Sephadex—G50微柱凝胶血型试剂的研制和应用

目的 研制卡式微柱凝胶血型试剂并应用于血型血清学试验。方法 以Sephadex-G50超细凝胶为分子筛载体，制备成中性微柱凝胶试剂卡、特异性凝胶试剂卡及coomb’s凝胶试剂卡并用于血型鉴定、配血试验、抗体筛选和鉴定，对1000名献血者ABO及Rh（D）血型进行鉴定，其中A型272例、B型279例、B3亚型1例、0型437例、AB型11例；Rh（D）阴性2例，Rh（D）阳性998例；对100例输血前检查标本进行配血试验；以Coomb＇s凝胶试剂卡对抗-D、-C、-c、-E、-e、-Jk^a、-Jk^b、-Fy^a、-Di^a等9个抗体分别与谱红细胞反应做特异性抗体鉴定试验：同时以瑞士进口的DiaMed同类产品及常规的血型血清学试管法同步比较。结果 研制的卡式微柱凝胶血型试剂与瑞士进口的DiaMed同类产品比较，检验结果、敏感性、特异性无明显差别。结论 研制的卡式微柱凝胶试剂适用于血型鉴定、配血试验、抗体筛选和鉴定等血型血清学检查，该试剂制备具有成本低、工艺简单的优点，具有较好的推广应用和开发价值。     

无偿献血人群中HCV/OBI共感染者的分子流行病学特征

目的了解无偿献血人群丙型肝炎病毒(HCV)感染者中隐匿性乙肝感染(OBI)率,为进一步阐明HCV/OBI的作用机制提供科学依据。方法采用盖立复PROCLEIX TIGRIS、罗氏cobas s 201和罗氏E601等仪器对2011年1月—2015年7月广州无偿献血者中的933(人)份HCV感染者标本做HBV DNA和抗-HBc检测,比较HCV单纯感染者和HCV/OBI共感染者之间性别、年龄、民族和转氨酶的差异;巢式PCR扩增HCV/OBI共感染者HCV C区和S区,并构建进化树和基因分型,荧光定量PCR检测HCV和HBV的病毒载量;另外,随机选取同期本地HCV 6a基因型的44名单纯HCV感染者和16名HCV/HBV共感染者最为对照组,通过巢式PCR扩增各组HCV C区,并对3组对象的HCV核心蛋白氨基酸序列做比对分析。结果本组HCV感染的献血者标本中,有6(人)份HBV DNA和抗-HBc阳性,亦即OBI感染率为6.43‰(6/933);该6份HCV/OBI共感染标本的HCV基因型中6a占83.3%(5/6)、1b占16.7%(1/6),HCV病毒载量(log_(10)IU/mL)为3.8—5.7(5.0±0.69)。HCV单纯感染者和HCV/OBI共感染者的性别、年龄、民族、籍贯和ALT均无明显差异(P>0.05)。HCV单纯感染者、HCV/HBV共感染者和HCV/OBI共感染者HCV核心蛋白序列氨基酸变异数分别为0.8±1.3 vs 0.7±1.5 vs 0.4±0.5(P>0.05),没有在HCV/OBI共感染者中发现一致性的结构或突变规律。结论广州地区无偿献血人群HCV感染者中的OBI阳性率较高。     

整群随机对照研究传单在大学生中推广献血400 mL的效果

目的为招募更多高校献血者并推广400 m L献血量,向高校派发2份传单,分析2份传单的效果。方法1份传单为只有献血常识、注意事项和献血后权利等内容的单面传单;另1份为在单面传单的基础上,加上献血400 m L的原因的双面传单。采用整群随机对照研究分析2款传单的效果,并对参与献血的大学生进行随机电话访问。结果 60所高校在2016学年(2016年9月1日—2017年7月30日)参加献血的人数和献血量为400 m L的人数比2015学年(2015年9月1日—2015年7月30日)均增长明显(分别增长28.6%和6.21%);对810位献血者的访问结果显示,单面传单组和双面组分别有123位(45.6%)和122位(45.2%)受访者表示有认真阅读过传单,其中152位(62.6%)感觉传单内容对献血有帮助;广义线性混合效应模型的分析结果显示,单面[回归系数:0.033,95%置信区间:(0.003,0.064),P0.05)]和双面传单[(0.047,(0.011,0.083),P0.05)]对本科院校提升献血量均有正面效应,而单面传单对医学院校有负面效应[-0.119,(-0.236,-0.001),P0.05],但双面传单对其有正面效应[0.089,(0.004,0.174),P0.05]。结论我们仍需不断改进传单的内容和派发方式,以更好地招募献血者。     

中国不同基因型/亚型丙型肝炎病毒混合感染率的研究

目的了解我国慢性丙型肝炎病毒(heptitis C virus,HCV)感染者中不同基因型/亚型HCV混合感染率以及影响因素,为制定适合我国国情的HCV预防和治疗政策提供科学依据。方法从全国各省(台湾省除外)的省会城市、直辖市(重庆市除外)和自治区(新疆除外)的三级甲等综合医院和传染病专科医院,随机收集2009-2011年HCV RNA阳性血浆(血清)标本1 450份,记录相应的年龄、性别、民族、籍贯、职业和病毒滴度等。分别以C/E1和NS5B为目的基因进行巢式PCR扩增并克隆测序。根据感染情况分为单独感染组和混合感染组,用χ2检验及t检验比较两组性别、年龄、民族和滴度等差异(P<0.05为差异有统计学意义)。结果 C/E1和NS5B两个基因PCR扩增均为阳性的标本1 159个,HCV混合感染者为11个,其余1 148个均为单独感染。不同基因型/亚型混合感染率为0.95%。混合感染的基因型涵盖了1b、2a和6a。1b+2a混合感染9个(2a占优势的6个,1b占优势的3个);6a+2a混合感染1个(6a占优势);6a+1b混合感染1个(6a占优势)。年龄、性别、民族和滴度等两组之间差异均无统计学意义。结论全国HCV不同基因型/亚型混合感染率为0.95%。混合感染的基因型涵盖了1b、2a和6a。6a基因型在中国慢性丙型肝炎患者的混合感染中首次被报道。     

HCV 3b亚型全长序列测定及基线耐药相关置换的分析

目的探讨二代测序法(NGS)在HCV 3b全长序列及基线耐药相关置换(RAS)检测中的应用。方法从1例2016年7月在广州血液中心献血的献血者(HCV RNA阳性)血浆中提取核酸,经序列非依赖性扩增后,构建测序文库并采用illumina Hiseq进行深度测序,然后通过生物信息学方法分析HCV全长序列、病毒基因分型以及针对直接抗病毒药物(DAA)的基线RAS。结果NGS获得8.4 Gb原始测序数据,序列数(reads)超过56 M。经生物信息学分析获得HCV全长序列,平均测序深度为488007,基因分型结果为3b亚型。病毒氨基酸序列里含有12个RAS,分别是NS3区域的Y56H、Q80K、Q80R、A156G,NS5A区域的M28G、Q/A30G、Q/A30K、L31F、L31M、Y93H,以及NS5B区域的S282T和V321A,其中位于NS5A区域的Q/A30K和L31M属于高丰度RAS(99.16%和98.37%),其余10个RAS丰度较低(<0.5%)。结论NGS用于HCV 3b亚型的全长序列检测和基因分型,最终鉴定出基线RAS,对于HCV 3b的流行病学研究和DAA治疗方案的制订有重要意义。     

异基因脐血干细胞移植后STR基因座位的表达分析

本研究分析杜氏型肌营养不良（DMD）病人异基因脐带血干细胞移植后STR基因座位的表达。利用PCR—SSO方法检测患者、供者HLA-A、B、DR位点，并利用STR—PCR方法检测术后各个器官的STR-基因位点的表达情况。结果表明：患者与供者在HLA中、低分辨情况下A、B、DR位点全相合，患者的胸骨骨髓显示为供者独立植入，脾、左上肺、前臂、肌舌、左肝、胃、右颞叶、膈肌、右支气管、左心室、右肾均为嵌合状态。结论：造血干细胞移植术后，供者的基因可在实体器官表达，形成嵌合状态.     

多凝集红细胞1例

正常人红细胞上均含有T抗原,但一般情况被唾液酸包裹而不显示T抗原活性,在某些特殊情况下,如细菌感染、遗传因素或化学试剂诱导下[1,2],唾液酸酶催化裂解红细胞膜糖蛋白和糖脂上的唾液酸残基,主要是存在于A、B血型糖蛋白上的不稳定碱性四糖,导致T抗原部分或全部激活,从而产生T活化的多凝集红细胞,此类红细胞可与多数或所有ABO相容的含抗-TIgM的正常人血清凝集,但脐带血清或小于6个月的婴儿血清因无抗-TIgM而不与之反应。1病例简介2004年12月22日本中心收到某医院送来一疑难配血标本。患儿4月龄,ABO血型A型,RhD阳性,肠梗阻术后要求…     

广州地区ALT不合格献血者再次献血血液筛查结果分析

目的 探讨ALT筛查在无偿献血血液安全中的作用.方法 采用回顾性调查方法,追踪广州地区2007-2008年ALT单项检测首次不合格的献血者再次献血时的血液筛查结果,并进行比较分析.结果 2007-2008年广州地区9122位ALT单项检测首次不合格的献血者中,1005人(11%)再次来献血,其中,五项传染病指标全部标合格者747人(74.3%),258人(25.7%)不合格,其中ALT单项仍为阳性者240人,为不合格总人数的93%,有18人(7%)献血者传染病指标转为不合格,其中ALT阴性而其他四项指标不合格者15人,ALT合并其他传染病指标不合格者3人.结论 ALT筛杳在一定程度上能够减少肝炎病毒窗口期或隐匿性感染的漏检,在其他更敏感和特异的检测方法引入我国血液筛查之前,ALT筛查对降低输血传染病残留风险仍具有不可忽视的作用.     

海南黎族人群乙肝感染情况与风险因素分析

目的:了解海南黎族人群乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus,HBV)的感染情况并分析其相关风险因素。方法:于2014 年7 月至2015 年10 月采用随机抽样的方法选取1 595 名海南白沙黎族居民作为研究对象,获得其基线资料和风险因素等流行病学资料,采用化学发光法检测血浆的乙肝核心抗体(HBcAb),用t 检验分析HBcAb 阳性组与阴性组之间年龄的差异,用单因素卡方检验和多因素Logistics 回归分析年龄、性别及相关风险因素对HBcAb 的影响。结果:该人群HBcAb 的阳性率为71.8%(1 145/1 595)。男性与女性的阳性率差异无统计学意义( 2 =0.134,P =0.715)。各年龄组之间HBV 感染率的差异有统计学意义(F =540.769,P<0.001)。其中,12 ~ 17 岁组的HBV 感染率(11.9%)显著低于其他各年龄组,18 ~ 23 岁组(28.0%)显著高于12 ~17 岁组,但显著低于其余(>23 岁)年龄组(>85%)。多因素Logistics 回归分析显示饮酒和纹身均是该人群HBV 感染的独立风险因素( 2 =169.833,P<0.001; 2 =11.354,P =0.001)。结论:海南黎族人群的HBV 感染率较高,年龄、饮酒和纹身是该人群感染的独立风险因素。     

造血干细胞移植同种免疫抗体对血小板输注的影响

目的了解造血干细胞移植前同种免疫性抗体阳性患者术后血小板的输注情况。方法1)检测HSCT术前和术后HLA抗体、血小板特异性(HPA)抗体。2)移植术后采用补体依赖淋巴细胞毒试验(CDC)配合血小板输注,观察输注后患者的血小板增加修正值(CCI)。结果1)术前HLA抗体阳性9名,强度为22%-72%,HPA抗体阳性1名;术后HLA抗体阳性8名,强度为15%-45%,HPA抗体阴性9名;2)输注术后血清CDC配合血小板9名,其中4名达到血小板有效输注;5名血小板无效输注;3)5名无效输注患者输注术前和术后血清CDC配合血小板,其中4名达到血小板有效输注,与其输注术前血清CDC配合血小板CCI值相比较,差异有统计学意义(P<0.05),1名术前HPA抗体阳性患者仍为血小板无效输注。结论HSCT前应监测患者HLA和HPA抗体及其强度,术前保存HLA抗体强度较高血清,有助于术后筛选有效的血小板供者。