具有胰岛素样活性的钒化合物研究进展

本文对具有胰岛素样活性的钒化合物理化性质、分布、生物体内测定方法、药代动力学、对糖尿病的治疗作用和毒性等几个方面加以阐述。     

LC-MS/MS方法研究新型酪氨酸酶抑制剂UP302的大鼠皮肤吸收量和皮肤代谢稳定性

目的建立大鼠皮肤中UP302定量的LC-MS/MS方法,并应用于研究UP302乳膏在大鼠皮肤局部给药24h后的皮肤吸收量,以及离体大鼠皮肤中UP302的代谢稳定性。方法 UP302用甲醇溶解稀释,皮肤样品用2倍体积甲醇沉淀处理,内标法进行定量。采用Hypersil Gold C18色谱柱,柱温30℃;甲醇为流动相A,5mmol.L-1甲酸铵水溶液为流动相B,以0.2mL.min-1梯度洗脱,进行色谱分离,运行时间6min。采用负离子电喷雾离子化电离源和选择反应监测（SRM）模式进行串联质谱分析,用于定量分析的离子反应分别为m/z 301.1→135.2（UP302）和m/z 252.9→132.0（内标大豆苷元）。结果 UP302皮肤标准样品在5～2000ng.mL-1的浓度范围内线性关系良好（r=0.9998）。UP302在大鼠皮肤匀浆中的最低定量限是5ng.mL-1。本方法日内准确度在100.00%～105.23%,日内精密度小于5.82%。结论本LC-MS/MS方法专属性强、灵敏度高、重现性好、操作简便、结果准确,可用于UP302在皮肤组织中含量的测定,以及UP302在大鼠皮肤组织中的代谢稳定性研究。     

磷酸西他列汀在大鼠体内的药代动力学研究

目的:建立超高效液相色谱-电喷雾离子源-串联三重四极杆质谱(UHPLC-ESI-MS/MS)方法测定大鼠血浆中磷酸西他列汀的含量,研究磷酸西他列汀经尾静脉单次给药后在SD大鼠体内的药代动力学过程。方法:18只SD大鼠分为3组,分别单次给予9,3,1 mg.kg-1磷酸西他列汀,按照不同时间点于眼后静脉丛采血。液质联用法测定血药浓度。质谱采用正离子和选择反应监测(SRM)模式,用于定量分析的离子分别为磷酸西他列汀m/z 408.0→235.0和内标氟西汀m/z 310.0→148.0。根据非房室统计矩模型用WinNolin软件进行曲线拟合并计算药代动力学参数。结果:大鼠分别尾静脉单次注射高、中、低剂量(93,和1 mg.kg-1)药物后,血药浓度-时间曲线下面积(AUCINF)分别为(5 154.82±637.37)(,1 729.30±290.76)和(589.39±66.92)h.ng.mL-1,剂量之比为9∶3∶1,对应的AUC比值为8.75∶2.93∶1,与给药剂量呈线性正相关性;统计结果表明3个剂量组的AUC有显著性差异t,1/2,Vz,CL,MRTlast与给药剂量无关。结论:所建立的UHPLC-M...     

药品临床前安全评价过程中供试品的 GLP 管理

药品临床前安全评价过程中供试品的管理必须符合GLP规范要求。规范的GLP管理需要设立符合条件的专职管理人员；在规定的专用保存场所对供试品进行接收、保存和分发；保存条件要确保供试品的性状稳定和安全保存；其管理原则是控制保存场所的环境条件，对接收、保存和分发过程中供试品的数量和状态进行记录，做到进出平衡，确保其性状稳定。     

多抗夹心ELISA测定人血浆普莱单抗浓度

建立多抗夹心ELISA测定人血浆普莱单抗(anti-GPIIb/IIaF(ab)2)浓度的方法并进行方法学验证.采用复合快速免疫法免疫家兔获得抗血清,经常规及普莱单抗特异性亲和层析纯化,并以人AB型血浆偶联的Sephorose 4B凝胶去除与人血浆的交叉反应.以获得的特异性多抗包板,生物素标记的该多抗为检测抗体,建立测定人血浆普莱单抗浓度的多抗夹心ELISA法,并进行了方法学验证.复合快速免疫法可在较短的时间内获得了高滴度的抗普莱单抗的多抗;利用所获得的多抗构建的ELISA试剂盒测定普莱单抗的浓度范围为1.56～50ng·mL-1,方法学认证的各项指标符合药代动力学研究的要求,为进行临窗前及临床普莱单抗药物代谢动力学研究奠定了坚实的基础,为其它单抗及高分子生物技术药物的药代动力学研究提供了借鉴思路.     

重组人^125I—CTLA4Ig在大鼠体内吸收、组织分布及排泄的药代动力学研究

目的:研究重组人单克隆抗体 CTLA4Ig 经静脉单次给药后在 Wistar 大鼠体内的药代动力学、组织分布及排泄过程,评价剂量与药代动力学参数之间的关系。方法:54只 Wistar 大鼠(雌雄各半)分为9组(雌雄各3只),3组分别单次给药(100,30,10 mg·kg~(-1),按不同时间点采血分离血浆,TCA 沉淀法测定~(125)I-CTLA4Ig 的放射强度,用所得结果评价~(125)I-CTLA41g 在大鼠体内的暴露情况,根据非房室统计矩模型用 WinNolin 药代软件进行曲线拟合并计算药代动力学参数;其余6组单次给药30mg·kg~(-1),其中4组大鼠给药后不同时间麻醉处死、解剖测定~(125)I-CTLA4Ig 组织分布,另外1组给药后收集不同时段的尿粪评价~(125)I-CTLA4Ig 的排泄过程,最后1组麻醉后插管给药收取胆汁评价胆汁排泄。结果:Wistar 大鼠分别静脉单次注射高、中、低(100,30,10mg·kg~(-1))后,T_(1/2)分别为(41.25±0.90)h、(47.25±1.79)h 和(54.81±1.96)h,CLs 与 Vss 随着剂量的减小发生减少的变化,血药浓度-时间曲线下面积 AUC_(INF)(h·μg·mL~(-1))分别为35833.37±2618.69,14171.04±1118.25,6186.85±480.35,剂量之比为10:3:1,对应的 AUC 比值为5.8:2.3:1,剂量与 AUC 成正相关性,AUC=0.524·Dose 0.5821,相关系数 R~2=0.9975,但是 AUC 的增加量小于剂量的增加量;单次静脉给药~(125)I-CTLA4Ig 30mg·kg~(-1)后,肝肾组织中~(125)I-CTLA4Ig 的含量最高,脑含量最低;120h 经尿粪排泄量占总给药量的68.98%和6.88%;胆汁在给药后28h 其排泄量相当于总给药量的5.80%。结论:在本实验的剂量范围内,剂量与 AUC 成正相关性,AUC 的增加量小于剂量的增加量,预示在以上剂量范围内 CTLA4Ig 在 Wiatar 大鼠血浆中的浓度变化可能呈非线性药代动力学特点;肾脏为~(125)I-CTLA4Ig 的主要排泄器官;胆汁的排泄量提示~(125)I-CTLA4Ig 在大鼠体内存在肝肠循环的代谢特征。     

早期肾损伤生物标志物的研究进展及其在药物肾毒性早期预测中的应用

 目的 传统肾脏毒性评价指标血清尿素氮（BUN）和血清肌酐（Cre）在肾脏损伤晚期才升高,目前迫切需要灵敏度高、特异性好、可靠性高的早期肾损伤生物标志物。方法 通过分析总结国内外文献,文中综述了美国食品药品监督管理局（FDA）和欧洲药品管理局（EMEA）共同宣布的肾脏损伤分子-1（KIM-1）等7种新生物标志物,和利用代谢组学研究方法发现的早期肾损伤可能的标志性代谢产物。结果与结论 这些新的生物标志物,检测方法通过方法学验证后,联合应用可以用于临床和非临床肾脏损伤的早期诊断,以及药物的肾毒性预测。     

HPLC法测定新型酪氨酸酶抑制剂UP302乳膏的含量及皮肤表面残留量

目的:建立测定UP302乳膏中UP302含量的HPLC方法,并应用于研究UP302乳膏在大鼠皮肤局部给药后的皮肤残留百分率。方法:采用Phenomenex Luna 5u C18(150 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,柱温35℃;流动相为甲醇-水,以1.0 mL·min-1梯度洗脱;检测波长280 nm;检测时间10 min。UP302对照品用甲醇溶解稀释,乳膏和空白乳膏基质中UP302用甲醇提取。结果:UP302在5～100μg·mL-1的浓度范围内线性关系良好(r=0.9999)。本方法日内日间准确度在98.5%～100.6%,日内日间精密度小于2.4%。结论:本方法专属性强,灵敏度高,重现性好,耐用性好,操作简便,结果准确,可用于UP302乳膏的含量测定,以及乳膏皮肤表面残留量的测定和制剂透皮吸收研究。