科全书（Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG） 通路分析;借助分子对接及动力学模拟评估潜在关键靶标与活性成分之间的结合能力与稳定性;并基于CCK-8 法评估关键活性成分对细胞增殖的影响,利用实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR,qPCR）验证活性 成分对PI3K 及Akt 信号通路的调控作用。结果 共收集专利98 项,包含中药281 味。其中,寒性中药应用次 数最多,归肝经中药应用最多,清热类中药应用最多。通过数据挖掘获得频数前3 位的核心中药为当归、黄柏 和红花,进一步筛选得出核心中药包含活性成分85 种,其对应疾病靶点889 个;与DFU 靶点取交集后得到 166 个共有靶点,通过PPI 网络拓扑分析,确定了包括肿瘤坏死因子α（TNF-α）、过氧化物酶体增殖物激活受 体γ（PPARγ）等8 个核心靶点。GO 和KEGG 通路富集分析证实,核心中药的活性成分主要作用于炎症反应及 细胞凋亡等相关靶点,通过调控磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B（PI3K/Akt）等信号通路治疗DFU。分子对接和 动力学模拟表明关键靶点与其对应的核心成分之间具有良好的结合能力及稳定性。实验研究表明,关键活性成 分豆甾醇具有较高的生物安全性,其可明显上调PI3K 及Akt 的转录水平。结论 通过多维数据挖掘分析证实 治疗DFU 的外用复方大多具有清热解毒、活血化瘀特性,其关键活性成分豆甾醇、二氢尼洛替星主要作用于 PPARγ 及TNF-α 等DFU 靶点;豆甾醇可明显上调PI3K 及Akt 信号通路发挥治疗DFU 的效果。     

布渣叶总黄酮对大鼠急性心肌缺血的保护作用及其机制

目的 研究布渣叶总黄酮对盐酸异丙肾上腺素注射液（ISO）诱导的急性心肌缺血大鼠模型的保护作用及其机制。方法 布渣叶总黄酮（8、4、2 mg/kg）每天ig给予大鼠1次,连续给药5 d,末次给药后1 h,ISO（2 mg/kg）多点sc诱导大鼠急性心肌缺血,观察布渣叶总黄酮对大鼠不同时间点心电图及心肌组织形态学的影响;生化法检测血清中乳酸脱氢酶（LDH）、肌酸激酶（CK）活性和心肌组织中超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）水平。结果 与模型组相比,布渣叶总黄酮高、中剂量（8、4 mg/kg）组能明显对抗心肌缺血时心电图J点的下移（P＜0.05）,尤以注射ISO后10 min时的效果较明显;明显改善ISO引起的心肌病理损伤;降低血清中LDH、CK水平（P＜0.05）和心肌组织 MDA的量（P＜0.01）,提高心肌组织SOD（P＜0.01）和GSH-Px活性（P＜0.05、0.01）。结论 布渣叶总黄酮对大鼠急性心肌缺血损伤有明显的保护作用,其机制可能与提高心肌的抗氧化能力、减轻氧化应激反应有关。