放射性同位素示踪技术在药物研发过程中的应用

药物的吸收、分布、代谢和排泄过程决定了药物分子在体内的过程和命运。作为常规生物样本检测技术的有效补充,放射性同位素标记示踪技术如今也被广泛应用于药物发现和开发过程中的各个阶段。特别是其高灵敏性、适用范围广的特点使其具有不可比拟的优势。通过对近年来放射性标记技术在药物评价领域中的应用进行了归纳和梳理,为药物研发相关领域研究人员提供可借鉴的参考。     

SGO-7901和MGC-803肿瘤干细胞中不同分子标志表达的观察

目的:探讨ABCG2、CD133、CK20、CyclinB1和DNA-PKcs在SGC-7901和MGC-803细胞SP(side population)亚群中的表达,探讨其为胃癌干细胞(cancer stem cell)标志的可行性.方法:用Hoe-chest33342染色检测胃癌细胞SGC-7901和MGC-803中SP细胞的比例;通过荧光免疫细胞化学染色比较ABCG2、CD133、CK20、Cyclin B1和DNA-PKcs在SP细胞与非SP细胞中表达的差异.结果:经Hoechst 33342和荧光免疫细胞化学染色显示,SGC-7901细胞中SP细胞占3.8%;SP细胞中ABCG2和CK20表达阳性的细胞比率显著低于非SP细胞,P<0.05;CD133、Cyclin B1和DNA-PKcs在SP细胞和非SP细胞中的表达差异无统计学意义,P0.05.经Hoechst33342和荧光免疫细胞化学染色显示,MGC-803细胞中SP细胞占2.9%;SP细胞中Cyclin B1的阳性表达率显著高于非SP细胞中的(P<0.05),但ABCG2、CD133、CK20及DNA-Pkes的阳性表达率显著低于非SP细胞中的,P<0.05.结论:CK20-/Cyclin B1+或CD133+可能是胃癌干细胞的特异性分子标志,而单项ABCG2、CD133、Cyclin B1及DNA-PKcs在鉴定胃癌千细胞时无特异性.     

SGC-7901和MGC-803肿瘤干细胞中不同分子标志表达的观察

目的：探讨ABCG2、CD133、CK20、CyclinB1和DNA-PKcs在SGC-7901和MGC-803细胞SP（side population）亚群中的表达,探讨其为胃癌干细胞（cancer stemcell）标志的可行性。方法：用Hoe-chest33342染色检测胃癌细胞SGC-7901和MGC-803中SP细胞的比例;通过荧光免疫细胞化学染色比较ABCG2、CD133、CK20、Cyclin B1和DNA-PKcs在SP细胞与非SP细胞中表达的差异。结果：经Hoechst33342和荧光免疫细胞化学染色显示,SGC-7901细胞中SP细胞占3.8%;SP细胞中ABCG2和CK20表达阳性的细胞比率显著低于非SP细胞,P〈0.05;CD133、Cyclin B1和DNA-PKcs在SP细胞和非SP细胞中的表达差异无统计学意义,P〉0.05。经Hoechst33342和荧光免疫细胞化学染色显示,MGC-803细胞中SP细胞占2.9%;SP细胞中Cyclin B1的阳性表达率显著高于非SP细胞中的（P〈0.05）,但ABCG2、CD133、CK20及DNA-PKcs的阳性表达率显著低于非SP细胞中的,P〈0.05。结论：CK20^-/Cyclin B1^＋或CD133^＋可能是胃癌干细胞的特异性分子标志,而单项ABCG2、CD133、Cyclin B1及DNA-PKcs在鉴定胃癌干细胞时无特异性。     

CD133、Ki-67在胃癌的表达及临床病理意义

目的:研究CDl33和Ki-67在胃癌中的表达,并探讨其与肿瘤生物学特征及患者术后生存时间的关系.方法:应用组织芯片技术,采用PV6000二步法检测有完整随访资料的336例胃癌及60例癌旁正常组织是CD133和Ki-67表达的差异.结果:胃癌CDl33和Ki-67的阳性率为57.4%.5[8]3%.CD133和Ki-67的表达均与肿瘤大小、分化程度、浸润深度、淋巴结转移数目、TNM分期和出现腹腔及远处转移相关(均P<0.05).CD133和Ki-67阳性组患者的5年生存率均低于阴性组(均P<0.05).CD133和Ki-67在胃癌的表达呈正相关(r=0.188,P<0.05).CD133和Ki-67在胃癌组织中的表达显著高于在癌旁正常组织中的表达(57.4% VS 28.6%.58.3% VS 18.6%,均P<0.05).CDl33和Ki-67均是患者术后生存时间的独立预后因子.结论:CD133和Ki-67在胃癌的发生、发展、转移及预后中发挥重要作用,可考虑作为胃癌临床评价肿瘤生物学行为及评估预后的指标.     

胃癌CyclinB1、FHIT、Ki-67的表达及临床病理意义

(X2:31.38、31.70,均P＜0.05);而FHIT在胃癌组织中的表达显著低于在癌旁正常组织中的表达(X2=7.82,P=0.005).Cox多因素分析的结果 显示,Ki-67是患者术后生存时间的独立预后因子.结论 cyclinB1、FHIT及Ki-67在胃癌的发生、发展及转移中发挥重要作用,三者可考虑作为胃癌临床评价肿瘤生物学行为及评估预后的有用指标.     

胰岛素胶囊在Beagle犬体内的药动学和药效学研究

目的研究胰岛素胶囊在Beagle犬体内药动学和药效学特征。方法 4只健康Beagle犬sc重组人胰岛素注射液以及po和内窥镜给予胰岛素胶囊,不同时间经静脉采集血浆标本,同步测定血糖水平,采用放射免疫分析法检测血药浓度。结果 4只Beagle犬自身交叉分别sc胰岛素注射液和po胰岛素胶囊或内窥镜给予内容物后,以血浆外源性胰岛素浓度计算得到的主要药动学参数,t_(1/2)分别为(0.986±0.185)、(0.649±0.508)、(0.518±0.187)h;C_(max)分别为(102.0±45.7)、(625.0±360.0)、(453.0±636.0)μU/mL;tmax分别为(0.375±0.224)、(0.750±0.289)、(0.500±0.601)h;AUC_(0-t)分别为(181.0±42.6)、(414.0±246.0)、(423.0±526.0)μU/(mL·h)。胰岛素胶囊po和内窥镜插管给药的相对生物利用度分别为(5.41±2.26)%、(8.31±9.94)%。po和内窥镜这两种途径的胰岛素胶囊在0.5~1.0 h浓度达到最大,然后在血液中的外源性胰岛素浓度逐渐降低,直至检测不到,波动范围较大;t_(1/2)基本为0.5 h左右,作用时间较短;血糖值降低的维持时间较短,回升速度快,且血糖值的波动较大。结论通过直接po和内窥镜给予胰岛素胶囊内容物,与sc短效胰岛素的结果相比,尽管口服胰岛素胶囊在Beagle犬体内吸收和消除均比较快,动物的个体差异影响较明显;但是仍然具有降糖的作用。     

分子标志物在 SGC-7901 肿瘤干细胞相关亚群中的表达

目的:寻找胃癌SGC-7901细胞株中SP(side population)亚群细胞的特异性标志物。方法:用Hoe-chest33342染色检测SGC-7901细胞株中SP细胞的比例;通过荧光免疫细胞化学染色比较DNA-PKcs、FHIT、Id2、NFκB/p65及p16在SP细胞与非SP细胞中表达的差异。结果:胃癌SGC-7901细胞中SP细胞的比例为3.8%;FHIT、Id2及p16在SP细胞中的阳性表达率显著低于在非SP细胞中的阳性表达率(P<0.001),DNA-PKcs、NFκB/p65在SP细胞和非SP细胞中的阳性表达率无显著性差异。结论:FHIT、Id2及p16可能是胃癌SGC-7901癌干细胞的特异性分子标志物,而DNA-PKcs、NFκB/p65在鉴定胃癌干细胞时无特异性。     

秦皇岛市12～15岁青少年血脂正常参考值的研究

[目的]通过对秦皇岛市12～15岁青少年血脂调查,建立秦皇岛市12～15岁青少年血脂正常值参考值.[方法]于2006年8～10月间随机选取秦皇岛市初中生4750人,应用日立7170全自动生化分析仪检测TG、TC、HDL-C和LDL-C.分别取TC、LDL-C第75及第90百分位点作为临界脂蛋白水平及高脂蛋白的浓度标准.取TG第90百分位点作为高甘油三酯血症浓度.取HDL-C第5百分点作为低高密度脂蛋白浓度,建立秦皇岛地区12～15岁青少年血脂正常参考值.[结果]秦皇岛市12～15岁青少年血脂浓度分别为TC(3.76±0.627)mmoL/L,TG(0.92±0.477)mmol/L,HDL-C(1.44±0.302)mmol/L,LDL-C(1.87±0.538)mmol/L,男生组和女生组之间HDL-C水平差异无统计学意义(P>0.05),男生组和女生组之间TG,TC和LDL-C水平差异有统计学意义(P<0.05).[结论]建议12～15岁秦皇岛市青少年血脂浓度临界标准为TC≤4.01mmol/L(男)TC≤4.32mmol/L(女)LDL-C≤2.32mmol/L(男)LDL-C≤2.53mmol/L(女)高甘油三酯血症浓度应≤1.27mmol/L(男)高甘油三酯血症浓度应≤1.36mmol/L(女)低高密度脂蛋白浓度≥1.09mmol/L.     

乙状结肠混合性腺神经内分泌癌伴肝转移临床病理观察

目的探讨乙状结肠混合性腺神经内分泌癌(MANEC)的临床病理学特征、诊断及预后,并结合文献进行分析。方法采用回顾性分析,对1例乙状结肠混合性腺神经内分泌癌伴肝转移进行镜下组织形态学观察、免疫组化检测并随访,结合国内外文献分析其临床病理特征及预后。结果患者男性,27岁。镜下见神经内分泌癌(G3)占65%,中分化腺癌成分占35%,区域淋巴结见转移;肝见转移性神经内分化癌(G3)伴坏死。免疫组化:神经内分泌癌区域和腺癌区域CK和CK19均(+);腺癌区域CK20、CEA、villin和CDX2(+);微卫星不稳定指标PMS2、MSH2、MSH6在腺癌区域(+),MHL1(-);神经内分泌区域CD56和Syn(+)。结论结直肠MANEC属于高度恶性肿瘤,容易出现淋巴结和肝转移,镜下形态和免疫组化具有特异性,但肿瘤的发生机制仍不十分明确,其治疗和预后尚需进一步的大样本研究。     

荧光原位杂交检测胃癌中HER-2基因状态

目的 探讨胃癌中HER-2基因扩增与HER-2蛋白过表达的关系.方法 运用免疫组化(IHC)和荧光原位杂交(FISH)技术,对手术切除的84例胃癌石蜡标本进行HER-2状态的检测.结果 84例中,19例HER-2蛋白(+)(22.6%),其中HER-2基因扩增7例(8.3%);12例HER-2蛋白(++++/++)(14.3%)中,HER-2基因扩增5例(6%),占高表达组的41.7%;72例HER-2蛋白(+/0)(85.8%)中,HER-2基因扩增2例(2.4%).结论 HER-2蛋白(+++/++)与HER-2基因扩增密切相关,故这类患者可考虑先做IHC初步筛选,再做FISH确诊,从而为胃癌分子靶向治疗提供有价值的信息.