稳定表达nucleostemin—siRNA的肿瘤细胞克隆的筛选和鉴定

目的：用脂质体法建立nucleostemin（NS）基因特异性siRNA阳性细胞克隆，为深入研究NS基因在胃癌细胞增殖调控中的作用和机制提供理想的生物学模型。方法：试剂盒法将真核表达载体PCDNA4／C—NS—silencer质粒大量扩增，然后以限制性切酶PVUI酶切线性化处理，用LipofectamineTM2000Reagent将PCDNA4／C—NS—silencer及其对照空载体转染胃癌SGC-7901细胞，经Zeocin抗生素压力筛选后用PCR方法鉴定细胞克隆外源基因整合阳性。结果：经Zeocin抗生素压力筛选后两组细胞均收获多个细胞克隆；PCR结果表明两组细胞克隆外源基因整合阳性。结论：成功建立表达NS～siRNA的胃癌SGC-7901细胞克隆。     

生理学网络教学的开发与应用

利用计算机多媒体技术，开展生理学网络教学是医学教学的一项重要任务，本文主要从生理学网络教学系统的开发、网络教学的优势和实践应用及思考作简要阐述。     

浅谈生理学多媒体教学

通过介绍在生理学教学过程中应用多媒体技术的体会，阐述多媒体辅助教学的优势及不足，提出多媒体教学应与传统教学有机结合，形成合理的教学结构，提高教学效果。     

内脏脂肪素在2型糖尿病大鼠脂肪组织中的表达及意义

目的:检测实验性2型糖尿病大鼠脂肪组织中内脏脂肪素(visfatin) mRNA表达的情况,探讨visfatin与2型糖尿病相关性.方法:高糖高脂饮食喂养大鼠4周加尾静脉注射小剂量链脲佐菌素(STZ) 30mg/kg复制2型糖尿病大鼠模型,继续高糖高脂饮食喂养8周后取材,测定空腹血糖(FBG)、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、血清胰岛素(FINS)并计算胰岛素抵抗指数(IR);检测内脏脂肪组织中visfatin mRNA表达水平.结果:2型糖尿病大鼠FBG、FINS、TC、TG水平、IR值升高;内脏脂肪组织中visfatin mRNA表达量明显增高并与FBG、TG、IR呈显著正相关.结论:visfatin mRNA的表达在2型糖尿病胰岛素抵抗中起重要作用.     

成人医学教育生理学教学改革的初步探索

生理学是一门医学主干课程,是联系基础医学和临床医学的桥梁。我们针对成人学生的实际情况,从优化教学内容、改革教学方法和教学质量评价等几个方面,进行成人生理学教学改革,以保证成人教学质量的提高。     

银杏叶提取物对2型糖尿病大鼠心肌细胞钙通道基因表达的影响研究

目的研究银杏叶提取物对2型糖尿病(T2DM)大鼠心肌细胞L型Ca2+通道蛋白mRNA表达的影响,探讨银杏叶提取物对T2DM的治疗作用。方法用高糖-高脂肪饲料刺激加小剂量链脲佐菌素(STZ)制备T2DM大鼠模型,将糖耐量减低的20只大鼠随机分为糖尿病组(10只)和治疗组(10只),另设10只正常大鼠(正常组)作为对照。治疗组大鼠给予银杏叶提取物灌胃,糖尿病组和正常组大鼠给予0.9%氯化钠注射液灌胃。治疗10周后采用半定量反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测3组大鼠心肌细胞L型Ca2+通道蛋白mRNA表达量。结果正常组、糖尿病组、治疗组大鼠心肌组织L型Ca2+通道蛋白mRNA表达量分别为(0.157±0.028)、(0.257±0.025)和(0.226±0.029),3组间比较差异有统计学意义(F=28.232,P=0.000);糖尿病组、治疗组大鼠心肌组织L型Ca2+通道蛋白mRNA表达量均显著高于正常组,而治疗组显著低于糖尿病组,差异有统计学意义(P<0.05)。另外,实验10周时,糖尿病组大鼠葡萄糖耐量试验各时点血糖水平较正常组大鼠显著升高,而治疗组大鼠则较糖尿病组显著下降,差异有统计学意义(P<0...     

银杏叶提取物对糖尿病大鼠睾丸和附睾组织自由基和抗氧化水平的影响

目的 探讨银杏叶提取物(EGb)对糖尿病大鼠睾丸和附睾组织自由基和抗氧化水平的影响.方法 从40只Wistar雄性大鼠中随机抽取10只作为正常对照组,其余大鼠用链脲佐菌素(STZ)加高脂高糖饮食制备2型糖尿病模型.造模动物筛选后,随机分为糖尿病组和治疗组,每组10只.治疗组给予EGb 10周后,取3组大鼠双侧睾丸和附睾组织.检测丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)水平和超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、一氧化氮合酶(NOS)活性.结果 3组大鼠睾丸、附睾组织中MDA、NO水平及SOD、GSH-Px、NOS活性问差别均有统计学意义(P＜0.01).糖尿病组大鼠睾丸、附睾组织中MDA、NO水平及SOD、GSH-Px和NOS活性与对照组比较,差别均有统计学意义(P＜0.01);治疗组大鼠睾丸组织中MDA水平及SOD、GSH-Px活性与对照组,差别均有统计学意义(P＜0.05);治疗组大鼠附睾组织中MDA水平及SOD、GSH-Px、NOS活性与对照组比较,差别均有统计学意义(P＜0.05);治疗组大鼠睾丸和附睾组织中MDA、NO水平及SOD、GSH-Px和NOS活性与糖尿病组比较,差别均有统计学意义(P＜0.01).结论 银杏叶提取物对糖尿病大鼠睾丸和附睾组织具有保护作用.     

生理学互动型学习网站的实践与探索

网络课程是基于现代多媒体、网络教学环境的教学资源。为提高教学质量,设计和开发了生理学互动型学习网站。内容包括：网络课堂、学习园地、在线测试和网络资源库等。教学实践显示,利用网站组织教学,具有课程内容丰富、重点突出、图文并茂,以及较好的交互性等优点。     

复方五味子素B对人结肠癌细胞多药耐药性逆转作用及其机制研究

目的：研究复方五味子素B（γSC）对耐奥沙利铂人结肠癌细胞（THC-8307/OXA）多药耐药性的逆转作用及作用机制.方法：采用噻唑蓝（MTT）比色法检测奥沙利铂（OXA）和γSC的细胞毒性;碱性磷酸酶免疫组织化学法和Western blot检测γSC对THC-8307/OXA细胞GST-п蛋白水平的影响.结果：γSC（6.0,12.5,25 μg·ml-1）对人结肠癌细胞（THC-8307）和THC-8307/OXA无显著毒性作用（P＞0.05）,OXA对THC-8307的IC50为0.06 μg·ml-1,而对THC-8307/OXA的IC50为2.32 μg·ml-1,THC-8307/OXA较THC-8307耐药性提高39倍,γSC（6.0,12.5,25 μg·ml-1）能使OXA对THC-8307/OXA细胞的IC50从2.32 μg·ml-1依次下降至0.370,0.128,0.057 μg·ml-1,逆转倍数分别为6.2,18.1,40.7倍.碱性磷酸酶免疫组织化学法和Western blot检测γSC（12.5 μg·ml-1）处理48 h后,THC-8307/OXA细胞GST-n蛋白表达明显降低（P＜0.01）.结论：γSC具有逆转耐奥沙利铂人结肠癌细胞的MDR作用,其作用机制与下调GST-п表达有关.     

姜黄素对胃癌SGC-7901细胞Nucleostemin基因表达的影响及意义

目的：研究姜黄素对胃癌SGC-7901细胞株NS基因表达的影响及凋亡诱导作用,探讨姜黄素抗肿瘤机制。方法：不同浓度姜黄素（0,10,20,40μmol·L^-1）和不同时间（12,24,48h）点处理细胞,利用CCK-8法检测细胞增殖抑制率,RT—PCR法检测姜黄素作用前后NS基因表达量的变化,TUNEL试剂盒法、流式细胞仪法检测细胞凋亡情况。结果：20μmol·L^-1以上浓度的姜黄素对体外培养的胃癌SGC-7901细胞株生长具有抑制作用并呈量效和时效关系;与对照组相比,姜黄素处理组NS基因表达量明显下降,细胞凋亡明显增加（凋亡指数〉26．61％,P〈0．05）。结论：姜黄素使胃癌SGC-7901细胞增殖减慢,凋亡增加,NS基因表达下降,可能是姜黄素抗肿瘤机制之一。