柠檬醛胁迫下K562细胞生长增殖抑制和凋亡诱导研究

目的:研究柠檬醛对人白血病K562细胞株增殖和凋亡的影响,并对其作用机制进行初步探讨.方法:采用本实验改良的MTT比色法和Annexin-V/PI双染色流式细胞术测定柠檬醛对K562细胞的增殖抑制率和凋亡诱导率;采用基于分光比色原理的各种试剂盒定量分析柠檬醛胁迫下K562细胞内丙二醛(MDA)和还原型谷胱甘肽(GSH)含量及谷胱甘肽-S转移酶(GST)活性.结果:K562细胞经柠檬醛作用后,6.9～444 mg·L-1柠檬醛抑制K562细胞增殖呈时效性及量效性;111,222mg·L-1柠檬醛可诱导K562细胞凋亡,前者主要表现为诱导早期凋亡活性(4 h:4.3%,24 h:36.6%),后者则主要表现为诱导晚期凋亡活性(4 h:23.9%,24 h:52.4%);柠檬醛作用于K562细胞引起细胞氧化应激的改变,111 mg·L-1柠檬醛作用3 h使K562细胞MDA水平上升为对照组的3.29倍,而GST活性几乎完全抑制.不同浓度柠檬醛作用均引起细胞GSH水平下降.结论:柠檬醛胁迫可有效抑制K562细胞增殖并诱导其凋亡,细胞内GSH含量下降、柠檬醛高蓄积及ROS水平上升可能是其抑制作用的重要分子机制,而ROS途径可能是柠檬醛诱导细胞凋亡机制之一.