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1.
植物偏爱密码子优化HPV18L1全长基因的重叠PCR合成   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的 以重叠PCR方法 合成植物偏爱密码子优化后的人乳头瘤病毒18L1全长基因.方法 自GenBank获取国内外所发布的HPV18L1全长基因序列,经生物信息学分析后选定目标序列,经Synthetic Gene Designer及JCat(Java Codon Adaptation Tool)分析软件将此序列原始密码子改造为植物偏爱密码子,在C端加入蛋白纯化标签His-tag,获得改造后的HPV18L1全长序列(mHPV18L1).结合酶切位点分析将mHPV18L1设计为204~477 bp的五个大片段LS1-LS5,再将每个大片段分割成57~59 bp的 5~11个寡聚核苷酸短链,设计合成5对内引物和1对外引物,经重叠PCR扩增获得mHPV18L1全长基因,纯化后将其克隆入pMD18T载体,酶切、测序鉴定插入子.结果 以重叠PCR成功扩增获得mHPV18L1全长,pMD18T-mHPV18L1重组质粒经酶切、PCR鉴定均得到预期1749 bp大小的片段,并经测序验证.结论 获得以植物偏爱密码子进行序列优化的mHPV18L1全长基因及其重组质粒pMD18T-mHPV18L1,为后续mHPV18L1的植物转化研究奠定了一定的工作基础.  相似文献   
2.
目的:了解鼻内窥镜术后患者疼痛程度及影响因素,探讨相应的护理对策。方法:采用五指疼痛问答法对120例鼻内窥镜术后患者的疼痛程度进行观察、分析原因。结果:鼻内窥镜术后患者疼痛的程度不同,原因与多方面的因素有关。结论:采取相应的护理对策,如:做好心理护理、局部冷疗、保持环境安静舒适、争取家属配合,可减轻病人的疼痛,提高病人的舒适度。  相似文献   
3.
本文报告99例变应性鼻炎患者及50例健康人Mg、Mn、Mo、Sr、Cd、Cr、Ni、Ti、Zn、Ca、Fe和Cu等12种人体必需元素含量,经统计学分析表明患者组Mo、Ti、Zn、Fe元素的含量低于对照组(P〈0.01),Mg含量高于对照组(P<0.01),Mn、Sr、Cd、Ni、Ca、Cu元素水平两组无明显差异(P>0.05),Cu/Zn比值明显高于对照组(P<0.01),本文对变应性鼻炎在病因学及综合治疗方面提供了新的线索。  相似文献   
4.
目的 探讨自身免疫性溶血性贫血(Autioimmune Hemolytic Anemin,AIHA)的病因.方法 对65例AIHA的临床资料进行回顾性分析.结果 AIHA病因不明者19例占29.2%,继发性患者46例占70.8%.通过统计发现,在继发性因素中以风湿免疫性疾病20例居首,其次为淋巴细胞增殖性疾病19例,再次为非血液系统恶性肿瘤3例.分别占继发性的43.4%、41.3%、和6.5%.感染和药物各2例,分别占4.3%.结论 AIHA的病因中继发性者多于原发性者,继发性因素中以风湿免性疾病和淋巴细增殖性疾病为主,少数为恶性肿瘤、感染和药物.  相似文献   
5.
背景与目的:目前胃癌化疗疗效尚不理想,通过预测个体肿瘤对药物的敏感性来指导临床治疗,以提高疗效,早已成为化疗界瞩目的问题。本研究通过三维培养药敏实验测定胃癌的药物敏感性,并通过测定多药耐药基因表达产物水平,分析两者之间的关系。方法:应用三维培养体外药敏实验技术,测定表阿霉素、顺铂、草酸铂、5-FU、泰素帝、伊立替康6种单药和5-FU+表阿霉素+顺铂、5-FU+伊立替康、5-FU+草酸铂、5-FU+泰素帝+顺铂4组联合用药对22例胃癌组织的抑制率,并计算敏感率;应用逆转录聚合酶链反应(RT—PCR)和免疫组化法检测胃癌组织中MDR1、MRP1、ABCG2基因蛋白的表达。结果:单药组中5-FU对胃癌组织的抑制率和敏感率最高,分别为29.8%和50.0%:联合用药组抑制率最高为5-FU+泰素帝+顺铂(59.8%),敏感率最高为5-FU+表阿霉素+顺铂(77.3%);联合用药组抑制率和敏感率均高于单药组(P〈0.05)。胃癌组织中MDR1、MRP1、ABCG2 mRNA的阳性率分别为90.9%、54.5%、77.3%,MDR1、MRP1、ABCG2蛋白的阳性率分别为36.4%、54.5%、36.4%;多药耐药蛋白高表达与胃癌对表阿霉素的耐药有相关性(P〈0.05)。结论:胃癌组织中多药耐药基因MDR1、MRP1、ABCG2蛋白高表达与胃癌组织对表阿霉素的耐药有关。提示这三种耐药基因可能参与介导表阿霉素的耐药。  相似文献   
6.
目的探讨组胺皮试与体内、外检测的相关关系。方法选择变应性鼻炎且粉尘螨皮试结果均为( )或以上患者428例,根据患者粉尘螨皮试结果分为>组胺组;=组胺组;<组胺组,并对各组患者进行血清粉尘螨特异性IgE的检测。结果>组胺组患者血清特异性IgE阳性率为100%,均在2级以上,其中3级以上有156例,占91.76%。=组胺组患者血清特异性IgE阳性率为92.37%,且均在1~3级,其中1~2级占83.05%。<组胺组患者血清特异性IgE阳性性率只有1.43%。结论判断变应原皮内试验结果应与组胺皮试的风团面积相比,比传统方法更客观的反映患者对某种变应原的敏感程度,将有利于指导临床治疗。  相似文献   
7.
目的 观察国产甲磺酸伊马替尼治疗初诊慢性粒细胞白血病慢性期(CML-CP)的效果及安全性.方法 回顾性分析东莞市人民医院2014年10月至2016年10月收治的23例年龄>18岁、初次确诊、除羟基脲外未接受其他任何抗CML治疗的CML-CP患者临床资料,所有患者均接受国产甲磺酸伊马替尼400 mg/次,1次/d口服治疗,评价3、6、12个月时的血液学、分子生物学反应及安全性.结果 23例患者治疗后均达到血液学完全缓解.在可评估的20例患者中,在3个月时15例bcr-abl国际标准化(IS)值<10%;治疗6个月时16例达bcr-abl< 1%;治疗12个月时8例bcr-abl<0.1%.不良反应均可耐受.结论 国产甲磺酸伊马替尼治疗初诊CML-CP疗效可靠,不良反应可耐受.  相似文献   
8.
目的分析曲美他嗪联合小剂量CAG方案治疗老年急性髓系白血病(AML)的有效性及安全性,并观察联合方案对患者血清学相关指标水平表达的影响。方法选择老年AML患者120例作为研究对象,根据随机数字表法将其分为对照组与研究组,各60例。患者入院后均接受常规治疗与对症治疗,并给予患者小剂量CAG方案治疗,在此基础上研究组联合使用曲美他嗪治疗,连续治疗2个周期后评价患者治疗效果,对比两组治疗有效率;分别于治疗前、治疗2个周期时,检测并对比两组血清学相关指标水平变化情况,包括α-羟丁酸脱氢酶(HBDH)、乳酸脱氢酶(LDH)及p53蛋白;治疗期间记录并比较两组不良反应发生情况。结果两组治疗总有效率比较差异无统计学意义(P>0.05);治疗前,两组血清HBDH、LDH、p53水平比较差异均无统计学意义(P>0.05);治疗2个周期时,两组血清HBDH、LDH、p53水平均较治疗前显著降低,且研究组治疗2个周期时各指标水平均显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);两组胃肠道反应、骨髓抑制、出血、肝功能异常、肺部感染等不良反应发生率比较,差异均无统计学意义(P>0.05);研究组治疗期间心肌毒性(慢性心肌损伤)发生率显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论曲美他嗪联合小剂量CAG方案治疗老年急性髓系白血病疗效确切,可调节血清HBDH、LDH、p53水平,较单一的小剂量CAG方案更利于减少患者心肌毒性发生,且不会增加其他药物毒性反应发生率,在提高用药安全性方面有一定价值。  相似文献   
9.
目的 探讨自身免疫性溶血性贫血(Autioimmune Hemolytic Anemin,AIHA)的病因.方法 对65例AIHA的临床资料进行回顾性分析.结果 AIHA病因不明者19例占29.2%,继发性患者46例占70.8%.通过统计发现,在继发性因素中以风湿免疫性疾病20例居首,其次为淋巴细胞增殖性疾病19例,再次为非血液系统恶性肿瘤3例.分别占继发性的43.4%、41.3%、和6.5%.感染和药物各2例,分别占4.3%.结论 AIHA的病因中继发性者多于原发性者,继发性因素中以风湿免性疾病和淋巴细增殖性疾病为主,少数为恶性肿瘤、感染和药物.  相似文献   
10.
背景与目的:目前肿瘤化疗疗效尚不理想,通过预测个体肿瘤对化疗药物的敏感性来指导临床治疗,有可能提高化疗疗效。本研究通过三维培养药敏实验测定结直肠癌的药物敏感性,并分析与肿瘤组织多药耐药基因表达产物水平的关系。方法:应用三维培养体外药敏实验技术,检测表阿霉素、顺铂、草酸铂、氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)、泰素帝、伊立替康6种单药和5-FU+表阿霉素+顺铂、5-FU+伊立替康、5-FU+草酸铂、5-FU+泰素帝+顺铂4组联合用药对22例结直肠癌组织的抑制率,抑制率大于30%定义为敏感,计算敏感率。应用逆转录聚合酶链反应和免疫组化法测定结直肠癌组织中MDR1、MRP1、ABCG2基因蛋白表达水平;用Spearman相关分析法分析肿瘤药物敏感性和多药耐药蛋白表达的相关性。结果:单药组抑制率最高为草酸铂(17.5%),敏感率最高为5-FU(36.4%);联合用药组抑制率最高为5-FU+草酸铂(54.1%),敏感率最高为5-FU+表阿霉素+顺铂(71.4%)和5-FU+泰素帝+JJRSt3(71.4%);联合用药组抑制率和敏感率均高于单药组(P〈0.05)。MDR1、MRP1、ABCG2mRNA的阳性率分别为88.9%、55.6%、55.6%:MDR1、MRP1、ABCG2蛋白的阳性率分别为55.6%、33.3%、50.0%;多药耐药基因MDR1、MRP1、ABCG2mRNA和蛋白的表达无相关性(P〉0.05)。ABCG2蛋白高表达与结直肠癌对表阿霉素的耐药有相关性(P〈0.05)。结论:结直肠癌多药耐药蛋白表达与肿瘤药物敏感性有一定相关性;结合三维培养药敏实验和多药耐药基因表达产物水平检测,有可能对个体肿瘤的化疗敏感性进行预测,筛选化疗敏感药物。  相似文献   
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