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1.
2.
CD3 4 细胞的分离纯化在自体外周血干细胞、异基因骨髓移植 /外周血干细胞移植及干细胞研究中具有重要的应用价值。为了摸索大量分选CD3 4 细胞的方法 ,本研究应用Isolex3 0 0i磁性分选系统富集CD3 4 细胞 ,采用流式细胞术监测分选前后细胞表面标志 ,经CD3 4 细胞体外增殖实验及克隆形成实验验证分选获得的CD3 4 细胞生物学活性。结果显示 ,所完成的 5例次自体外周血富集CD3 4 细胞时 ,先收获单个核细胞约 ( 3 .5 -6.0 )× 10 10 ,CD3 4 细胞占单个核细胞百分率为 ( 0 .5 5 - 1.2 ) % ;收获的CD3 4 阳性细胞总数为 ( 2 - 3 )× 10 8,纯度为 ( 75 - 85 ) % ,回收率为 ( 4 0 - 65 ) %。体外实验表明 ,在SCF IL 3 FL TPO EPO存在下 ,经过 3 - 4天培养 ,可扩增 2 - 3倍 ;经CFU GM、BFU E集落形成实验显示具有形成集落的能力 ,证实分选后细胞具有造血祖细胞生物活性。结论 :应用Isolex3 0 0iCD3 4 细胞分选仪可以高效大量富集CD3 4 细胞 ,适于临床应用。 相似文献
3.
目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)胸腺生成素反义RNA 1(TMPO-AS1)对食管癌细胞恶性生物学行为的影响及其机制。方法2016年6月至2019年12月,实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测20例食管癌组织和癌旁组织中lncRNA TMPO-AS1和微小RNA(miR)-501-3p的水平,食管癌Eca109细胞分为lncRNA TMPO-AS1干扰组(转染si-NC和si-TMPO-AS1);miR-501-3p过表达组(转染miR-NC和miR-501-3p);lncRNA TMPO-AS1过表达组(转染pcDNA和pcDNA-TMPO-AS1);lncRNA TMPO-AS1和miR-501-3p共抑制组(转染si-TMPO-AS1+anti-miR-NC和si-TMPO-AS1+anti-miR-501-3p)。噻唑蓝(MTT)法、流式细胞术和Transwell实验分别检测食管癌Eca109细胞增殖、凋亡率、细胞迁移和侵袭能力,蛋白质印迹法(Western blot)检测相关蛋白水平,双荧光素酶报告系统验证lncRNA TMPO-AS1与miR-501-3p的调控关系。两组间比较采用独立样本t检验,多组间比较采用单因素方差进行分析。结果食管癌组织组中的lncRNA TMPO-AS1水平(2.64±0.26)高于癌旁组织(1.00±0.09,t=26.657,P<0.05),miR-501-3p水平(0.44±0.04)低于癌旁组织(1.00±0.07,t=31.063,P<0.05);干扰lncRNA TMPO-AS1的Eca109细胞24 h增殖(0.36±0.03)低于si-NC组(0.39±0.03,t=2.121,P<0.05),48 h增殖(0.45±0.04)低于si-NC组(0.75±0.07,t=11.163,P<0.05),72 h增殖(0.57±0.05)低于si-NC组(1.16±0.09,t=17.191,P<0.05),迁移细胞数[(54.14±5.65)个]低于si-NC组[(113.02±9.87)个,t=15.531,P<0.05],侵袭细胞数[(47.69±5.01)个]低于si-NC组[(96.32±9.88)个,t=13.169,P<0.05],细胞凋亡率[(22.15±2.22)%]高于si-NC组[(6.98±0.69)%,t=19.576,P<0.05];过表达miR-501-3p的Eca109细胞48 h增殖(0.51±0.05)低于miR-NC组(0.77±0.07,t=9.067,P<0.05),72 h增殖(0.65±0.06)低于miR-NC组(1.15±0.09,t=13.867,P<0.05),迁移细胞数[(61.23±6.33)个]低于miR-NC组[(115.25±9.25)个,t=14.458,P<0.05],侵袭细胞数[(53.14±5.33)]低于miR-NC组[(98.32±8.47)个,t=13.543,P<0.05],细胞凋亡[(19.58±1.74)%]高于miR-NC组[(7.23±0.77)%,t=19.471,P<0.05],差异均有统计学意义。结论lncRNA TMPO-AS1通过靶向miR-501-3p促进食管癌细胞的恶性生物学行为,可被视为食管癌患者的潜在治疗靶标。 相似文献
4.
乳腺疾病的检出,乳腺癌的早发现、早诊断、早治疗对提高乳腺癌的治愈率、降低病死率,保障妇女健康生活有着至关重要作用。我们对参加体检的女性进行高频彩色多普勒超声常规检查,现将结果报告分析如下。 相似文献
5.
目的:树突状细胞(DC)是一种重要的抗原递呈细胞,在T细胞参与的HLA限制性免疫应答中起重要作用.已证实在动物模型中DC递呈抗原可以诱导出T细胞介导的免疫反应.我们在体外扩增获得肿瘤患者DC,观察其特点,并以MAGE-3/CEA(HLA-A2/A24+)肽疫苗冲击DC诱导特异性CTL,研究其杀伤活性.方法:选择MAGE-3-HLA-A2/A24+或CEA-HLA-A24+肿瘤患者,收集PBMNC中的贴壁细胞,在含有rhGM-CSF、rhIL-4的1640中培养诱导DC细胞,第7天加入HLA-A2-MAGE-3、HLA-A24-MAGE-3、HLA-A24-CEA肽冲击.以肽冲击后的DC与未经纯化的T细胞混合培养(T-DC-P)诱导的CTL作为效应细胞,Mel526,803,Raji,K562作为靶细胞,以LDH法检测特异性CTL的杀伤力.结果:体外扩增可获得高纯度的DC,高表达DC特异性表面标志CD40(74.18%±15.76%)、CD86(94.6%±3.80%)、HLA-DR(88.6%±10.94%).不同肿瘤患者DC得率表现出较大差异(7.07%±3.24%),反映出免疫功能的不同.T-IL-2细胞与T-DC-P细胞对Mel526和803细胞株的杀伤活性有显著性差异(P<0.01),可以将特异性杀伤力提高25%~35%,而对Raji和K562细胞株的杀伤活性无显著性差异(P>0.01).结论:rhGM-CSF、rhIL-4体外联合应用可扩增出高纯度DC,肽疫苗冲击后的DC可诱导出MAGE、CEA特异性的CTL应答.表明DC为基础的疫苗是肿瘤免疫治疗重要的新方法,因其具有简便、快速的特点,有良好的前景. 相似文献
6.
产前超声诊断技术的应用与发展,有效地降低了先天性缺陷儿的出生率,为提高出生人口素质作出了重大贡献。由于公众对产前超声检查期望值过高,引发的医疗纠纷越来越多。尤其是在基层医院,由于在设备、人员素质以及技术水平上的差异,更容易发生医患矛盾,加强医患间的沟通 相似文献
8.