电针对豚鼠耳蜗螺旋神经节细胞的保护作用

目的:探讨电针预防庆大霉素对耳蜗螺旋神经节细胞(cochlearspiralganglioncells,SGC)损伤的作用。方法:选用耳郭反射正常,体质量为300～350g的健康杂色豚鼠,雌雄兼用,随机分成3组:对照组10只,肌肉注射生理盐水2mL/(kg·d);庆大霉素组15只,肌肉注射硫酸庆大霉素80mg/(kg·d);电针组15只,给予电针(针刺双侧“听宫、翳风、肾俞”穴)1次/d;针刺后再给予庆大霉素同对照组,各组用药均25d。用脑干听觉诱发电位(BAEP)检测动物BAEP反应阈值;用组织学方法检测耳蜗SGC的形态学变化。结果:在用药前对照组组、庆大霉素组和电针组BAEP反应阈分别为:(31.85±2.19),(32.23±2.26),(32.19±2.24)dBpeSLP;用药后27d检测分别为:(32.27±2.21),(59.58±17.74),(45.67±9.35)dBpeSLP。庆大霉素组、电针组分别与对照组组比较,差异均有显著性意义(t=6.809,4.435,P<0.01);庆大霉素与电针组比较差异亦有显著性意义(t=3.800,P<0.01)。在放大倍数为400倍光镜下平均在80μm×80μm视野内SGC存活数为:对照组(14.08±0.79)个,庆大霉素组(9.16±2.55)个,电针组(11.17±2.08)个;庆大霉素组与电针组比较差异有显著性意义(t=2.367,P<0.05)。结论:电针对庆大霉素引起的耳蜗螺旋神经节细胞损伤有明显的预防作用。     

加减味耳聋左慈丸对庆大霉素耳毒性的防治及其机制研究

目的：观察耳鸣、耳聋的传统中药方剂“耳聋左慈丸”加减味对庆大霉素耳毒性的防治作用，并探讨其作用机制。方法：选用耳郭反射正常，体质量为300～350g的健康杂色豚鼠，雌雄兼用，随机分成3组，对照组15只，肌肉注射生理盐水2mL／(k&;#183;d)，生理盐水4mL／(kg&;#183;d)灌胃；庆大霉素组15只，肌肉注射硫酸庆大霉素80mg／(kg&;#183;d)，生理盐水4mL／(k&;#183;d)灌胃；中药组15只，肌肉注射硫酸庆大霉素同庆大霉素组，中药煎剂浓缩液4mL／(kg&;#183;d)灌胃。各组连续用药均25d。用脑干听觉诱发电位的方法检测庆大霉素耳中毒豚鼠听阈的变化；用组织化学的方法检测耳蜗毛细胞酸性磷酸酶的变化。结果：用药前对照组、庆大霉素组和中药组的脑干听觉诱发电位反应阈值分别为：32．28&;#177;2．55，32．34&;#177;2．52和32．32&;#177;2．54；用药后第27天分别为：32．30&;#177;2．73，54．95&;#177;18．62和41.76&;#177;9．36。用药后27d庆大霉素组和中药组的脑干听觉诱发电位反应阈值升高，差异有显著性意义(t=3．466，P&;lt;0．01)。耳蜗毛细胞内酸性磷酸酶染色的变化：耳蜗铺片在光镜下观察：正常豚鼠耳蜗基底膜铺片毛细胞酸性磷酸酶染色呈棕褐色，显色分布均匀，毛细胞排列整齐；庆大霉素致耳聋的豚鼠耳蜗毛细胞酸性磷酸酶显色变化依动物耳聋程不同，出现染色缺失程度亦不同；庆大霉素组酸性磷酸酶染色缺失显著，中药组酸性磷酸酶染色缺失变化轻，两组耳蜗铺片显示有明显差别。结论：该中药方剂能降低庆大霉素的耳毒性；保护耳蜗毛细胞溶酶体的完整性，降低庆大霉素对溶酶体的损坏而造成的毛细胞自溶性损伤，是该方剂降低庆大霉素耳毒性的机制之一。     

差速贴壁技术对大鼠脑皮质星形胶质细胞纯化率的影响

目的:观察差速贴壁技术对星形胶质细胞纯化率的影响,旨在建立一套可靠的大鼠脑皮质星形胶质细胞的取材分离、纯化培养技术。方法:实验于2006-06/08在泰山医学院生命科学研究所完成。实验材料:出生2～3d的Wistar大鼠,雌雄不拘,由泰山医学院生命科学研究所实验动物中心提供。实验方法:选用出生二三天的Wistar大鼠进行脑皮质星形胶质细胞原代培养。实验分两组培养:常规培养组和差速贴壁培养组。差速贴壁培养组分别于15,30min取出,轻轻翻转培养瓶,将上清液移至另一培养瓶中,放入培养箱中继续培养。7～10d后传代,待细胞分层生长后,置于37℃摇床中250r/min振荡18h,倒掉上清液,D-Hank’s液洗3次后,加入0.25%胰酶消化,倒置显微镜下观察,待细胞突起回缩后加入含血清的培养基终止消化,用吸管反复吹打使细胞从瓶壁上脱落,细胞悬液1000r/min离心5min后,弃上清液,加入含体积分数为0.2血清的DMEM培养基混悬沉淀,接种入预先涂有L-多聚赖氨酸的培养瓶中继续培养。采用双重免疫荧光法鉴定星形胶质细胞纯度,测定积分吸光度值判断星形胶质细胞的生长状况。结果:①应用差速贴壁技术培养星形胶质细胞可明显提高星形胶质细胞纯度[常规培养组:(82±3)%,差速贴壁培养组15min:(94±2)%,差速贴壁培养组30min:(95±2)%,P<0.01]。差速贴壁需要充分的时间,15min组和30min组在提高星形胶质细胞纯度方面无明显差别。②差速贴壁培养组星形胶质细胞积分吸光度值高于常规培养组(常规培养组:528±25,差速贴壁培养组15min:972±17,差速贴壁培养组30min:996±35,P<0.05)。结论:①差速贴壁技术可明显提高星形胶质细胞纯化度,并且星形胶质细胞生长状态明显优于常规培养方法。②最佳差速贴壁时间为15min,过长差速贴壁时间对提高星形胶质细胞纯度无明显影响。     

硒、镉对荷人肝癌裸鼠癌细胞的协同影响

目的:研究微量元素硒、镉对裸鼠人肝癌细胞的协同影响作用。方法:将SMMC-7721人肝癌细胞接种于ALB/C-nu/nu裸鼠,癌细胞成活后,分组分别每日腹腔注射同体积不同浓度的硒、镉溶液,分别于第10、20天观察肝癌细胞的变化。结果:腹腔注射镉组抑瘤率减小并变为负值,肝癌细胞的细胞凋亡率减小,且随着镉浓度的增加抑瘤率负值的绝对值逐渐加大,癌细胞的细胞凋亡率进一步减小;而腹腔注射硒组,抑瘤率和肝癌细胞的细胞凋亡率均增大,且硒的抑瘤率和肝癌细胞的细胞凋亡率均与腹腔注射硒的浓度成正相关。结论:镉可促进肝癌细胞在体内的生长,而硒可明显抑制机体肝癌细胞的生长。     

庆大霉素对豚鼠耳蜗血管纹琥珀酸脱氢酶的影响

文献报道氨基糖成类抗生素（AmAn）对耳蜗血管纹的损害主要在线粒体［‘j。琉怕酸脱氢酶（SDH）是线粒体酶的标志酶，SDH的活性变化反映了线粒体的功能状态「”。本实验主要观察庆大霉素（GE）对豚鼠耳蜗血管纹细胞SDH变化的影响。材料与方法一、实验动物选用耳廓反射正常、日龄45～65d，平均53d，体重为250～0509的健康杂色豚鼠，雌雄兼用，随机分成2组：GE组10只，每天肌肉注射GE80ms／ku，连续注射20d；对照组5只，不做任何处理．只作为耳蜗血管纹SDH的正常对照。二、脑子听觉诱发电位测定用固定装置固定豚鼠，测定用药前后清醒…     

噪声对内耳的损伤

Toynbee(1860)和Haber mann(1890,1906)首先提出并证实噪声可损伤人内耳神经和毛细胞;Wittmaack首先用动物实验研究噪声对内耳的损伤以来,直到50年代早期,光学显微镜观察一直是研究的主要方法。1963年Engstrom和Wetsall首先于透射电镜下观察了豚鼠螺旋器的超微结构:但它不适于系统地,     

碱性成纤维生长因子对豚鼠庆大霉素肾毒性损伤的保护作用

目的　研究碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)对庆大霉素 (GE)所致豚鼠肾损伤的拮抗作用。方法　 2 0只豚鼠随机分成三组 ,正常对照组 (N ,n =6) ,庆大霉素对照组 (G ,n =7) ,庆大霉素bFGF组 (F ,n =7)。G组 :GE 80mg·kg- 1 ·d- 1 肌肉注射 ,连续 1 5d ;F组 :bFGF肌肉注射 80 0U·kg- 1 ·d- 1 ,相隔 1～ 2h后加GE 80mg·kg- 1 ·d- 1 肌肉注射 ,连续 1 5d。第 1 6d取肾固定 ,石蜡包埋切片 ,HE染色 ,光镜观察肾小球、肾小管及肾间质。结果　F组与G组比较 ,F组肾小球毛细血管扩张、充血及内皮细胞肿胀较轻 ;肾小管坏死数量较少 ;肾小管再生、肾间质炎细胞浸润和纤维细胞增生明显。结论　bFGF对豚鼠庆大霉素肾损伤具有预防保护作用     

电针对庆大霉素耳中毒豚鼠耳蜗内琥珀酸脱氢酶的影响

目的　观察电针对豚鼠庆大霉素 (gentamicin ,GE)耳中毒引起的耳蜗琥珀酸脱氢酶 (succinatede hydrogenase ,SDH)变化的影响。方法　将动物随机分成 3组 :GE组动物肌肉注射GE80mg·kg-1 d-1,连续注射 2 0天 :针刺组肌肉注射GE同GE组 ,每天电针双侧听宫、翳风、肾俞穴 1次 ,持续刺激 15min ;对照组动物不做任何处理。以脑干听觉诱发电位 (BAEP)、SDH组织化学检测为观察指标。结果　对照组BAEP和SDH两项指标无明显变化 ;GE组BAEP反应阈明显升高 ,SDH显色变淡或消失 ,毛细胞受损显著 ;针刺组BAEP反应阈升高幅度和SDH变化及毛细胞损害程度均明显低于GE组。结论　针刺组能减轻GE耳毒性 ,对SDH有保护作用     

脑干听觉诱发电位对听神经瘤的早期诊断价值

目的：观察脑干听觉诱发电位（BAEP）对听神经瘤的诊断价值。方法：对20例疑诊为听神经瘤的患者，进行BAEP、CT或MRI影像学检查。结果：20例患者BAEP检查均异常，阳性率为100%，其中17例经CT检查为听神经瘤，3例经MRI检查，后均经手术证实为听神经瘤。结论：BAEP检查是早期观察听神经瘤对听觉通路损害较敏感的方法，并对其现损部位能进行初步定位。     

睫状神经营养因子抑制庆大霉素引起的豚鼠听觉生物电的改变

睫状神经营养因子抑制庆大霉素引起的豚鼠听觉生物电的改变１何成２，康颂建３，窦颖３，史献君３，王成海，敖世洲４，路长林（第二军医大学神经生物学教研室，上海２００４３３；３泰山医学院生理学教研室，泰安２７１０００；４中国科学院上海生物化学研究所国家分子生...