突触素Ⅰ与丙烯酰胺相互作用模式研究

目的通过同源模建方法获得突触素Ⅰ蛋白(synapsin Ⅰ,Syn Ⅰ)功能域的三维结构,采用分子对接、分子动力学模拟方法研究小分子丙烯酰胺(acrylamide,ACR)与Syn Ⅰ蛋白相互作用模式及结合位点,提供ACR对Syn Ⅰ蛋白损伤作用机制的证据。方法使用Dock 6.7分子对接程序和Amber Tools15分子动力学模拟程序包进行计算模拟。结果分子对接计算表明ACR和蛋白质间存在3种不同模式(体系Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ)。分子动力学模拟将结合模式缩减至2种:小分子以体系Ⅰ方式与蛋白质结合力最强,其中氨基酸残基Asn214、Ser390和Ser391的作用力贡献较为突出;体系Ⅱ、Ⅲ为相同结合模式有异于体系Ⅰ,可能同时存在另一种结合模式,其中Glu373和Lys225的作用较为明显。结果提示,氢键、静电力和范德华力及钙离子(Ca~(2+))对两者的结合具有重要作用。3种模式均致口袋形状增大,Ca~(2+)结合变弱,水溶剂分子更容易进入口袋,为后续化学反应创造环境。结论在分子动力学模拟中,ACR在Ca~(2+)存在条件下与Syn Ⅰ功能域相互作用,体系Ⅰ中结合位点为氨基酸残基Asn214、Ser390和Ser391,体系Ⅱ、Ⅲ的结合位点为氨基酸残基Glu373和Lys225,且Syn Ⅰ蛋白在与小分子结合后构象发生变化。本研究对ACR所致Syn Ⅰ蛋白相关性神经损伤机制的进一步研究具有一定的提示作用。     

新生期小鼠七氟醚暴露对其青春期学习记忆及海马组织髓鞘损伤的影响

目的 探究新生期小鼠七氟醚暴露对其青春期学习记忆的影响及其相关机制.方法 6日龄C57BL/6小鼠随机分为对照组(CON组)、七氟醚组(SEVO组)、对照+氯化锂组(LiCl组)、七氟醚+氯化锂组(SEVO+ LiCl组).SEVO组为3％七氟醚连续暴露3d(第6～8天),每天1次,每次2 h,CON组为60％氧气对照,LiCl组为60％氧气暴露前30 min腹腔注射GSK3β抑制剂氯化锂(100 mg/kg),SEVO+LiCl组为七氟醚暴露前30 min腹腔注射氯化锂(100 mg/kg).新物体识别实验和Y迷宫实验检测小鼠第30～32天学习记忆功能;Western blot检测小鼠海马组织髓鞘碱性蛋白(MBP)、β-catenin蛋白表达及pGSK3β/GSK3β比值变化.结果 行为学实验结果显示,SEVO组小鼠识别指数和新臂探索次数百分比均低于CON组(P＜0.05).氯化锂预处理后,SEVO+ LiCl组小鼠识别指数和新臂探索次数百分比较SEVO组升高(P＜0.05),学习记忆功能改善.Western blot结果显示,SEVO组小鼠海马组织MBP蛋白、β-catenin蛋白表达及pGSK3β/GSK3β比值均低于CON组(P＜0.05),氯化锂预处理后,与SEVO组比较,SEVO+ LiCl组小鼠海马组织MBP蛋白、β-catenin蛋白表达增加,pGSK3β/GSK3β比值升高(P＜0.05).结论 新生期小鼠七氟醚暴露致青春期学习记忆功能受损,可能与抑制GSK3β/β-catenin信号通路中GSK3β(Ser9)磷酸化导致的海马组织髓鞘损伤有关.     

高血压患者体成分分析与危险因素的相关性研究

目的釆用生物电阻抗法测定高血压患者的体成分,分析其特点,进一步探讨高血压发生的相关因素。方法随机选取在本院心血管内科住院的高血压患者70例为实验组,另随机选取同期来本院体检的健康成人70例为对照组,两组均采用生物电阻抗法测量体重指数(BMI)、体脂百分比、腰围、内脏脂肪面积(VFA)、节段肌肉量、骨骼肌含量等体成分指标。另测量血压,抽空腹血检验血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(CHO)、低密度脂蛋白(LDL)、高密度脂蛋白(HDL)水平。结果实验组体脂(25.19±4.24)%、腰围(91.12±6.52)cm、VFA(103.35±8.10)cm2,均高于对照组的(23.11±4.23)%、(88.64±5.96)cm、(89.58±9.88)cm2(P<0.05);下肢肌肉量(18.16±2.05)kg,低于对照组的(19.73±6.10)kg(P<0.05)。其他体成分指标与对照组无明显差异(P>0.05)。腰围、VFA与HDL呈负相关(P<0.05),与TG、CHO及血压呈正相关(P<0.05或P<0.01)。结论人体体脂百分比的增多及腰围、VFA的增大,与高血压的发生可能存在一定的关系。     

毛冬青汤对膝关节镜术后早期关节肿痛及炎症因子的影响

目的观察毛冬青汤治疗膝关节镜患者术后早期关节肿痛的临床疗效及对炎症因子的影响。方法采用随机数字表法将72例膝关节镜术后患者分为治疗组和对照组各36例。2组术后均予棉垫普通绷带适当加压包扎,术后24 h内冰敷,术后1 d起予七叶皂苷钠片,每次1片,每日2次口服。治疗组术后1 d起予毛冬青汤,每日1剂,每日2次口服。术后1、5 d,观察2组患者视觉模拟评分法(VAS)评分、膝关节肿胀程度,比较2组红细胞沉降率(ESR)、C反应蛋白(CRP)、白细胞介素-1(IL-1)水平。结果术后5 d,治疗组总有效率为94.44%(34/36),对照组为80.56%(29/36),治疗组膝关节肿胀改善优于对照组(P0.05)。与本组术后1 d比较,2组术后5 d VAS评分及ESR、CRP、IL-1水平明显下降(P0.05);2组术后5 d比较,治疗组VAS评分及ESR、CRP、IL-1水平明显低于对照组(P0.05)。结论毛冬青汤可明显改善膝关节镜术后患者早期关节肿痛程度,其作用机制可能与降低血清ESR、CRP、IL-1水平有关。     

家族渗出性玻璃体视网膜病变

家族渗出性玻璃体视网膜病变,是一种常染色体显性遗传性疾病,其基本特征为眼底颞侧视网膜血管迷行并呈扇形突然中止;但更重要的一个特点是本病眼部表现十分复杂,轻者无明显症状,重者可表现为广泛视网膜、玻璃体损害,甚至形成小眼球、眼球萎缩等。本病的眼部改变与早产儿视网膜病变极为相似,应注意鉴别。治疗主要针对防治其并发症而进行光凝或冷凝;发生牵引性视网膜脱离时,则需要行巩膜缩短和玻璃体切割术治疗。     

shRNA特异性静默大鼠肺泡巨噬细胞TLR2基因对染尘大鼠肺纤维化的抑制作用

目的构建表达大鼠TLR2的shRNA慢病毒载体,并研究其在染尘大鼠肺组织内对巨噬细胞功能的抑制效应。方法设计并构建具有干扰效力的shRNA表达质粒,筛选出对TLR2干扰效果最好的一段序列,使用Gateway方法重组到慢病毒表达载体中进行包装,采用包装好的慢病毒感染大鼠肺泡巨噬细胞系NR8383,ELISA法检测TGF-β1、IL-1β、IL-6的表达情况;而后,在大鼠矽肺模型中引入TLR2慢病毒载体,观察矽肺发生和进展情况。结果成功筛选出具有良好TLR2表达干扰效果的shRNA,并成功包装入慢病毒,慢病毒滴度为1.0×106TU/ml,转染慢病毒的肺泡巨噬细胞释放TGF-β1、IL-1β、IL-6均显著减少(P<0.05);转导了干扰病毒载体的矽肺大鼠,其矽肺发生发展受抑情况均优于对照组。结论成功构建了表达大鼠TLR2 shRNA的慢病毒,具有良好的抑制TGF-β1、IL-1β、IL-6功能,并能有效抑制矽肺的发生发展,揭示TLR2可能成为治疗肺纤维化的潜在靶点。 更多还原     

夹脊穴埋线治疗腰椎间盘突出症200例临床观察

目的：观察夹脊穴埋线治疗腰椎间盘突出症的临床疗效。方法：将400例腰椎间盘突出症患者随机分为治疗组和对照组各200例。治疗组采用夹脊穴埋线治疗,对照组采用夹脊穴电针治疗。结果：总有效率与治愈率治疗组分别为95．0％、65．0％,对照组分别为82．5％、47．5％,两组比较,差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论：夹脊穴埋线治疗腰椎间盘突出症具有较好的临床疗效。     

滑膜炎颗粒治疗膝反应性关节炎湿热阻络证的临床研究

目的:探讨滑膜炎颗粒治疗膝反应性关节炎湿热阻络证的疗效。方法:将60例膝反应性关节炎患者随机分为治疗组和对照组。治疗组予基础治疗+布洛芬+滑膜炎颗粒治疗,对照组予基础治疗+布洛芬治疗,治疗4周后,对两组患者VAS评分、Lysholm功能评分、ROM、肿胀程度、ESR、CRP进行比较。结果:治疗组患者治疗后VAS评分、ESR、CRP均低于对照组,Lysholm功能评分、ROM均高于对照组,差异均有统计学意义(P0.05)。结论:滑膜炎颗粒治疗膝反应性关节炎湿热阻络证的患者,可明显改善患者关节疼痛、功能、肿胀程度等。     

幽门螺杆菌空泡毒素VacA促进胃上皮细胞NLRP3炎性小体激活

目的探究H. pylori空泡毒素VacA对胃上皮细胞NLRP3炎性小体激活的影响。方法采用WT H. pylori26695和△VacA H. pylori26695感染AGS细胞,Western blotting、q RT-PCR、ELISA检测NLRP3、Pro-Caspase-1、Caspase-1、pro-IL-1β和IL-1β的表达。siRNA-NC、siRNA-NLRP3转染AGS后,分别用PBS、WT H. pylori26695和△VacA H. pylori26695刺激,qRT-PCR和细胞因子ELISA检测试剂盒分别检测pro-IL-1β的mRNA表达水平和IL-1β的蛋白表达水平。收集慢性胃炎患者标本,鉴别出H. pylori阳性患者的VacA基因型(s1m1型和s1m2型),通过q RT-PCR检测NLRP3、caspase-1、pro-IL-1β的mRNA表达水平及采用细胞因子ELISA试剂盒检测IL-1β蛋白表达水平。C57BL/6小鼠腹腔注射DMSO或者DMSO+Mcc950,H. pylori菌液灌胃,qRT-PCR和ELISA检测胃组织IL-1β的表达。结果 H.pylori感染AGS细胞,与对照组相比,WT H. pylori26695组IL-1β的mRNA和蛋白表达水平均明显升高(P0.01);△VacA H. pylori26695组与WT H. pylori26695组相比,IL-1β的m RNA和蛋白表达水平均明显下降(P0.01)。与siRNA-NC组相比,采用WT H. pylori26695和△VacA H. pylori 26695刺激转染siRNA-NLRP3的AGS细胞pro-IL-1β的m RNA水平和IL-1β蛋白表达水平均明显下调(P0.01)。H. pylori阳性患者较阴性患者NLRP3、Caspase-1和IL-1β的mRNA表达水平明显升高(P0.01);与VacA s1m2型患者相比,VacA s1m1型患者NLRP3、Caspase-1和IL-1β的mRNA表达水平显著升高(P0.01),同时IL-1β成熟分泌增加。H. pylori慢性胃炎小鼠动物模型中,与对照组相比,Mcc950组中在WT H. pylori26695和△VacA H. pylori26695灌胃后,pro-IL-1β的mRNA水平和IL-1β蛋白水平表达均明显下调(P0.01)。结论H. pylori空泡毒素VacA能够激活胃上皮细胞NLRP3炎性小体,促进IL-1β的成熟分泌。