黄芪丹参有效组分及其配伍抗肾纤维化的体内研究进展

近年来,中医药防治慢性肾脏病的临床实践表明：肾纤维化的发病多以气虚为本,以血瘀为标,以气虚血瘀证为关键病机,即因气虚而发病,因血瘀而致疾病迁延难愈,虚与瘀贯穿于疾病过程的始终,不可分割。因此,“气虚”、“血瘀”证是肾纤维化的常见证候,补气药、活血药是防治肾纤维化的常用药物,而黄芪、丹参则是治疗慢性肾脏病中最常见的中药之一,笔者就近年黄芪、丹参有效组分及其配伍抗肾纤维化的实验研究作一综述。     

黄芪-丹参药对干预梗阻大鼠肾小管上皮细胞转分化的研究

目的:观察黄芪-丹参药对及其组分对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾组织α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)表达的影响,分析其对肾小管上皮细胞的干预作用。方法:66只SD大鼠随机分为7组,正常组、模型组、Fosinopril组、丹参总酚酸组、黄芪总皂苷组、黄芪-丹参颗粒剂配伍组、黄芪-丹参组分配伍组。造模后第2天各组按剂量给予相应药物ig治疗14 d。福辛普利组按6.6 mg.kg-1给药,丹参总酚酸组按40 mg.kg-1给药,黄芪总皂苷组按37.5 mg.kg-1给药,黄芪丹参组分配伍组中黄芪总皂苷、丹参总酚酸分别按37.5 mg.kg-1和40 mg.kg-1给药,黄芪丹参颗粒剂组黄芪、丹参颗粒均按10 g.kg-1给药,第15天腹主动脉采血检测肾功能(肌酐、尿素氮)检测及代谢笼收集尿液测定视黄醇结合蛋白(RBP)水平。免疫组化染色,光学显微镜下观察肾组织α-SMA,E-cadherin表达变化。结果:肾功能结果分析显示,UUO组大鼠术后血清Cr达(52.34±7.63)μmol.L-1,显著高于正常组(43.29±4.13)μmol.L-1(P<0.05),但除福辛普利组外,各给药组大鼠Cr水平与模型组相比差异无统计学意义。各组大鼠血清BUN水平差异无统计学意义;各造模组大鼠尿RBP水平较正常组显著升高(P<0.05),其中,福辛普利组、组分配伍组大鼠尿RBP分别为(0.41±0.05),(0.41±0.04)μmol.L-1,与模型组(0.49±0.09)μmol.L-1相比有显著性差异(P<0.05)。免疫组化结果均以模型组病变最严重;病变最轻的为福辛普利组及组分配伍组。结论:黄芪丹参药对及其有效成分对UUO大鼠肾功能、肾小管功能有一定的保护作用,其机制可能与其通过减少模型鼠肾组织α-SMA表达,增加E-cadherin表达,干预肾小管上皮细胞转分化而防治肾间质纤维化有关。     

黄芪丹参有效组分不同比例配伍对肾纤维化模型大鼠肾小管上皮细胞转分化的影响

目的:研究黄芪丹参有效组分不同比例配伍对肾纤维化模型大鼠肾小管上皮细胞转分化的影响。方法:将56只雄性SPF级大鼠随机分为正常组(n=8)、造模组(n=48)。造模组建立大鼠肾纤维化模型,分为模型组(n=8)、黄芪丹参药对组分1∶1配伍组(n=10)、黄芪丹参药对组分1∶2配伍组(n=10)、黄芪丹参药对组分2∶1配伍组(n=10)、福辛普利组(n=10)。造模后第2天开始各组给予相应干预措施,共干预14 d。观察大鼠肾组织病理变化,检测大鼠肾功能,并采用免疫组织化学方法检测大鼠肾组织上皮细胞钙黏蛋白(E-cadherin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达情况。结果:黄芪丹参有效组分不同剂量配伍各组对肾纤维化大鼠肾脏组织病理变化有不同程度的缓解作用。与正常组比较,模型组的Scr升高,差异有统计学意义(P<0.05),说明造模成功。与模型组比较,不同剂量配伍治疗组肾组织E-cadherin表达灰度值水平均明显降低(P<0.05),其阳性表达增强。而福辛普利组、组分配伍1∶1组肾组织α-SMA表达灰度值均明显升高(P<0.05),其阳性表达降低。结论:黄芪丹参药对有效组分1∶1配伍可以通过抑制肾小管上皮细胞转分化(EMT)而延缓肾纤维化的进展,其抑制转分化作用与福辛普利相当;其余不同剂量配伍对肾小管上皮细胞转分化抑制作用效果不明显。     

黄芪丹参药对及其有效组分对UUO大鼠肾组织JAK/STAT信号通路的影响

目的:观察黄芪丹参药对及其有效组分对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾组织JAK/STAT通路的影响。方法:66只SD大鼠随机分为7组,即正常对照组、模型组、黄芪丹参药对颗粒剂配伍组、黄芪丹参药对组分配伍组、丹参总酚酸组、黄芪总皂苷组、福辛普利组。各组给予相应药物治疗,观察黄芪丹参药对及其有效组分对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠尿β2微球蛋白、肾组织病理变化以及肾组织JAK/STAT通路的影响。结果:各治疗组肾脏组织病理变化均有不同程度的改善;黄芪丹参药对组分配伍能降低单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠尿β2-MG(P<0.05),与福辛普利组相当,其余各治疗组有下降趋势,但与模型组比较,差异无显著性;黄芪丹参药对及其有效组分可降低模型大鼠肾组织JAK、STAT1、STAT3蛋白的表达,以组分配伍及颗粒配伍作用显著,与福辛普利相当,黄芪总皂苷作用不显著,其余各治疗组均有不同程度的降低作用。结论:黄芪丹参药对及其组分能保护单侧输尿管梗阻的肾小管功能,一定程度改善肾纤维病理,其机制可能与其干预UUO大鼠肾组织JAK/STAT信号通路有关。     

黄芪-丹参药对及其组分对肾纤维化梗阻大鼠肾组织Ⅰ、Ⅲ型胶原的影响

目的:观察单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾组织Ⅰ、Ⅲ型胶原含量,探讨黄芪丹参药对及其有效成分对肾纤维化的影响。方法:66只SD大鼠随机分为7组,正常组、模型组、福辛普利组(用蒙诺化学名取代商品名)、丹参总酚酸组、黄芪总皂苷组、黄芪丹参颗粒剂配伍1∶1组(简称颗粒配伍组)、黄芪丹参组分配伍1∶1组(简称组分配伍组)。各组手术后第15天取出梗阻侧肾脏,组织经4%多聚甲醛固定24h,然后常规脱水包埋制成石蜡切片。部分进行HE、Masson病理染色,光学显微镜下观察;另一部分进行免疫组化实验,观察Ⅰ、Ⅲ型胶原沉积情况。结果:各组肾脏病理损害、胶原沉积及免疫组化结果表现一致,均以模型组最明显;表达最轻的为福辛普利组及组分配伍组。结论:UUO大鼠肾组织胶原沉积明显,黄芪丹参药对及其有效成分干预后在一定程度上能改善肾纤维化。