骨形态发生蛋白复合聚（乳酸-羟基乙酸）共聚物／磷酸三钙填充修复兔股骨下段多孔钛周围骨缺损的生物固定效果

背景：课题组前期观察了骨形态发生蛋白复合聚（乳酸-羟基乙酸）共聚物，磷酸三钙人工骨作为填充材料植入多孔钛周围的组织学变化，但是对于该材料生物固定多孔钛的特点尚未得知。目的：评估骨形态发生蛋白复合聚（乳酸-羟基乙酸）共聚物／磷酸三钙三维多孔框架材料修复多孔钛周围骨缺损的生物力学特点。设计、时间及地点：随机对照动物实验，于2005—02／2007—09在解放军第四军医大学实验动物中心完成。材料：以负压抽吸法在5×10^3Pa的压力下将牛骨形态发生蛋白混悬液5mg与聚（乳酸-羟基乙酸）共聚物／磷酸三钙多孔框架复合。新西兰兔36只，随机分为对照组和实验组各18只。方法：于股骨内髁上段0．5cm处制造直径6mm，高为10cm的圆柱状全壁缺损。对照组在羟基磷灰石涂层多孔钛周围填充单纯聚（乳酸-羟基乙酸）共聚物／磷酸三钙材料。实验组在羟基磷灰石涂层多孔钛周围填充复合骨形态发生蛋白的聚（乳酸-羟基乙酸）共聚物／磷酸三钙材料。主要观察指标：填充6，12，24周后取含植入样品的股骨进行生物力学推出测定，测试完毕后标本行扫描电镜观察。结果：所有样品的剪切应力都随时间增长而增大。其中在6，12周实验组剪切应力高于对照组（P〈0．05）。扫描电镜观察6周时断裂位置为植入仿生骨-骨界面，金属表面骨组织量较少。12周时断裂面主要发生在植入仿生骨-多孔钛界面或正在重建的编织骨内或编织骨-皮质骨界面。24周时，可以观察到断裂发生在编织骨-皮质骨界面。结论：应用骨形态发生蛋白复合聚（乳酸-羟基乙酸）共聚物／磷酸三钙材料修复多孔钛周围骨缺损，能够更好地固定生物假体。     

骨形态发生蛋白复合聚(乳酸-羟基乙酸)共聚物/磷酸三钙填充修复免股骨下段多孔钛周围骨缺损的生物固定效果

背景:课题组前期观察了骨形态发生蛋白复合聚(乳酸-羟基乙酸)共聚物/磷酸三钙人工骨作为填充材料植入多孔钛周围的组织学变化,但足对于该材料生物固定多孔钛的特点尚未得知.目的;评估骨形态发生蛋白复合聚(乳酸-羟基乙酸)共聚物,磷酸三钙三维多孔框架材料修复多孔钛周围骨缺损的生物力学特点.设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2005-02/2007-09在解放军第四军医大学实验动物中心完成.材料:以负压抽吸法在5×1 03 Pa的压力下将生骨形态发生蛋白混悬液5 mg与聚(乳酸-羟基乙酸)共聚物,磷酸三钙多孔框架复合.新两兰兔36只,随机分为对照组和实验组各伯只.方法:于股骨内髁上段0.5 cm处制造直径6 mm.高为10 cm的圆柱状全壁缺损.对照组在羟基磷灰石涂层多孔钛周围填充单纯聚(乳酸-羟基乙酸)共聚物/磷酸三钙材料.实验组在羟基磷灰石涂层多孔钛周围填充复合骨形态发生蛋白的聚(乳酸-羟基乙酸)共聚物,磷酸三钙材料.主要观察指标:填充6,12,24周后取含植入样品的股骨进行生物力学推出测定,测试完毕后标本行扫描电镜观察.结果:所宵样晶的剪切应力都随时间增长而增大.其中在6,12周实验组剪切应力高于对照组(P<0.05).扫描电镜观察6周时断裂位置为植入仿生骨-骨界面,金属表面骨组织量较少.12周时断裂面主要发生在植入仿生骨-多孔钛界面或正在重建的编织骨内或编织骨-皮质骨界面.24周时,可以观察到断裂发生在编织骨-皮质骨界面.结论:应用骨形态发生蛋白复合聚(乳酸-羟基乙酸)共聚物/磷酸三钙材料修复多孔钛周围骨缺损,能够更好地固定生物假体.     

LC-MS/MS法检测皮肤科常用中药制剂中添加的7种抗组胺药物北大核心CSCD

目的:建立一种灵敏、快捷的LC-MS/MS方法,快速检测皮肤科常用中药制剂中添加的氯雷他定、盐酸苯海拉明、盐酸赛庚啶、盐酸西替利嗪、盐酸异丙嗪、咪唑斯汀、马来酸氯苯那敏7种抗组胺化学药物。方法:片剂、软膏和洗剂等样品均采用甲醇超声溶解、离心的方法进行前处理。LC-MS/MS条件:采用Agilent Eclipse Plus C_(18)(2.1 mm×50 mm,3.5μm)色谱柱,以含0.1%甲酸的乙腈(A)-含0.1%甲酸的水(B)为流动相,进行梯度洗脱(0~0.1 min,5%A→95%A;0.1~4.1 min,95%A;4.1~8 min,95%A→5%A),流速0.4 mL·min^(-1),柱温40℃;选择ESI正离子模式扫描,信号采集方式为多反应监测(MRM)。最后通过比较MRM通道中样品峰与对照品峰及色谱保留时间等信息确定受试样品是否被添加上述抗组胺药物。结果:在一定浓度范围内,氯雷他定、盐酸苯海拉明、盐酸赛庚啶、盐酸西替利嗪、盐酸异丙嗪、咪唑斯汀和马来酸氯苯那敏7种抗组胺化学药物有较好的线性和稳定性,且检测下限均在0.5~2.5 ng·mL^(-1),定量下限均在1~5 ng·mL^(-1),回收率均在86.2%~112.5%范围内。在9种中药制剂中,4种被检出添加了抗组胺药物。结论:本方法经方法学验证,可作为皮肤科中药制剂中检出添加抗组胺化学药物的检测方法。     

天然多酚成分研究进展

综述了天然多酚的结构类型,提取分离方法的特点、药理活性和应用,并重点介绍了几种药用植物中多酚化合物的化学、药理学等方面的研究进展。     

疲劳的动物模型及发生机制研究进展＊

如今，疲劳广泛存在于各类人群中，这与人们的生活方式以及紧张繁重的工作状态密切相关。疲劳因其发生原因多且对机体的影响相对主观，故并未受到人们的广泛关注和重视。在目前的药物或保健品抗疲劳功效研究中，已报道的疲劳动物模型有包括采用物理、化学、免疫和炎症、放射线、手术、基因工程和癌因等单一因素或多种因素所诱导构建的多种模型。并且人们对疲劳的发生机制提出了一系列学说，包括能量耗竭学说、代谢产物堆积学说、内环境稳态失调学说、自由基影响理论和中枢神经系统保护性抑制学说。本文就近20年来在抗疲劳药物和保健品研究中所涉及到的疲劳动物模型以及可能的发生机制进行了概况总结，为抗疲劳产品的功效评价和机制研究提供参考。     

三维多孔复合人工骨的制备及性能检测

[目的]研制新型三维多孔复合人工骨材料并评价其相关性能.[方法]将海洋贝壳牡蛎粉、消旋聚乳酸按一定比例复合,采用热致相分离法制备多孔复合人工骨(CAB)材料,检测其孔隙率、孔径、生物力学强度;并将CAB和纯PLLA薄片浸泡于37℃平衡液中,观测不同时间点CAB和纯PLLA体外降解变化参数,对其结果进行统计学比较.[结果]研制的CAB材料平均孔隙率为85.1%;电镜下孔径测量大小为100～300 μm,孔隙之间的连通较好,孔隙形态、取向规则有序;压缩强度为2.12 MPa;在观测周期内,随着浸泡时间的延长,CAB和纯PLLA的质量损失率、浸泡液pH值呈现出规律性变化,两组各时期的各项指标比较具有显著性差异(P﹤0.05). [结论] 该法制得的CAB材料的孔隙率、孔径、生物力学强度、体外降解性能表明能满足骨替代材料的要求.     

HPLC法同时测定附子中6种单酯和双酯型生物碱

目的 建立附子中单酯及双酯型生物碱成分的高效液相色谱定量方法.方法 附子干燥粉末用氨水浸润后,以异丙醇一醋酸乙酯(1:1)超声提取30 min,提取液蒸干后溶于0.01%盐酸甲醇中,经微孔滤膜滤过后,20 pL进行HPLC分析,HPLC分析采用Zorbax Extend-C18柱(250 mmX 4.6 mm,5 μm),以乙腈-40 mmol/L醋酸铵缓冲液(氨水调pH 10.0)为流动相进行梯度洗脱,体积流量1.0 mL/min,检测波长230 nm.结果 6种被测生物碱成分,包括乌头碱、次乌头碱、新乌头碱、苯甲酰乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱和苯甲酰新乌头原碱分离良好,各成分质量浓度与峰面积在测定范围内均呈良好的线性关系(r>0.999),重现性好,6种成分的RSD(n=5)均小于1.50%;平均加样回收率(n=5)为98.20%～100.47%;最低检测限分别为0.26、0.36、0.92、0.30、0.52、0.82 ng.结论 本研究所建立的HPLC方法稳定可靠、简便易行,可用于附子类药材中单酯型和双酯型生物碱的同时定量分析,为附子药材及其炮制品的质量评价和质量控制奠定了基础.     

黄花菜中酚类成分对过氧化氢诱导大鼠嗜铬细胞瘤PC12细胞损伤的保护作用研究

目的研究黄花菜中酚类成分对过氧化氢(H2O2)诱导大鼠嗜铬细胞瘤(PC12)细胞损伤的保护作用及机制。方法建立H2O2诱导PC12损伤模型,采用MTT法检测细胞存活率和乳酸脱氢酶法(LDH)检测细胞损伤程度。将对数生长期细胞分为5个组,空白组、模型组、黄花菜酚类成分低剂量组(1.25mg/mL)、中剂量组(2.5mg/mL)、高剂量组(5mg/mL)。按分组连续培养48h;采用MTT法检测其存活率,LDH法检测上层培养基中LDH释放率;利用文献中报道液相色谱-质谱联用(LC-MS/MS)检测细胞外液中多巴胺(DA)、去甲肾上腺素(NE)、乙酰胆碱(Ach)、γ-氨基丁酸(GABA)、谷氨酸(Glu)、色氨酸(TRP)、5-羟色胺(5-HT)、5-羟色氨酸(5-HTP)、5-羟吲哚乙酸(HIAA)9种神经递质的含量。结果与空白组和模型组比较,黄花菜酚类成分的加入使细胞存活率由47.91%升高至76.02%,LDH释放率由300.85%降低至145.61%(P0.05);细胞外液中神经递质含量也发生了明显的变化,9种神经递质分别发生了趋于空白组的变化,9种神经递质(DA、NE、Ach、GABA、TPR、5-HT、5-HTP、5-HIAA)含量得到显著回调(P0.05)。结论黄花菜中酚类成分对H2O2诱导PC12细胞损伤的保护作用,机制可能与调控PC12细胞神经递质释放有关。     

活性人工骨填充修复兔涂层多孔钛周围骨缺损的生物固定效果

目的评估骨形态发生蛋白（BMP）复合仿生人工骨三维多孔框架材料[聚（乳酸-羟基乙酸）共聚物（PLGA）／磷酸三钙（TCP）]修复多孔钛周围骨缺损的可行性。方法将仿生人工骨与提取的BMP复合制备活性人工骨材料。建立修复兔股骨下端多孔钛周围骨缺损模型，应用扫描电镜、能谱分析及生物力学研究该材料的生物固定效果及其特点。结果术后6周，实验组样品孔隙内的能谱图上Ca、P元素的峰已经明显。12周时，实验组样品孔隙内部及其周围的Ca、P含量高于对照组（P〈0．05）。生物力学测定结果显示，所有样品的剪切应力都随时间延长而增大。其中在6周、12周，实验组多孔钛在所有时相点均表现出了比对照组高得多的剪切力（P〈0．05）。结论应用BMP复合PLGA／TCP材料修复假体周围骨缺损，早期能够更好地形成新骨，促进假体生物固定，说明BMP早期骨诱导作用在假体生物固定方面至关重要，具有一定的临床应用潜力。     

具有肺转移特性的人骨肉瘤细胞系PL-1的建立及其生物学特性观察

建立一株人源性骨肉瘤细胞系并进行生物学测定，为骨肉瘤研究提供良好的实验模型。无菌切取骨肉瘤手术标本，于裸鼠表面包埋接种成功后移植瘤标本体外培养得到细胞株，应用形态学观察、流式细胞仪、生长曲线测定、肿瘤标志物测定等方法进行生物学特性研究。结果建立了一株具有肺转移特性的人源性骨肉瘤细胞系PL-1，其成瘤率100%，潜伏期为12天，肺转移率为100%；取其32代细胞进行生物学特性测定，发现其形态结构、排列方式、分化程度与原发瘤保持一致，染色体形态为人类核型，众数在64-66之间，流式细胞仪检测G1期细胞为52.1%，碱性磷酸酶及骨形成蛋白抗体免疫组化染色为阳性。说明应用裸鼠体内移植建立的人骨肉瘤细胞系PL-1与原发瘤保护相同的生物学特性，为一个稳定的细胞系。