南京地区2013-2014年结核分枝杆菌耐药流行情况调查

目的 了解南京地区胸科医院2013-2014年结核杆菌对药物的耐药情况.方法 使用绝对浓度法对本院2013、2014年获得的2510株抗酸分枝杆菌株进行耐药监测及对比研究;此外统计耐多药患者临床资料,了解耐多药肺结核与糖尿病的合并情况.结果 2013-2014年南京胸科医院RR-TB、Pre-XDR-TB耐二线药物发病率呈增长趋势.Pre-XDR-TB在MDR-TB构成比可达51%,且在Pre-XDR-TB中耐左氧氟沙星明显多于耐二线注射用药.结核菌对丁胺卡那霉素、卡那霉素、卷曲霉素三种药物的敏感、耐药性高度一致,其交叉耐药明显.耐药肺结核患者中糖尿病比例呈增长趋势.结论 南京地区胸科医院结核杆菌耐药率高,应加强抗结核药物耐药性监测、门诊随访、合并症分析,根据药敏试验结果选择科学有效的化疗方案.     

氯氮平对雄性C57BL/6小鼠胰腺β细胞凋亡的影响

目的:探讨氯氮平对雄性C57BL/6小鼠胰腺β细胞凋亡的影响。方法:实验于2004-03/09在南京医科大学第一附属医院中心实验室完成。选择清洁级雄性C57BL/6小鼠63只,体质量(20±2)g,由上海斯莱克实验动物有限责任公司提供[许可证号:SCXK(沪)2003-0003]。随机分为空白组21只、氯氮平4mg/kg组21只、氯氮平20mg/kg组21只,各组小鼠的体质量和基础血糖值无显著差异(P>0.05)。所有动物每7只分笼饲养于光照12h(7Am～7Pm),相对湿度45%的普通设施中,普通全价鼠饲料喂养,自由进食及饮水。①模型制作:氯氮平充分研磨后加入蒸馏水,配成浓度为2g/L和0.4g/L的悬浊液,灌胃前充分匀。氯氮平4mg/kg组灌胃0.4g/L的悬浊液0.2mL,氯氮平20mg/kg组灌胃2g/L的悬浊液0.2mL,空白组灌胃同样剂量的蒸馏水。按发病不同时间每组再分为3组,各7只,超急性期组灌胃1次;急性期组灌胃1次/d,共7次;慢性期组灌胃1次/d,共28次。②标本的处理:禁食12h(8Pm～8Am)后,超急性期组在第1次灌胃后3h,急性期组(1周)和慢性期组(4周)灌胃1次/d,最后一次灌胃后3h,摘眼球取血后颈椎脱臼处死小鼠,立即取小鼠的胰腺置体积分数为0.1的中性甲醛液中固定24h,常规制作石蜡切片,厚4μm。采用苏木精-伊红染色,光镜下观察胰岛炎的情况。应用原位末端转移酶标记法染凋亡细胞,用链霉亲合素-生物素化过氧化物酶复合物免疫组织化学法染β细胞,进行β细胞凋亡计数。结果:纳入动物63只,均进入结果分析。①苏木精-伊红染色显微镜观察显示:空白对照组、氯氮平4mg/kg组、氯氮平20mg/kg组小鼠胰岛均位于胰腺外分泌部之中,其岛形丰满,轮廓清晰,胰岛细胞分布均匀,均未见淋巴细胞浸润。②免疫组织化学染色显微镜观察显示:空白对照组、氯氮平4mg/kg组、氯氮平20mg/kg组小鼠胰岛轮廓清晰,胰岛细胞分布均匀,内外分泌部界限清楚,大量的β细胞胞浆呈棕黄色的胰岛素阳性表达,未见β细胞凋亡,可见少量散在的胰腺腺泡细胞凋亡。结论:氯氮平对胰腺β细胞没有明显的毒害作用,不诱导β细胞的凋亡。     

氯丙嗪和氯氮平维持治疗期精神分裂症患者脑白质完整性比较研究

目的:比较以氯丙嗪和氯氮平维持治疗的精神分裂症病情稳定期患者脑白质完整性差异特征。方法:选择氯丙嗪和氯氮平维持治疗的病情稳定的精神分裂症患者以及正常对照组各24例,入组患者采用阳性和阴性症状量表(PANSS)以及住院精神病人社会功能评定量表(SSPI)进行评估。所有被试者以美国GE HDx3.0T磁共振扫描仪进行扩散张量成像(DTI)扫描,基于纤维示踪的空间统计方法(TBSS)分析3组脑白质完整性(各向异性分数FA、轴向弥散率DA、径向弥散率DR和平均弥散率MD值)差异区域及其与临床症状的相关性。结果:氯氮平和氯丙嗪组间PANSS和SSPI量表评分差异无统计学意义,两组间FA、DA、DR和MD值差异也无统计学意义。与正常对照组比较,氯丙嗪组胼胝体体部和膝部、左侧扣带回和右侧前放射冠FA值显著降低;氯氮平组胼胝体体部、膝部及压部、左右前放射冠、左右丘脑后辐射、左侧上纵束和双侧扣带回FA值显著降低;氯氮平组穹窿和左侧内囊后肢DA值显著增高;氯氮平组胼胝体体部、膝部及压部、左右前放射冠和左右丘脑后辐射DR值显著增高;氯氮平组胼胝体体部和膝部、左右前放射冠和左侧丘脑后辐射MD值显著增高。氯氮平组丘脑后辐射FA值与PANSS阳性分呈负相关(r=-0.697,P<0.01)。结论:精神分裂症患者维持治疗期仍存在脑白质完整性损伤,氯氮平治疗患者更为广泛,这可能是患者病情较难控制的病理因素之一。     

精神分裂症表观遗传学的研究进展

简述精神分裂症表观遗传学机制.     

血管内皮生长因子165基因修饰人骨髓间充质干细胞复合兔脱细胞真皮基质构建活性组织工程皮肤

背景:利用组织工程原理构建的人工皮肤替代物用于皮肤移植可有效解决供皮不足这一难题,但组织工程皮肤很大程度上受制于移植物血管网缺乏造成的细胞供养障碍而导致失效。目的:以血管内皮生长因子165基因修饰的人骨髓间充质干细胞复合兔脱细胞真皮基质,拟构建活性组织工程皮肤。设计、时间和地点:以基因工程为基础的组织构建实验,于2008-03/06在南昌大学第一附属医院烧伤研究所完成。材料:普通级新西兰大白兔5只用于提取脱细胞真皮基质原料,由南昌大学医学院动物科学部提供,人骨髓间充质干细胞取自临床骨髓穿刺检查正常的患者,pShuttle-CMV/VEGF165质粒转化大肠杆菌菌种由武汉协和医院郜勇博士惠赠。方法:无菌条件下切取兔耳全层皮肤,将2cm×2cm皮片置于0.25%胰酶-EDTA消化液中去掉表皮,再置入曲拉通X-100溶液使真皮细胞完全脱净,磷酸盐缓冲液反复清洗,即为脱细胞真皮基质,4℃保存备用。采用密度梯度离心与贴壁筛选法体外分离培养人骨髓间充质干细胞,取传至第3代细胞,按5×105/孔密度接种,待细胞达80%融合时进行脂质体介导的pShuttle-CMV/VEGF165质粒转染,接种于制备好的脱细胞真皮基质上体外联合培养。主要观察指标:骨髓间充质干细胞与脱细胞真皮基质的形态观察,组织工程皮肤结构观察。结果:体外培养的骨髓间充质干细胞大部分呈梭形,基因转染后细胞形态及活性无明显影响;脱细胞真皮基质呈瓷白色,柔韧有弹性。血管内皮生长因子165基因修饰的骨髓间充质干细胞与脱细胞真皮基质共培养2d后,所构建的组织工程皮肤呈淡红色,质软,接种细胞生长状态正常,苏木精-伊红染色及扫描电镜观察可见在脱细胞真皮基质的间隙中有大量长梭形细胞附着生长。结论:血管内皮生长因子165基因转染的人骨髓间充质干细胞在兔脱细胞真皮基质中生长良好,可在体外联合构建活性组织工程皮肤。     

红霉素软膏用于留置导尿后溢尿的效果观察

留置导尿是治疗各种原因引起的排尿困难以及危重患者观察尿量的基本手段，也是手术患者术前留置尿管排空膀胱的必备工作。但患者留置导尿后存在尿液外溢，污染内衣、床单会造成患者自我形象的缺失，增加压疮的风险、泌尿系感染的机会和护士的工作量，并影响对尿量的观察。因此，如何防止留置导尿后溢尿，是护理人员值得思考的一个问题。笔者采用红霉素软膏在尿道外口周围外涂，防止溢尿效果较好。     

董氏正经奇穴疗法治疗第三腰椎横突综合症36例临床观察

第三横突综合症又称腰三横突周围炎或腰三横突滑膜炎,属中医＂痹证＂范畴.本病多发于青壮年及体力劳动者,是临床引起腰腿痛的常见病因之一,多见腰痛呈持续性,少数患者主诉腰部慢性和间歇性酸胀、钝痛,部分患者疼痛可放射到臀部或大腿前外侧乃至膝关节.笔者近年来运用董氏正经奇穴疗法治疗第三腰椎横突综合症36例,疗效显著,现报道如下.     

预胶化淀粉用于小剂量肠溶阿斯匹林直接压片

以预胶化淀粉为主要辅料,采用全粉末直接压片,解决主要因阿斯匹林由于湿法制粒促使水解的问题。通过用正交试验法筛选处方,对制剂的质量和稳定性进行考察,结果表明,采用本法制备的肠溶阿斯匹林片在考察期间的硬度、崩解时限、含量及游离水杨酸均符合中国药典规定。本法具有工艺简单,增加片剂的稳定性等优点。     

氯氮平和经典抗精神病药的长期治疗对患者体重、糖代谢及血脂的影响

目的 探讨长期应用氯氮平和经典类抗精神病药(APS)对精神分裂症患者体重、血糖和血脂等代谢指标的影响及其可能的相关因素.方法 共调查使用APS≥5年的精神分裂症患者271例,分别测量其身高和体重,检测空腹和餐后2h血糖、空腹血清游离脂肪酸、血清胰岛素和瘦素水平.按药物使用情况将患者分为氯氮平组、经典APS单一治疗组(经典组)或联合用药组进行比较.结果 [1]联合用药组体质量指数、空腹血糖、血甘油三酯和血游离脂肪酸水平均显著高于经典组(P＜0.05);血胰岛素和胰岛素抵抗指数也均显著高于经典组和氯氮平组(P＜0.05).[2]氯氮平组和联合用药组糖耐量降低和2型糖尿病发生率均明显高于经典组(P＜0.05).[3]患者体质量指数与其空腹血糖、血清瘦素、血甘油三酯、胆固醇水平以及与胰岛素抵抗指数均呈正相关(P均小于0.05);患者血清瘦素水平与其血胰岛素水平也呈正相关(P=0.008).[4]多元逐步线型回归分析表明,进入影响空腹血糖水平方程的因素分别为胰岛素抵抗指数、血胰岛素、胆固醇和体质量指数(P＜0.05).结论 单用氯氮平及其与经典抗精神病药联用,均易导致患者肥胖,且易导致患者血糖、血脂、血游离脂肪酸水平升高,并与胰岛素抵抗和糖耐量降低发生相关,可能增加2型糖尿病的发生.     

人血管内皮生长因子165基因转染人骨髓间充质干细胞的实验研究

Objective To establish an effective method of transfecting human marrow mesenchymal stem cells (MSC) with human vascular endothelial growth factor 165 ( VEGF 165) gene. Methods MSCs isolated and cultured in vitro were divided into transfection group (pShuttle-CMV/VEGF 165 plasmid was transfected into MSCs through liposome-mediating method), empty plasmid group (pShuttle-CMV vehi-cle was transfected into MSCs as control), liposome group (liposome was transfected into MSCs as control) and control group(normal culture). Expressions of Mrna and protein of MSCs were determined by RT-PCR, enzyme-linked immunosorbent assay and Western Blot. Sensitivity to MSCs on VEGF plasmid transfec-tion was detected by MTT test. Results Expression level of VEGF 165 gene Mrna in transfection group, empty plasmid group, liposome group, and control group was respectively 0.89 ± 0.03, 0. 34 ± 0.04, 0.40 ± 0.03, and 0.30 ± 0.03, and the difference between transfection group and the other three groups was statistically significant ( P <0. 01 ). Content of VEGF protein in transfection group, empty plasmid group, liposome group, and control group was respectively (778 ± 35 ), (543 ± 24), (561 ± 28), (571 ± 23) pg/Ml, and the difference between transfection group and the other three groups was statistically significant ( P <0.01 ). In the transfection group, expression level of VEGF protein peaked on 7th day after transfec-tion, which was decreased gradually later. In transfection group, expression level of V EGF 165 protein was obviously higher than that of the other three groups ( P <0. 01 ), and no inhibitory effect of VEGF plasmid transfection on MSCs proliferation was found. Conclusions The method for transfecting human VEGF 165 gene into MSCs is established in this research, through which target gene and protein can express effectively.